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乳酸菌饮料中嗜酸乳杆菌的实时荧光定量PCR检测方法
被引量:
22
1
作者
张娜娜
刘洋
+5 位作者
俞漪
赵渝
窦同海
徐琼
段文锋
翁史昱
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2019年第8期27-32,共6页
目的:为快速准确检测乳酸菌饮料中的嗜酸乳杆菌,建立实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chainreaction,PCR)检测方法。方法:根据嗜酸乳杆菌NCFM的SPIDR保守区域设计特异性引物与探针,借助建立的实时荧光定量PCR方法进行特异性、灵...
目的:为快速准确检测乳酸菌饮料中的嗜酸乳杆菌,建立实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chainreaction,PCR)检测方法。方法:根据嗜酸乳杆菌NCFM的SPIDR保守区域设计特异性引物与探针,借助建立的实时荧光定量PCR方法进行特异性、灵敏度、重复性以及抗干扰能力验证,并利用模拟样品对方法进行检验,最后对市售的实际样品进行检测。结果:该方法的特异性较好;方法的绝对灵敏度达到3 pg,相对灵敏度达103 CFU/mL;重复性检测表明相对标准偏差在2.6%以下。同时进行杂菌干扰实验,在纯基因组水平和培养物水平混合大肠杆菌,扩增均无明显影响,表明建立的方法抗干扰能力较好。利用建立的实时荧光定量PCR方法对模拟样品进行检测并建立标准曲线,得出R^2为0.987,线性较好,可进行实际样品的检测。对市售的11份样品进行检测,其中6份含有嗜酸乳杆菌菌株,5份不含嗜酸乳杆菌菌株,标记嗜酸乳杆菌的样品全部检测出嗜酸乳杆菌且含量在5.83×10~2~3.68×1~04 CFU/mL之间。结论:建立的实时荧光定量PCR方法可快速、准确地检测出乳酸菌饮料中嗜酸乳杆菌。
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关键词
实时荧光定量PCR
嗜酸乳杆菌
定量
检测
下载PDF
职称材料
题名
乳酸菌饮料中嗜酸乳杆菌的实时荧光定量PCR检测方法
被引量:
22
1
作者
张娜娜
刘洋
俞漪
赵渝
窦同海
徐琼
段文锋
翁史昱
机构
上海市
质量
监督检验技术
研究院
国家食品
质量
监督检验中心(
上海
)
上海
师范大学生命与环境
科学
学院
复旦大学生命
科学
学院
上海市
质量
管理科学
研究院
(
上海
)
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2019年第8期27-32,共6页
基金
国家自然科学基金青年科学基金项目(31301486)
上海市自然科学基金项目(13ZR1439600)
国家质量监督检验检疫总局科研项目(2017QK167)
文摘
目的:为快速准确检测乳酸菌饮料中的嗜酸乳杆菌,建立实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chainreaction,PCR)检测方法。方法:根据嗜酸乳杆菌NCFM的SPIDR保守区域设计特异性引物与探针,借助建立的实时荧光定量PCR方法进行特异性、灵敏度、重复性以及抗干扰能力验证,并利用模拟样品对方法进行检验,最后对市售的实际样品进行检测。结果:该方法的特异性较好;方法的绝对灵敏度达到3 pg,相对灵敏度达103 CFU/mL;重复性检测表明相对标准偏差在2.6%以下。同时进行杂菌干扰实验,在纯基因组水平和培养物水平混合大肠杆菌,扩增均无明显影响,表明建立的方法抗干扰能力较好。利用建立的实时荧光定量PCR方法对模拟样品进行检测并建立标准曲线,得出R^2为0.987,线性较好,可进行实际样品的检测。对市售的11份样品进行检测,其中6份含有嗜酸乳杆菌菌株,5份不含嗜酸乳杆菌菌株,标记嗜酸乳杆菌的样品全部检测出嗜酸乳杆菌且含量在5.83×10~2~3.68×1~04 CFU/mL之间。结论:建立的实时荧光定量PCR方法可快速、准确地检测出乳酸菌饮料中嗜酸乳杆菌。
关键词
实时荧光定量PCR
嗜酸乳杆菌
定量
检测
Keywords
real-time fluorescence quantitative PCR
Lactobacillus acidophilus
quantitative
detection
分类号
Q93.331 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
乳酸菌饮料中嗜酸乳杆菌的实时荧光定量PCR检测方法
张娜娜
刘洋
俞漪
赵渝
窦同海
徐琼
段文锋
翁史昱
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2019
22
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