N-端融合蛋白对重组HBeAg抗原性的影响

目的 研究 Ｎ－ 末端融合蛋白对大肠杆菌中表达的 Ｈ Ｂｅ Ａｇ 抗原性的影响。方法 用 Ｐ Ｃ Ｒ 法，从抗－ Ｈ Ｂｃ（ ＋ ） 血清标本中获得 Ｈ Ｂ Ｖ Ｐｒｅ ｃ － ｃ 基因片段，将其插入质粒 Ｔｒｃ９９ Ａ，重组成亚克隆 Ｐ Ｈ Ｂ Ｉ。以 Ｐ Ｈ Ｂ Ｉ为模板，扩增获得编码乙肝病毒核心蛋白１ ～１４０ 氨基酸的基因片段，加上终止信号，分别插入质粒ｐ Ｇ Ｅ Ｘ－ ２ Ｔ 和 Ｔｒｃ９９ Ａ 中，各自转化后，以 Ｉ Ｐ Ｔ Ｇ 诱导，大肠杆菌表达插入基因。以 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 和 Ｓ Ｄ Ｓ－ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 方法测定表达产物的分子量和 Ｈ Ｂｅ Ａｇ 、 Ｈ Ｂｃ Ａｇ 滴度。结果 在 Ｉ Ｐ Ｔ Ｇ 诱导下，大肠杆菌中分别表达 Ｎ－ 端融合的 Ｇ Ｓ Ｔ－ Ｈ Ｂｅ Ａｇ 融合蛋白和非融合 Ｈ Ｂｅ Ａｇ 蛋白。分子量各为４１０００ Ｄ 和１５０００ Ｄ。培养裂解物经 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 测定，融合蛋白 Ｈ Ｂｅ Ａｇ ： Ｈ Ｂｃ Ａｇ 的滴度比为２５６ ：１ ，非融合蛋白为１６ ：１ 。结论 Ｎ－ 端融合蛋白 Ｇ Ｓ Ｔ－ Ｈ Ｂｅ Ａｇ 抗原性更接近血清 Ｈ Ｂｅ Ａｇ 。

谷胱甘肽硫转移酶（GST－π）的肝内定位意义及与γ－GT、AFP的比较

本文对各种肝病肝组织内人胎盘型谷胱甘肽硫转移酶（ＧＳＴ）作免疫组化定位检测，并与γ－谷胺酰转肽酶（γ－ＧＴ）、甲胎蛋白（ＡＦＰ）作比较，发现肝癌组及慢性肝病组内ＧＳＴ－π检出率分别为２１／２２，９５．４５％和９／１３，６９．２３％，均高于γ－ＧＴ（７７．２７％和３０．７％）以及ＡＦＰ（７２．７３％和７．６９％），而非肝病对照组为０。ＧＳＴ－π在肝癌之癌内、外组织检出率均高，但γ－ＧＴ以癌外为高，ＡＦＰ以癌内为高，结果表明ＧＳＴ－π作为肝细胞癌的标志，其敏感性高于ＡＦＰ和γ－ＧＴ。文内还讨论了ＧＳＴ－π在慢性肝病中检出的意义。