基于关节力学失稳方法建立兔膝骨关节炎模型

目的探索基于关节力学失稳建立膝骨关节炎动物模型的方法。方法将24只新西兰大白兔随机分为正常组、模型4周组和模型8周组。模型组动物采用手术切断内侧副韧带并切除部分髌韧带的方法造模;正常组仅切开皮肤,显露上述结构而不予特殊处理。各组分别于造模后4周、8周时处死动物,取膝关节标本,病理切片后行HE染色,镜下观察软骨组织形态结构,并应用Mankin评分标准评价关节软骨退变情况;取血清样本,检测IL-1β、TNF-α、MMP-13水平。结果模型4周组和模型8周组的关节软骨标本分别呈现出不同程度的退变表现,两组的Mankin评分均明显高于正常组(P<0.01);与正常组比较,模型4周组、模型8周组动物血清中IL-1β、TNF-α、MMP-13水平均升高,差异具有统计学意义(P<0.01);与模型4周组比较,模型8周组Mankin评分和IL-1β、TNF-α水平明显升高(P<0.01)。结论采用切断内侧副韧带并切除部分髌韧带的方法可获得较为理想的兔膝骨关节炎模型,且操作简单,动物感染率和死亡率低。

中医手法对兔膝骨关节炎软骨退变及MAPK信号转导通路的影响

目的观察中医手法对实验性兔膝骨关节炎软骨退变的干预作用,并从细胞信号转导角度探讨其作用机制。方法 24只新西兰大白兔随机分为3组,即正常组、模型组和手法组,除正常组外,其余两组动物均采用手术方法建立膝骨关节炎模型。造模4周后对手法组给予髌骨按揉、关节被动屈伸等形式的手法治疗。干预8周后处死动物,暴露膝关节行形态学观察,并取股骨髁部做病理切片,行HE染色,镜下观察其组织病理学特征并进行Mankin’s评分,比较各组关节软骨退变情况。应用RT-PCR方法分别检测滑膜组织中IL-1β、i NOS、MMP-13和软骨组织中P38、ERK1/2的mRNA表达水平。应用Western blot方法检测软骨组织内MMP-13及磷酸化的ERK1/2(p-ERK1/2)的蛋白表达。比较各组实验数据并进行统计学分析。结果手法组关节软骨退变程度较模型组明显减轻,Mankin’s评分分值显著低于模型组(P<0.05)。手法组软骨P38、ERK1/2及滑膜组织IL-1β、i NOS、MMP-13的mRNA表达水平较模型组显著下调(P<0.05)。模型组和手法组的MMP-13、p-ERK1/2的蛋白表达较正常关节软骨明显增强,而手法组MMP-13、p-ERK1/2的蛋白活化程度与模型组比较明显受到抑制。结论中医手法能够有效抑制膝骨关节炎的软骨退变程度,影响炎症介质和细胞因子的表达,其机制可能是通过抑制软骨MAPK信号转导通路发挥作用。