流动与非流动测热方式对酶催化反应放热测量的影响

采用微量热仪(Micro DSCⅢ)对鸡肝酯酶催化α-乙酸萘酯水解反应进行了流动与非流动测热方式的对比研究。研究显示,流动测热的流速对反应热测量结果有较大影响,当30μL浓度为120mmol/L的α-乙酸萘酯底物以0.22 mL/min的流速流经0.5 g固定化鸡肝酯酶时,催化反应放出的热量为0.033 J,持续放热时间为495 s;而流速为0.18 mL/min与0.35 mL/min时,测得的放热量分别为0.030 J与0.025 J,持续放热时间分别为625 s与365 s。用与流动测热相同酶活单位的鸡肝酯酶液酶进行非流动测热,所得到目的反应热的量为0.035 J,持续放热时间为800 s。与非流动方式测热相比,流动测热方式的测量灵敏度较高,检测出目的放热量所需时间较短,但不能充分检测出生化反应热总热量。