5个不同灵芝种菌丝体多糖理化性质及免疫活性研究

对灵芝属G.lucidum,G.tsugae,G.oerstedii,G.resinaceum,G.subamboinens5个不同种用同一条件进行了液体发酵培养、多糖提取、理化性质及免疫活性的分析。结果表明,5种灵芝的菌丝体多糖得率相差较大,以G.oerstedii最高,但各多糖提取物分子量分布相似,单糖组成均以葡萄糖为主,并含半乳糖、甘露糖、盐酸氨基葡萄糖、岩藻糖。5种多糖提取物均能显著增强小鼠巨噬细胞Raw264.7吞噬作用、释放NO,但以G.subamboinens菌丝体多糖提取物的活性最强。这些多糖提取物还均能促进小鼠脾细胞的增殖,并对ConA诱导的淋巴细胞增殖有抑制作用。研究表明灵芝属内其他3个物种的菌丝体多糖提取物理化特征与G.lucidum和G.tsugae接近,并同样具有免疫调节作用。

云芝糖肽的免疫和抗肿瘤药理活性研究进展

对云芝糖肽在免疫调节、抗肿瘤等方面药理活性及其作用机制的最新研究进展作了综述,介绍了云芝糖肽对机体免疫功能的双向调节作用,以及云芝糖肽通过线粒体通路和死亡受体通路诱导肿瘤细胞凋亡的作用机制和抑制前列腺癌干细胞进而预防肿瘤发生的机制。

药用真菌β-(1,3)-D-葡聚糖构效关系及检测方法研究进展

β-(1,3)-D-葡聚糖是许多活性真菌多糖的核心结构,由于具有免疫调节、抗肿瘤等多种生物活性,已成为研究热点。本文从β-(1,3)-D-葡聚糖的主链、支链分支度、支链基团、分子量及空间结构等方面介绍了结构与生物活性之间的关系,并对目前该类多糖的定性方法及鲎G因子、半乳糖神经酰胺ELISA等定量检测方法进行了综述。

灰树花液体培养菌丝产多糖的研究

在液体培养条件下探讨了培养基的碳源、氮源、初始 pH及其正交试验对灰树花菌丝生长和产糖的影响。适合的碳源是葡萄糖 +土豆 ,淀粉 ,葡萄糖 +蔗糖 ;氮源为蛋白胨 ;初始 pH为6.0。优化配方为葡萄糖 3% ,土豆汁 2 0 % ,蛋白胨 0 .6% ,豆油 0 .1% ,硫酸镁 0 .0 5% ,磷酸二氢钾0 .0 5% ,pH6.0。液体培养 14d产糖量最高 ,达 34 .1mg/ 10 0mL。

灵芝多糖研究新进展

灵芝多糖是灵芝的主要活性成分之一，具有广泛的生理活性。本文对近年来灵芝多糖在免疫调节、抗肿瘤、清除自由基、抗血栓血凝、降血糖及护肝等方面的新进展，以及灵芝多糖的深层发酵条件和结构分析研究中的新结果作了简要综述。

制备型高效液相色谱在生物医药制品领域的应用

制备型高效液相色谱(preparative high performance liquid chromatography,Prep-HPLC)是一种使用高压、大流量液体输送系统在高分辨率、大内径、高载量分离柱上进行样品高纯度分离的液相色谱制备方法.应用该方法分离的产品在纯度、回收率、分离效率等方面远远优于传统的制备方法,因此在生物制品和药物研究、生产领域得到广泛应用[1-3].本文就近年来Prep-HPLC方法的研究进展及其在生物医药制品领域的应用做一综述.……

云芝子实体氯仿提取物体外抗肿瘤活性研究

研究了云芝子实体氯仿提取物(CVFC)对人肝癌细胞株HepG2的体外抑制作用,并初步探讨了抑瘤机制。MTT结果显示,CVFC对HepG2细胞有明显的抑制作用,并呈明显的量效关系,半数抑制浓度为(75.83±3.96)μg.mL-1。荧光显微镜和透射电镜形态观察发现CVFC处理可使细胞发生细胞皱缩、核碎裂等凋亡特征;Annexin V/PI双染结果证实有胞膜磷脂酰丝氨酸的翻转,经150μg.mL-1 CVFC处理HepG2细胞24 h后早期凋亡率为17.82%,晚期凋亡率为22.59%,均显著高于对照组5.35%和3.75%。这些结果表明CVFC具有体外抑制HepG2细胞的活性,其抑瘤机制与诱导肿瘤细胞凋亡有关。

云芝菌丝体胞内外提取物对Raw264.7细胞的双向免疫调节作用

本文研究了云芝菌丝体胞内外多糖提取物PSK和YZLY对小鼠Raw264.7巨噬细胞的体外调节作用。结果发现,5-100μg/mL的PSK和YZLY均可上调Raw264.7细胞的iNOS表达,促进NO和TNF-α产生。而对于脂多糖(LPS)刺激的Raw264.7细胞,PSK和YZLY均可不同程度地下调iNOS、NO和TNF-α的生成。这些结果表明PSK和YZLY对小鼠巨噬细胞的免疫调节具有双向性。

微生物纤溶酶的多样性及应用前景

微生物是溶栓药物的重要来源。本文综述了细菌、放线菌和真菌产生的纤溶酶的种类、性质及药理作用等进展,整理了基因工程技术在筛选产酶菌株及提高分泌物产量方面的研究近况,并对纤溶酶作为溶栓剂的应用前景进行了展望。

灰树花子实体多糖和菌丝体多糖的比较分析

从灰树花 (Grifolafrondosa)子实体和菌丝体中提取分离得到子实体多糖F -D和菌丝体多糖M -D ,得率分别是 0 .5 9%、0 .31% ;F -D的糖、蛋白质含量为 6 4 .8%、15 .6 % ,M -D糖、蛋白质含量是 6 5 .9%、7.37% ;气相色谱分析单糖组成 ,F -D由岩藻糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖组成 ,各单糖的摩尔比为 0 .9:0 .5 :1.3:5 .0 :2 .9:10 0 .0 ;M -D由鼠李糖、岩藻糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖组成 ,各单糖的摩尔比为 5 .9:8.5 :3.2 :2 3.2 :6 .5 :11.7:10 0 .0 ;红外光谱图显示F -D和M -D约在 890cm- 1处有吸收 ,1H -NMR谱显示两者在 5mg/L以上均无吸收 ,13C -NMR谱显示两者在 10 5× 10 - 6 、86× 10 - 6 、和 71× 10 - 6 处均有吸收 ,提示F -D和M -D多糖中均存在 β(1→ 3)和 (1→ 6 )糖苷键。

不同灵芝菌株菌丝体乙醇提取物体外抑瘤活性的比较和机理

以人急性早幼粒白血病细胞HL-60细胞株作为模型,用MTT法测定生长抑制率,流式细胞Annexin Ⅴ实验和DNA含量法研究抑瘤机制,比较了8个灵芝Ganoderma lucidum菌株发酵菌丝体乙醇提取物的体外抗肿瘤活性和抑瘤机制。筛选结果得到了能产生高抑瘤活性乙醇提取物的灵芝菌株L5。其对HL-60细胞的抑制率为91.4±0.9%(72小时,125μg/mL); 作用48小时后,13.3%的细胞发生早期凋亡,G0/G1期细胞比例比对照组增加15.9%,而S期细胞比例则下降了8.4%,G2/M期细胞数减少7.6%。本研究证明了灵芝菌丝体乙醇提取物能有效抑制HL-60肿瘤细胞的体外生长,抑制率与菌株相关,其抑瘤机制与细胞G0/G1期阻滞和诱导凋亡有关。

不同云芝菌株及提取工艺所得结合蛋白多糖的分析比较

分别用酚 -硫酸法、L owry- Folin法和高效液相凝胶渗透色谱法 (HPGPC)测定云芝菌丝体提取物云芝糖肽 (1)中糖和蛋白质的含量及分子量。来自 8株菌株的提取物其多糖含量为 41.1%～ 47.4% (P>0 .0 5 ) ;蛋白质含量为2 3.1%～ 36 .6 % (P<0 .0 5 ) ,分子量为 34k D～ 6 8k D。云芝菌丝体经碱提得到的提取物 1- K,多糖含量和分子量分别为 11.0 %和 14k D,均低于其进一步的醇沉物 1- KA(35 .8%和 38k D) ,但两者蛋白质含量为 36 .4%和 38.5 % ,无显著差异。菌丝体水提物 1- U A经纯化后得 1- U C,其多糖含量和分子量分别上升到 71.4%和 5 3k D。

两种纳豆激酶活性测定方法对比及相关性分析

从线性和精密度两个方面对纤维蛋白平板法和四肽底物法测定纳豆激酶活性的两种方法进行了比较研究,并验证了两种方法测定值之间的直线相关性。结果表明:纤维蛋白平板法和四肽底物法分别在10.77IU/mL～80.73IU/mL和0.03U/mL～0.09U/mL浓度范围内呈线性,且日间和日内变异系数均小于10%。两者结果具有直线相关性,其关系为纤维蛋白平板法测定值(IU)=264.87×四肽底物法测定值(U)-19.633,(R2=0.9942)。结论:纤维蛋白平板法与四肽底物法均能用于纳豆激酶活性测定,前者测定结果直接,但四肽底物法更灵敏,还可应用于高通量筛选。

山楂核中熊果酸含量的HPLC测定

采用C 18反相高效液相色谱RP HPLC法对山楂核中的熊果酸作含量测定。结果 :测得山楂核中的熊果酸含量为 0 5 77mg/g ,回收率为 10 3 13 % ,保留时间和峰面积的变异系数分别为 0 18%和 1 68% (n =8)。山楂核甲醇萃取液在作HPLC分析前 ,先用硅胶柱吸附 ,再用洗脱液 (环己烷 :乙酸乙酯 :冰醋酸 =12∶4∶1)洗脱 ,可去除大部分杂质 ,提高测定效果。

鲎G因子实验法定量测定药用、食用蘑菇多糖中的(1,3)-β-葡聚糖含量(英文)

(1,3)--葡聚糖是蘑菇免疫调节和抗肿瘤多糖的核心结构。通过鲎的G因子法测定了从19种药用和食用蘑菇中提取的27个多糖样品中(1,3)--葡聚糖的含量,我们发现(1,3)--葡聚糖普遍存在于这些蘑菇多糖提取物中。但是,(1,3)--葡聚糖的含量随蘑菇的种类和多糖提取的部位不同有着很大的差异,平均值大约占多糖的34.8%。从香菇、裂褶菌、云芝、草菇、灰树花、鸡腿菇和姬菇中提取的9种多糖中(1,3)--葡聚糖含量远高于其余的多糖。适当的纯化可以提高蘑菇多糖中(1,3)--葡聚糖的含量。我们的研究表明鲎G因子法可以用来快速有效地测定蘑菇多糖提取物中的(1,3)--葡聚糖含量。

中国被毛孢菌丝体核苷化合物的HPLC分析

用HPLC法测定中国被毛孢菌丝体中的5种核苷的含量。采用Hypersil GOLD AQ色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,甲醇：0.01 mol/L：KH2PO4=5∶95（体积比）为流动相,流速1 mL/min,检测波长260 nm。结果发现,液体发酵和静置培养的中国被毛孢菌丝体中胞苷含量分别为266.73μg/g和348.79μg/g,尿苷分别为1 718.23μg/g和1 558.99μg/g,肌苷分别为892.64μg/g和573.31μg/g,鸟苷分别为1 370.78μg/g和1 444.30μg/g,腺苷分别为1 296.68μg/g和1 440.83μg/g。5种核苷测定的精密度RSD值介于0.97%~3.75%间、稳定性RSD值范围为2.91%~3.86%、重现性RSD值范围为1.28%~2.91%、回收率范围为91.07%~102.21%。

新发现的几种蘑菇药用成分及其药理活性

猴头作为胃和十二指肠溃疡药品原料,近年日本学者Kawagishi,H.等分别于1990年,1992年发现3种新脂肪酸（C18H32,C19H22O5,C27H31NO4）、2种猴菇毗哺酮（Erinapy-rones A.B）及1种异二氢茚酮（Isoindono）能强烈抑制宫颈癌细胞并分获多项发明专利（JP91-157367,91-157379等）,但最令人振奋的是;人们已从猴菇子实体中发现了多种能促进神经生长因子（NGF）合成的活性成分Hericenones C.D.E.F.G.H和 Erinacine A.B.C.前者的化学成分分屑酚类,后者为二萜类.巴西蘑菇（Agarixcus blazei）是近代才驯化栽培成功的食、药兼优蘑菇.巴西蘑菇中含有的杂葡聚糖、蛋白多糖、甾醇、凝集素、蛋白质、亚油酸等成分,具有抑制S-180肉瘤、艾氏腹水癌和Hela细胞的增殖以及降血压、降血糖和抗变态反应等多种生理活性（其中以抗癌组分最引人注目）.从巴西蘑菇子实体、菌丝体及其发酵滤液中均能提取到类似的不同抗瘤成分,其子实体多糖（AB-P）为蛋白葡聚糖,糖和蛋白质比例为34:30;其菌丝体抗瘤成分为葡甘聚糖和蛋白质的复合物（ATOM）,分子量为10～106da,比旋度:+57°,含蛋白质5％.多糖组分以甘露糖和葡聚糖为主,另含少量半乳糖和核糖.从发酵滤液中获得的抗瘤成分为蛋白甘露聚糖（ABF）,分子量为105—107da,比旋度:+63°.

纳豆激酶的发酵和纯化方法

对纳豆激酶在菌种选育、发酵条件及分离纯化工艺方面的研究进展作了综述,介绍了提高纳豆激酶产量的多种固、液体发酵条件和菌种选育结果,并归纳了膨胀床吸附、金属螯合双水相亲和纳豆分配、反胶束萃取、磁性微球分离等分离技术在纳豆激酶分离纯化中的应用。

灵芝属真菌发酵菌丝体提取物多糖和蛋白质含量的比较分析

许多高等真菌如香菇、云芝、灰树花、茯苓等因能产生具有免疫调节活性的多糖或多糖-蛋白质复合物而成为医药及保健品工业中的重要生产菌种.灵芝也是其中一种重要的经济真菌.现代研究表明,灵芝所产生的多糖能增强小鼠的细胞免疫与体液免疫功能、拮抗免疫抑制剂和抗肿瘤药物引起的免疫抑制,并具有清除氧自由基、降血糖等多方面的药理活性.目前,对灵芝多糖的研究是真菌多糖研究中的一个热点.……

灵芝属真菌乙醇提取物抗肿瘤活性的筛选

灵芝是属于担子菌纲多孔菌科灵芝属的一类菌物,种类繁多.据赵继鼎1992年报道,仅在中国发现的灵芝亚科菌物就有88种之多.……