细胞内La表达对乙肝病毒复制的影响研究

目的:研究细胞内La的表达对HBV病毒复制的影响。方法:针对人La蛋白序列设计并合成特异性的SiR-NA,转染稳定表达HBV的HepG2.2.15细胞,实时荧光定量PCR测定HepG2.2.15细胞中La mRNA变化水平及HBV DNA复制水平。结果:特异性SiRNA干扰La蛋白的mRNA表达,使La在HepG2.2.15细胞中的表达降低;HepG2.2.15细胞分泌在培养上清液中的HBV DNA水平显著下降,相关性分析结果显示,HBV DNA变化水平与La mRNA变化水平呈正相关。结论:细胞内La可以保护HBV RNA免受核酸酶的破坏、促进HBV病毒复制。

La蛋白与乙型肝炎病毒mRNA稳定性和蛋白质表达的相关性

目的研究La蛋白与乙型肝炎病毒(HBV)mRNA稳定性和蛋白质表达之间的相关性。方法设计并合成La蛋白mRNA特异性小干扰RNA(siRNA),转染HepG2．2．15细胞,继续培养3d后分别裂解转染和未转染siRNA的细胞；抽提蛋白质,Western blot检测La蛋白含量变化；于转染后的第1、2、3、5、7、9天分别收集细胞培养上清液,实时荧光定量聚合酶链反应技术检测上清液中HBV DNA的变化情况,电化学发光分析技术检测乙型肝炎表面抗原,乙型肝炎e抗原含量变化情况。结果La蛋白在转染siRNA的HepG2．2．15细胞中表达明显低于未转染siRNA的细胞；转染siRNA的细胞分泌到上清液中乙型肝炎表面抗原、乙型肝炎e抗原和HBV DNA的含量也明显低于未转染siRNA的细胞。结论在HepG2．2．15细胞内,La蛋白与HBV mRNA稳定性和蛋白质表达具有功能相关性。