M/XDR-TB的快速分子检测和耐药特征分析

目的 使用分子线性探针杂交技术结合仪器法液体快速培养分析耐多药（ multidrug resistant,MDR）及广泛耐药（extensively drug resistant,XDR）结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,MTB）的耐药基因和表型特征.方法 运用GenoType MTBDR试剂盒检测M/XDR-TB菌株中各耐药基因的突变位点及类型,平行用BD MGIT960系统检测所选菌株对一线及二线抗结核药物的敏感性.结果 （1）94株MDR-TB经MGIT960检测,乙胺丁醇（ethambutol,EMB）、阿米卡星（amikacin,AMK）、氧氟沙星（ofloxacin,OFX）及莫西沙星（moxifloxacin,MFX）的耐药率分别为36.2%、17.0%、54.3%和55.3%.XDR-TB检出率为13.8%.（2）以MGIT960药敏结果作为参考标准,94株MDR-TB中,GenoType MTBDRplus检测MTB对异烟肼（isoniazid,INH）、利福平（rifampin,RFP）耐药的符合率分别为86.2%和95.7%；GenoType MTBDRsl检测MTB对EMB、AMK、OFX及MFX耐药的敏感性分别为47.1%、81.3%、94.1%、94.2%；特异性分别为75.0%、98.7%、90.7%、92.9%.（3）rpoB基因突变中以S531L最多；INH耐药主要由katG基因发生突变导致,以S315T1类型居多；gyrA突变位点主要集中在第94位密码子.所测菌株中有23例为复合耐药,7例为未知突变.结论 M/XDR-TB中,INH、RFP、AMK、OFX及MFX耐药株大多分别是由katG、rpoB、rrs及gyrA突变导致,乙胺丁醇与embB之间的耐药关联性相对较低.GenoType MTBDR试剂盒检测M/XDR-TB敏感性和特异性较好,可以在未获得传统细菌表型药敏结果前指导临床用药治疗.