液质联用定量血清中维生素D、A、E的方法

目的本文旨在建立并验证一种准确、方便、快速同时定量人血清中四种脂溶性维生素25-羟基维生素D2(25OHVD2)、25-羟基维生素D3(25OHVD3)、维生素A、维生素E的液质联用方法,以满足临床研究、临床诊断对其检测的需求。方法 100μL血清样品经液-液萃取纯化,4种分析物经反相色谱分离、质谱MRM扫描模式下检测。采用自配并经验证的替代基质,对内源性分析物进行准确的标准曲线定量。分离定量在5min的时间里完成。结果提出并成功验证了代替基质法为基础的LC-MS/MS 4种内源性维生素的定量方法。代替基质容易配制,性能优越,定量方便。方法的检测线性范围分别为25OHVD2:0.5～50.0ng/mL,25OHVD3:2～200ng/mL,维生素A:100～10 000ng/mL,维生素E:300～30 000ng/mL。四种分析物的日内及日间精密度和准确度偏差均在±20%以内。血清样品室温、冻融及1个月长期稳定性均满足评判标准。结论实验结果说明此方法具有准确、可靠,稳定、耐用性及快速等优点,适用于临床样本的分析。