2型糖尿病患者胰腺脂肪沉积的影响因素及其与胰岛功能的相关性分析

目的分析2型糖尿病(T2DM)患者胰腺脂肪沉积的影响因素及其与胰岛功能的相关性。方法2015年10月-2016年12月对浦东新区泥城镇某社区548名居民进行糖尿病患病情况调查,其中T2DM患者301例,正常糖代谢(NGT)者247名。记录受试者一般资料,测定血液生化、胰岛素指标,应用双能X线吸收法测定人体成分,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)等。采用超声检测脂肪肝和胰腺脂肪沉积情况,以有无胰腺脂肪沉积将T2DM组及NGT组分别再分为两个亚组,比较各组一般资料、生化指标和体脂指标之间的差异。采用多因素logistic回归分析胰腺脂肪沉积的影响因素。结果NGT组中,有胰腺脂肪沉积亚组的年龄、腰围、腰臀比(WHR)、体重指数(BMI),空腹胰岛素(FINS)、餐后2 h胰岛素(2h INS)、三酰甘油(TG)、血尿酸(UA)、谷丙转氨酶(ALT)水平,以及脂肪肝患病率、腹部脂肪百分比、腹臀比均高于无胰腺脂肪沉积亚组,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平和四肢脂肪百分比均低于无胰腺脂肪沉积亚组(P<0.05或P<0.01);T2DM组中,有胰腺脂肪沉积亚组的腰围、BMI,FINS、2h INS、TG、UA、ALT、谷草转氨酶(AST)水平,以及脂肪肝患病率、腹部脂肪百分比均高于无胰腺脂肪沉积亚组(P<0.05)。NGT组与T2DM组有胰腺脂肪沉积亚组的HOMA-IR、HOMA-β和IR发生率均明显高于无胰腺脂肪沉积亚组(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,HDL-C、HOMA-β、腹部脂肪百分比、年龄和脂肪肝是NGT人群胰腺脂肪沉积的影响因素(P<0.05);脂肪肝和HOMA-IR是T2DM人群胰腺脂肪沉积的影响因素(P<0.001)。结论高龄、腹型肥胖合并脂肪肝人群易发生胰腺脂肪沉积,后者可影响胰岛功能,加重胰岛素抵抗程度。

血管外膜在血管成形术后再狭窄中的作用

血管成形术是治疗血管狭窄、改善患者生活质量的重要手段。然而血管成形术可能会导致内膜过度增生,血管成形术再狭窄已成为临床严重问题。血管外膜由多种类型细胞组成,与血管成形术后再狭窄密切相关。血管损伤后激活的外膜成纤维细胞(AF)可转化为肌成纤维细胞(MF)并向内膜迁移,同时促进产生各种细胞因子和炎性分子,而AF衍生的活性氧(ROS)引起的氧化应激也会参与血管炎症,这一炎性反应加剧了血管再狭窄。炎性微环境下,祖细胞分化加剧,脂肪细胞功能失调,引起细胞增殖。本文首次综述了几种外膜细胞如AF、炎性细胞、祖细胞和脂肪细胞在血管成形术后血管重构和内膜增殖中的关键作用。

条斑紫菜藻胆蛋白提纯方法优化探索

采用溶胀法与组织捣碎法相结合的紫菜叶状体细胞破碎方法,研究了不同物液比、缓冲液浸泡时间和硫酸氨盐析次数对藻胆蛋白纯度和产率的影响,对比了各种羟基磷灰石的层析效果,并对所得藻红蛋白和藻蓝蛋白做了吸收光谱、荧光发射光谱和SDS-PAGE鉴定。结果表明,在物液比为1∶5,浸泡时间为36h时,紫菜综合破碎效果最佳;经过4次硫酸氨盐析后,藻红蛋白和藻蓝蛋白的纯度最高,分别达到1.71和0.98,采用Siegelman的方法制备的羟基磷灰石一次层析所得藻红蛋白和藻蓝蛋白的纯度最高,分别达到4.73和4.42,产率分别为0.144%和0.042%,且光谱和电泳鉴定结果均达到商品化要求。

斑马鱼下颌损伤后的再生组织的超微结构观察及神经递质分析

斑马鱼(Danio rerio)具有很强的再生能力是生物再生研究的良好模型,尤其是下颌组织和尾鳍有复杂的组织学结构。本文结合形态观察检测递质类化合物的动态变化。斑马鱼下颌组织被切除掉约1/3后,2小时创面细胞收缩,神经递质类化合物的释放增加。在修复的第2天创面形成较完整的表皮组织,递质类物质如多巴胺(DA)、γ-氨基丁酸(GABA)谷氨酸(Glu)以及甘氨酸(Gly)等的含量达到峰值。到5天的时候下颌被剪除部位外部形态已经大部分恢复,且递质类化合物的含量呈现高位维持或缓慢下降。结果提示神经递质在斑马鱼下颌再生过程中发挥重要作用。

胰高血糖素样肽1受体基因rs3765467变异与2型糖尿病的关联研究

目的·探讨胰高血糖素样肽1受体(glucagon-like peptide-1 receptor,GLP-1R)外显子单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)与2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)的关系。方法·选取318例T2DM患者和145例非糖尿病对照者为研究对象(汉族),利用多重PCR靶向重测序Hi-Reseq技术检测GLP-1R基因外显子的SNPs位点,分析组间基因型、等位基因频率分布及临床特征的差异。结果·检测分析发现了23个SNPs位点,其中GLP-1R rs3765467(G/A)位点多态性与T2DM显著相关(P=0.005),与GG基因型携带者相比GA+AA基因型者患病风险降低(OR=0.502,95%CI 0.305~0.829,P=0.007),其中男性人群GA+AA基因型者患病风险显著降低(OR=0.403,95%CI 0.186~0.871,P=0.021)。临床特征关联分析表明,GA+AA基因型携带者糖化白蛋白水平低于GG基因型者(P=0.048)。结论·GLP-1R基因rs3765467位点多态性与上海地区汉族人群T2DM相关;次要等位基因A可能有助于维持血糖稳态,是T2DM的保护因素,这种保护性在男性中尤为显著。

斑马鱼组织石蜡切片质量的优化

斑马鱼作为模式生物已经广泛运用于生物学各个研究领域。传统方法制作的斑马鱼组织石蜡切片经常出现收缩、脆裂,主要原因是脱水和透明作用时间过长。为提高切片质量,本实验室摸索出了一套改善石蜡切片质量的方法:以组织透明作为标志,摸索最短的脱水与透明时间,并适时采用脱水能力弱的脱水剂,提高了切片的质量,缩短了试验时间。我们以斑马鱼的心脏、肠、脾脏为材料进行石蜡切片,结果表明,改进后的组织结构完整清晰,基本无脆裂现象。本优化技术适合于小型动物的石蜡切片制作。

西伯利亚幼鲟对偶极子电场的避让行为研究

研究利用人工偶极子电场来模拟生物电场刺激,对西伯利亚幼鲟的电感受能力进行了行为探究。结果显示西伯利亚幼鲟对本实验中的偶极子电场产生躲避行为,其平均感受阈值在2月龄为(457.5±32.5)μV/cm,3月龄为(29.5±2.5)μV/cm,7月龄为(10±1.0)μV/cm。这表明西伯利亚鲟鱼的电感受敏感性随个体的发育而增强,而这可能与电感受器官数量的增加有关(2月龄为2234±470,7月龄为5273±523)。

两个Sox9基因在斑马鱼胚胎发育和成体性腺中的动态表达特征

通过整体原位杂交和切片原位杂交技术系统全面地比较分析了斑马鱼胚胎四个发育时期(12、24、48 hpf和4 dpf)和成熟性腺中Sox9a和Sox9b基因的表达模式。结果显示,两个Sox9基因在脑和眼中持续表达,但在耳囊、头部软骨、胸鳍芽和体节中差异性表达。Sox9a特异性地在侧线、尾部神经嵴、原肾管和精巢支持细胞中表达,而Sox9b在卵巢的卵黄颗粒中大量表达。与已发表的研究结果相比,本研究更广泛地揭示了Sox9a和Sox9b的动态差异表达模式,且更清楚地显示了其在性腺中的表达特征。

在斑马鱼仔鱼脑部异体移植胚胎细胞的尝试

为建立斑马鱼(Danio rerio)脑部细胞移植模型,先用红色荧光染料标记供体胚胎细胞,再移植细胞到AB品系和两种转基因斑马鱼仔鱼脑部。荧光显微镜和组织学切片观察发现移植细胞沿组织或细胞间隙而不是通过血管向周围组织扩散,但细胞增殖分化不明显。在细胞移植24 h后,脑部组织学结构与对照组无明显差别。带有白血病基因的胚胎细胞在AB仔鱼的脑部没有产生肿瘤样增生和转移。相比之下,正常胚胎细胞在白血病模型的仔鱼脑部非白血病细胞聚集区出现较多增殖和迁移。这些结果提示脑局部微环境不支持移植细胞的增殖分化;细胞移植只能弥补局部细胞的空疏而不能用作细胞替代治疗。

四种氨基酸神经递质对斑马鱼胚胎发育和成体组织再生的双重影响

筛选小分子化合物促进组织再生仍然是再生医学的一个巨大挑战。前期研究提示神经递质在斑马鱼(Danio rerio)下颌再生过程中发挥着重要作用。本实验分别剪切Flk-GFP转基因斑马鱼成体下颌组织和1月龄幼鱼尾鳍,然后将其置入四种神经递质(牛磺酸、谷氨酸、甘氨酸以及γ-氨基丁酸)的浓度梯度环境中,培养5d后取成鱼下颌制作冰冻切片进行观察检测新生血管荧光量,对幼鱼尾鳍再生进行长度测量。结果显示甘氨酸和γ-氨基丁酸对损伤组织的再生表现出促进作用,而牛磺酸和谷氨酸表现出在低浓度时促进与高浓度的抑制作用。胚胎培养和早期胚胎细胞增生的MTT试验进一步验证了氨基酸神经递质在不同浓度所表现出的细胞营养和毒性作用。结果提示有必要建立一个多层面包括从细胞-胚胎-幼鱼和成鱼的斑马鱼检测系统,能有效筛选再生相关小分子化合物及其合适浓度。

上海沙田湖养殖区及周边水体中氟喹诺酮类抗性基因的分布特征及其与环境因子关系

集约化水产养殖区常被认为是水体抗生素和抗性基因的主要潜在来源,然而对其该类水体中抗生素和抗性基因污染情况的研究仍相对匮乏.本文以上海市沙田湖养殖区及周边水体为调查对象,利用宏基因组学高通量测序技术,于2020年9月对水体中的氟喹诺酮类抗生素(fluoroquinolones,FQs)和氟喹诺酮类抗性基因(fluoroquinolones antibiotic resistance genes,FQs-ARGs)的种类和丰度进行了调查,并利用多元统计分析方法研究了水体理化因子和FQs对FQs-ARGs的影响.结果表明,沙田湖养殖区及周边水体共检测出5类耐药机制、共46种FQs-ARGs,其中各水体共有基因为44种.抗性基因mfd和patA在养殖水体和周边水体中均为优势抗性基因,抗生素抗性基因变异或突变为优势耐药机制.养殖水体和周边河湖水体、不同养殖品种水体之间FQs-ARGs的平均丰度无显著差异(P>0.05).偏冗余分析(pRDA)表明,除了诺氟沙星和环丙沙星2种抗生素外,水体电导率(Spc)、总磷(TP)、总氮(TN)、氨氮(NH_(4)^(+)-N)、溶解氧(DO)、pH和叶绿素a(Chl-a)等环境因子是影响水体中FQs-ARGs组成与分布的关键性因子,且非抗生素因子的总贡献率远高于抗生素.

利拉鲁肽通过干扰素基因刺激因子途径改善代谢相关脂肪性肝病炎症反应及机制的研究

目的探讨利拉鲁肽通过干扰素基因刺激因子(STING)信号通路改善代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)炎症反应及机制。方法20只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常对照(NC)组、利拉鲁肽干预普食组(NC+Lir组)、高脂饮食(HFD)组、利拉鲁肽干预高脂饮食组(HFD+Lir组),每组各5只。小鼠原代肝细胞(MPHs)分为正常对照(Con组)、利拉鲁肽干预对照组(Con+Lir组)、棕榈酸(PA)诱导组(PA组)、利拉鲁肽干预棕榈酸组(PA+Lir组)。检测各组小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及肝脏中TG,HE、油红O染色观察肝脏的病理变化并计算MAFLD活动度评分(NAS),qRT-PCR检测各组小鼠和细胞中STING、IL-1β、TNF-αmRNA表达,Western blot法检测各组小鼠和细胞中STING、磷酸化干扰素调节因子3(p-IRF3)、干扰素β(IFN-β)蛋白表达。结果HFD组体重、肝脏重量、ALT、AST、肝脏TG、脂肪变性、小叶炎症和气球样变NAS高于NC组(P<0.05或P<0.01)。HFD+Lir组体重、肝脏重量、ALT、AST、肝脏TG、脂肪变性、小叶炎症和气球样变NAS低于HFD组(P<0.05或P<0.01)。HFD组肝脏中STING、IL-1β、TNF-αmRNA表达,STING、p-IRF3、IFN-β蛋白表达高于NC组(P<0.05)。HFD+Lir组STING、IL-1β、TNF-αmRNA表达,STING、p-IRF3、IFN-β蛋白表达低于HFD组(P<0.05)。PA组STING、IL-1β、TNF-αmRNA表达,STING、p-IRF3、IFN-β蛋白表达高于Con组(P<0.01)。PA+Lir组STING、IL-1β、TNF-αmRNA表达,STING、p-IRF3、IFN-β蛋白表达低于PA组(P<0.05或P<0.01)。结论利拉鲁肽通过影响STING信号通路改善MAFLD中高脂诱导的炎症反应。

鱼类的侧线机械感受系统和仿生学等应用研究

鱼类和水生两栖类(或幼体),具有特殊的侧线机械感受系统,以感受和分析周围水流微小的时空动态变异,提供鱼体即时的位向和环境水动态信息,助其判断水流属性,完成摄食、避敌、生殖、集群、导航和通讯等复杂行为.侧线机械感受的外周感觉器官主要为两类"神经丘":感受流体加速度(或压力差)和平行于体轴的流向信息,一般是位于体表侧线管道中的"管道神经丘";感受流体速度和垂直于体轴的流向信息,位于鱼体表面的"表面神经丘".两者都由感觉毛细胞和包裹的胶质顶组成.当接触流体的振动波时,胶质顶带动其内部的纤毛束发生定向摆动和偏转,打开毛细胞膜的离子通道,改变细胞的内外电位差,将流体机械信息转换成神经电信号传入.两类神经丘的大小、形状和排列方位(互成90°)不同,并由各自的神经支配.神经丘数目繁多,以特定的模式遍布鱼表,全方位地收集各部位不同瞬间的水动力变化信息,并由专一的侧线传入神经分支至中枢神经各级侧线中心,系统地综合分析.侧线感受器结构的精致程度和侧线系统在鱼体分布空间模式的复杂性,是依鱼的种类(系统进化地位)、水流生境及特殊行为等多方面需求形成.该系统已吸引了科学家近百年的研究,在物种间表观形态和生态行为多样性等,尤其是功能形态和神经电生理学方面,颇有进展.近年来,运用数学、物理、计算科学和纳米技术等多学科交叉研究,正起步开拓其仿生学应用.为进一步推动对侧线生物学和水动力机械感受器模式及其智能仿生学交叉研究领域的发展,本文以鱼类侧线研究的新发现和认识为基础,结合近年来有关侧线系统的研究文献,对侧线机械感受器的结构机理、发育模式、神经功能特性以及仿生学研究的进展与展望等方面进行综述.

中国贵州省穴居盲鳅一新种(鲤形目,爬鳅科)

记述了采集于贵州省荔波县佳荣镇水井湾溶洞(25°28'N,108°06'E)适应洞穴环境的鳅类1新种:佳荣盲高原鳅Triplophysa jiarongensis sp.nov.。新种与之前记录的7种分布于西江水系的高原鳅(阿庐高原鳅、个旧盲高原鳅、长须盲高原鳅、巨头高原鳅、邱北盲高原鳅、石林盲高原鳅和天峨高原鳅)同属典型洞穴鱼类,都具有一系列与洞穴环境有关的适应性特征。新种与本属其它种类的区别主要为:胸鳍长,后伸达腹鳍起点;尾鳍微凹形;体表色素退化,光滑裸露无鳞;背鳍截形,起点位于腹鳍起点略后方;腹鳍后伸盖过泄殖孔;臀鳍截形;尾柄上下缘存在脂状鳍褶;背鳍分支鳍条8;臀鳍分支鳍条6;胸鳍分支鳍条11;脊椎骨总数4+34;眼完全退化,外观无痕迹;鳔前室被骨质鳔囊包裹,后室发达膨大呈游离膜质鳔。此外还介绍了其栖息地概况和部分生态学信息。

14-3-3蛋白在代谢综合征中的研究进展

14-3-3蛋白是一种可以结合大多数磷酸化的蛋白质伴侣,在广泛的生物、组织和细胞中普遍表达。通过与一些蛋白相互作用影响细胞周期、自噬、凋亡、免疫应答等。除此之外,近年也发现其影响生物体内的糖代谢、脂代谢等,其表达水平与肥胖、胰岛素抵抗、高脂血症、非酒精性脂肪肝以及高血压等代谢综合征相关危险因素密切联系。本文综述了14-3-3蛋白的特征、功能以及在代谢综合征中的最新研究进展,以期为进一步研究14-3-3蛋白提供参考。