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hIL-13融合表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达
被引量:
1
1
作者
王文
田志刚
+3 位作者
刘钟滨
王郡甫
刘杰
张建华
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1998年第5期322-325,共4页
通过RTPCR技术直接从激活的健康人外周血单个核细胞(HPBMC)中扩增出约03kb的hIL13基因片段,经DNA重组技术,插入到融合蛋白表达载体pGEX4T2中,转化入感受态的大肠杆菌TG1中,成功地构建...
通过RTPCR技术直接从激活的健康人外周血单个核细胞(HPBMC)中扩增出约03kb的hIL13基因片段,经DNA重组技术,插入到融合蛋白表达载体pGEX4T2中,转化入感受态的大肠杆菌TG1中,成功地构建了hIL13的基因工程表达菌株hIL13pGEX4T2/TG1。经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后表达的GSTIL13融合蛋白经SDSPAGE证明分子量约36kD,表达量约占菌体蛋白总量的10%~30%。复性后IL13融合蛋白的生物学活性可达80~120U/ml。复性后的融合蛋白经凝血酶作用后,可被切割成26kD的GST与10kD的hIL13。
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关键词
hIL-13
RT-PCR
融合蛋白
大肠杆菌
基因表达
下载PDF
职称材料
题名
hIL-13融合表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达
被引量:
1
1
作者
王文
田志刚
刘钟滨
王郡甫
刘杰
张建华
机构
山东省医科院山东肿瘤
生物
治疗研究中心
上海市铁道大学附属铁道医学院微生物学教研室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1998年第5期322-325,共4页
基金
国家自然科学基金
文摘
通过RTPCR技术直接从激活的健康人外周血单个核细胞(HPBMC)中扩增出约03kb的hIL13基因片段,经DNA重组技术,插入到融合蛋白表达载体pGEX4T2中,转化入感受态的大肠杆菌TG1中,成功地构建了hIL13的基因工程表达菌株hIL13pGEX4T2/TG1。经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后表达的GSTIL13融合蛋白经SDSPAGE证明分子量约36kD,表达量约占菌体蛋白总量的10%~30%。复性后IL13融合蛋白的生物学活性可达80~120U/ml。复性后的融合蛋白经凝血酶作用后,可被切割成26kD的GST与10kD的hIL13。
关键词
hIL-13
RT-PCR
融合蛋白
大肠杆菌
基因表达
Keywords
hIL13 RTPCR Fusion protein Gene expression
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
hIL-13融合表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达
王文
田志刚
刘钟滨
王郡甫
刘杰
张建华
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1998
1
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职称材料
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