从B细胞淋巴瘤-2抑制剂开发看国内外药企专利布局的异同

B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)在多种血液系统恶性肿瘤中呈不同程度的高表达,其具有明显抑制细胞凋亡的作用。目前,许多公司都在开发Bcl-2抑制剂以用于血液系统恶性肿瘤治疗,其中艾伯维公司的维奈克拉(venetoclax)已在多个国家或地区获准上市,亚盛医药的APG-2575和百济神州的BGB-11417则分别处于临床Ⅱ期和Ⅰ/Ⅱ期研究阶段。本文从专利申请的内容及途径、核心化合物专利申请的保护范围、联合用药3个角度,分析上述3家药企在Bcl-2抑制剂专利布局上的异同,希望对其他药企的药物和技术研发活动有所启迪。

液相色谱-质谱联用法考察多西他赛脂质体犬体内药动学

目的:研究多西他赛脂质体Beagle犬体内药动学。方法:采用单剂量双周期自身交叉设计, Beagle犬前肢皮下头静脉分别滴注多西他赛脂质体和多西他赛注射液(参比制剂),建立液相色谱-质谱联用(LC-MS)法测定不同时间血浆中多西他赛浓度。结果:多西他赛在0．5～2 000μg·L^(-1)范围内线性关系良好(r＞0．99),提取回收率大于90%,日内、日间精密度RSD＜15%。多西他赛脂质体和多西他赛注射液,CL分别为(11±s 6)和(25±6)L·h^(-1),AUC_(0～∞)分别为(2630±1115)和(1148±310)μg L^(-1)·h,MRT分别为(4．1±2．0)和(2．7±1．3)h,且2种制剂的CL、AUC_(0～∞)和MRT均具有显著或非常显著差异。结论:本方法灵敏度高,准确、可靠。与多西他赛注射液相比,多西他赛脂质体具有一定的缓释和长循环特征。

长春氟宁抗肿瘤作用的研究

目的检测长春氟宁对微管聚集的作用,并研究长春氟宁体外和体内的抗肿瘤作用。方法用浊度实验检测长春氟宁对微管聚集的抑制作用,并以多株肿瘤细胞和荷瘤小鼠分别研究长春氟宁体外、体内的抗肿瘤作用。结果长春氟宁抑制猪脑中提取的微管的聚集,IC50为2.0μmol·L-1;体外试验,长春氟宁抑制多株瘤细胞的IC50在0.05～2.2μmol·L-1之间;体内试验,长春氟宁剂量依赖性地抑制小鼠不同类型移植肿瘤的生长。长春氟宁体外和体内的药物作用比阳性对照药物长春瑞宾弱,但从最大药物疗效来看,长春氟宁对体内肿瘤生长的抑制率比长春瑞宾大。结论长春氟宁能够抑制微管的聚集,在体外体内均有明显的抗肿瘤作用。

抗体偶联药物质量控制和临床前评价专家共识

抗体偶联药物,即ADC（Antibody-Drug conjugate）,是通过连接子（linker）将具有生物活性的小分子药物偶联至单克隆抗体（单抗）上而产生的。目前,绝大部分ADC是由靶向肿瘤抗原的抗体通过连接子与高效细胞毒性的小分子化学药物偶联而成。

恩曲他滨的合成

水合乙醛酸和l-醇经酯化得到的二羟基乙酸l-基酯,依次与2,5-二噻烷-1,4-二醇、氯化亚砜和硅烷保护的5-氟胞嘧啶反应,最后还原得到HIV逆转录酶抑制剂恩曲他滨,总收率27%。

全新长春氟宁衍生物体内外药效筛选

目的:对29个全新长春氟宁衍生物进行体内、外药效筛选,以期发现具有开发前景的抗肿瘤化合物。方法:体外筛选采用SRB法,移植人非小细胞肺癌A549裸小鼠模型作为体内药效模型。结果:通过体外IC50结果,结合化学结构,挑选出2个较有优势化合物:SHR115706和SHR115766,IC50分别为0.05和0.29μmol.L-1。SHR115706能够剂量依赖性的抑制裸鼠移植肿瘤的生长,抗癌疗效与长春氟宁相当;SHR115766亦可抑制肿瘤的生长,但剂量依赖性不明显。SHR115706(80 mg.kg-1),SHR115766(80 mg.kg-1)和长春氟宁(35 mg.kg-1,作为阳性对照)组肿瘤增殖速率分别为47.5%,57.6%和46.5%。SHR115706和SHR115766对裸鼠表现的毒性均明显低于长春氟宁。结论:SHR115706有望成为抗肿瘤新药。

丙酸氟替卡松鼻喷雾剂的研制及喷雾特性

采用高压均质工艺对丙酸氟替卡松原料进行微粒化,应用Box-Behnken效应面设计对微粒化工艺中均质压力、循环次数、混悬液药物浓度等3项参数进行了优化,得到的优化微粒化工艺为均质压力50MPa、循环6次、混悬液药物浓度10%。在此基础上制备的丙酸氟替卡松鼻喷雾剂雾滴粒径分布及喷射模式均符合美国药典的要求,具有良好的喷雾特性。

酪氨酸激酶抑制药SHR115723的药效学及药动学

目的对SHR115723进行初步体外和体内药效学、药动学研究,并与舒尼替尼进行比较,以了解SHR115723新药开发的潜力。方法用磺酰罗丹明B蛋白染色法检测药物对人脐静脉内皮细胞体外生长的抑制作用,用裸小鼠异体移植入结肠癌HT-29模型检测药物体内的抗肿瘤作用,应用高效液相色谱-紫外检测法进行大鼠体内的药动学研究。结果SHR115723和舒尼替尼对人脐静脉内皮细胞增殖的IC_(50)分别为(1.3±s 0.3)和(0.78±0.23)μmol·L^(-1)。SHR115723和舒尼替尼对裸小鼠异体移植人结肠癌HT-29生长具有明显的抑制作用。SHR115723的AUC和c_(max)高于舒尼替尼,但V_d较小。结论SHR115723具有明显的抗肿瘤作用,具有一定的新药开发潜力。

微柱离心法测定克拉霉素离子对脂质体注射液的包封率

目的考察微柱离心法测定克拉霉素离子对脂质体包封率的可行性。方法选用葡聚糖凝胶G-50(Sephadex G-50)微柱离心法将克拉霉素脂质体和外水相中游离克拉霉素分离,测定脂质体中克拉霉素的含量,计算克拉霉素离子对脂质体的包封率。结果克拉霉素含量测定的线性范围为50~600 mg·LP^(-1)P,空白脂质体在葡聚糖凝胶G-50中无吸附作用,游离克拉霉素能够实现与克拉霉素脂质体的分离,3批样品的平均包封率为94.2%。结论微柱离心法可作为克拉霉素离子对脂质体注射液包封率测定的有效测定方法。

盐酸左布比卡因原位凝胶注射剂的制备及其在动物体内的药代动力学和药效学

采用磷脂为基质的新型原位凝胶作为盐酸左布比卡因缓释注射剂的载体。通过筛选磷脂类型、磷脂/乙醇比例、水分比例确定稳定载药的处方。制备的处方进行了初步表征,符合原位凝胶的特点。进行了比格犬药代动力学考察,上述处方的tmax滞后,t1/2延长,缓释特征明显。在豚鼠中进行了药效学评价,上述处方局部麻醉效果显著,相对于市售注射液,可维持长达48~72 h的局麻效果。该新型原位凝胶具备良好的开发潜力。

帕妥珠单抗在食蟹猴体内的药代动力学检测方法

目的：建立一种灵敏度高、特异性好且快速的ELISA方法,用以检测食蟹猴体内的帕妥珠单抗含量。方法：采用双抗夹心的ELISA方法对帕妥珠单抗进行定量。以Erb B2单抗作为一抗,将其包被至96孔板上,加入待检样品,之后加入稀释好的二抗（猴血清吸附的羊抗人IgG-HRP）,令结合到一抗上的帕妥珠单抗与其特异性结合,再加入底物进行显色,在酶标仪上用双波长读取D450/560nm值。结果：建立了室温稳定性、冻融稳定性、稀释效应稳定性良好的检测帕妥珠单抗的ELISA方法并得到确证,其定量下限为0.78 nm/m L,线性范围为0.78～50 nm/m L,板间及板内的准确度、精密度均在±15%之内。结论：该ELISA方法学的确证表明用该方法测定帕妥珠单抗浓度具有特异性好、灵敏度高、速度快的特点,能够满足新生物制药临床前药代动力学的指导要求,可应用于帕妥珠单抗的检测。

精氨酸加压素V2受体拮抗剂托伐普坦的合成进展

心力衰竭是一种常见的综合征,虽然它的发病机制和治疗研究迅速发展,但是发病率和死亡率都很高。精氨酸加压素是导致心力衰竭死亡率居高的原因之一。托伐普坦是2009年美国上市世界上首个口服精氨酸加压素V2受体拮抗剂。本文综述了托伐普坦的合成方法及部分中间体的合成,并评价其优缺点。

林蛙皮多肽对大鼠皮肤激光损伤的修复作用

拟检测林蛙皮多肽对大鼠皮肤激光损伤的修复作用及初步探索其作用途径。用激光照射大鼠背部皮肤,采用不同浓度林蛙皮多肽处理创面,观察其形态学变化,统计创面愈合率;检测Flg(参与表皮屏障功能建立的重要蛋白质之一)和Krt-14 mRNA(参与形成上皮细胞的细胞骨架)的差异。结果表明:第3、6天,低浓度(10 mg/m L)林蛙皮多肽作用组大鼠激光损伤皮肤愈合率显著高于阴性对照组(P<0.05),第6天,低浓度林蛙多肽作用组大鼠创伤皮肤中Flg的表达量是阴性对照组的1.908倍(P<0.000 1),Krt-14的表达量是阴性对照组的1.453倍(P<0.000 1)。这表明10 mg/m L林蛙皮多肽对大鼠激光损伤皮肤有修复作用,可能是通过促进损伤细胞中Flg和Krt-14 mRNA表达量的增加而发挥修复作用的。

黏度和触发参数对混悬型鼻喷雾剂雾滴粒度分布的影响

目的了解鼻喷雾剂的物理性质,黏度和触发参数对混悬型鼻喷雾剂雾滴粒度分布的影响。方法本实验应用Spraytec誖激光衍射喷雾粒径测定仪测定鼻喷雾剂的喷雾粒径分布。采用Box-Behnken设计考察了黏度、触发力和触发距离对雾滴粒径分布的影响,考察指标包括Dv10、Dv50和Dv90。结果黏度是影响雾滴粒径的最显著因素,随着黏度的增大,雾滴粒径显著增大。触发力和触发距离对喷雾粒径的影响较小,随着触发力、触发距离的增大,喷雾雾滴粒径先减小后增大。结论雾滴粒径分布与黏度、触发力和触发距离确实有一定关系。

冬凌草甲素亚微乳的制备及其特性表征

目的:制备冬凌草甲素亚微乳,并对其理化性质进行表征。方法:采用高压均质法制备冬凌草甲素亚微乳,并对其粒径、Zeta电位、黏度等性质进行表征。结果:冬凌草甲素亚微乳为白色不透明乳状液体,载药量1g·L-1,平均粒径(138.87±0.60)nm,Zeta电位(47.27±2.31)mV,pH(6.02±0.03),黏度(1.78±0.015)MPa.s。结论:本实验所制得的冬凌草甲素亚微乳理化性质较稳定,工艺简单,可为冬凌草甲素亚微乳制剂的制备提供研究依据。

复乳法制备左布比卡因多囊泡脂质体及其体外特性表征

目的复乳法制备左布比卡因多囊泡脂质体,并对其体外特性进行表征。方法采用复乳法制备左布比卡因多囊泡脂质体,以包封率和粒径为评价指标,对处方及工艺进行单因素考察,并对其在pH7.4的磷酸盐缓冲液(PBS)和人血浆中的体外释放进行表征。结果确定处方工艺为氢化磷脂20g·L-1,胆固醇30g·L-1,二棕榈酰磷脂酰甘油10g·L-1,三油酸甘油酯8g·L-1,外水相葡萄糖浓度为5%,有机溶剂为氯仿-乙醚(1∶1,V/V),乳化时间为6min,氮气流速6L.min-1制备脂质体,左布比卡因多囊泡脂质体呈典型的非同心囊泡结构,平均粒径22.38μm,在PBS中释放较慢,人血浆中释放较快,72h的累积释放量均可达到80%以上。结论左布比卡因多囊泡脂质体具有较为明显的体外缓释效果。

临床研究使用一体化信息技术的探讨

信息技术在临床研究中的应用已经给药物研发过程带来了革命性的变化。本文通过分析药物临床试验质量管理规范(GCP)对临床研究中的数据、流程以及文档的要求,并在对我国临床研究的信息化技术将进入高速发展期的充分认识的基础上,提出了我国临床研究实施一体化信息技术的战略思路,并结合我国的实际予以探讨。

2015年美国FDA批准上市新药情况简析

2015年美国FDA共批准了45种新药,其中新分子实体33种,新生物制品12种,批准数量创造了近10年来的新高。除新药数量多外,获批新药包含了16个首创新药,创新性较强;覆盖了15个不同的治疗领域,多样性较高。2015年也是孤儿药大获丰收的一年,共有21种新药被批准用于治疗罕见性疾病。同时,60%的新药(共27种)受益于FDA的非标准审评程序,大大加速了创新药物服务社会的进程。总体而言,2015年美国FDA批准的新药在研发的有效性、技术的创新性、监管的高效性和治疗的普惠性上都取得了较大的进展。

2016年美国FDA批准上市新药情况简析

2016年美国FDA共批准了22种新药,其中新分子实体15种,新生物制品7种,新药批准数量较前两年有明显下降。但本年度的获批新药包含了8个首创新药,占比较大;同时,获批药物中包括首个小分子蛋白-蛋白相互作用抑制剂、首个PD-L1抗体和首个针对全部6个主要基因亚型的抗丙肝药物等多个重磅新药,共同凸显了获批药物较强的创新性。同时,2016年超过70%的新药(共16种)受益于FDA的非标准审评程序,大大加速了创新药物服务社会的进程。总体而言,2016年美国FDA批准的新药在数量上有所下降,但质量上仍然保持优势,更突出了创新在新药研发中的核心地位。

中国新药研发模式转变的探讨

在对目前中国新药创新现状的认识的基础上,对中国新药研发模式的转变进行探讨。提出中国新药研发模式逐步从仿制(Me-too)/仿创(Me-better)到首创(First in class)转变的必然性,以及企业在进行新药研发模式转变的过程中,面临的包括选题和管理决策的科学性的挑战及解决方案。