带种植体的不脱钙骨块切片组织学观察——新型骨代用材料在即刻种植中的应用实验研究

作者应用带牙种植体的不脱钙骨块切片进行组织学观察，直接观察到种植体—骨组织界面，在为人工种植牙即刻种植选择适合的骨代用材料的研究中，提供可靠的依据，得出以磷酸三钙为主的复合材料优于以羟基磷灰石为主的复合材料这一结论，证实这种实验方法可以获得脱钙切片无法获得的信息。

补肾中药对老龄成骨细胞VDR基因表达的研究

目的:观察维生素D受体(VDR)在老龄大鼠成骨细胞(OB)中的表达,研究补肾中药对老龄大鼠成骨细胞VDR表达的影响,探讨补肾中药促进骨形成的新机制。方法:16月龄大鼠成骨细胞被分离,采用组织块翻转方法培养。通过倒置显微镜观察细胞形态,矿化结节染色对成骨细胞加以鉴定。采用RT-PCR、免疫组化染色和westernblot方法分别检测成骨细胞VDRmRNA和蛋白表达。结果:RT-PCR、免疫组化和westernblot结果表明,在老龄大鼠成骨细胞中,补肾益精方、固本壮骨胶囊、金匮肾气丸可上调VDRmRNA和蛋白表达,但是知柏地黄丸对于VDRmRNA和蛋白表达的影响却存在着差异。结论:补肾益精方、固本壮骨胶囊、金匮肾气丸上调老龄成骨细胞VDRmRNA和蛋白表达,促进骨形成。

复合异种骨载体治疗肿瘤性骨缺损(附46例报告)

目的：研究应用猪骨、牛骨制成的复合骨载体，作为植入材料治疗肿瘤性骨缺损的疗效观察。方法：采用新鲜猪骨、牛骨经一系列生物化学方法制成颗粒型、块型的骨载体，与骨基质明胶联合应用，作为治疗骨肿瘤病灶刮除灭活后腔洞性骨缺损的植入材料４６例。结果：复合异种骨载体植入后４周，骨载体颗粒间隙模糊，１２周以后逐渐融合成片，６个月后融合成片的骨载体密度逐渐降低，９个月后其密度接近正常骨组织。结论：复合异种骨载体植入人体后组织相容性良好，又具有骨的天然结构和孔隙率，经检测其孔径在１５０～５５０ｕｍ之间（３９４±１８０），孔隙率为６０％，有利于人体血管长入，配以骨基质明胶联用，既能起到骨传导又能达到诱导成骨的双重作用，是治疗肿瘤性骨缺损理想的植入材料。

颈椎病患者颈椎间盘纤维环成纤维细胞成骨潜能的体外观察

目的研究纤维环成纤维细胞成骨化生在颈椎间盘退变机制中的作用,以进一步揭示颈椎病的发病机理。方法利用体外细胞培养技术,建立颈椎病患者的颈椎间盘纤维环中成纤维细胞的培养体系,观察其在细胞因子rhBMP2、TNF-α条件培养液诱导下的成骨潜能表现。结果非条件培养组和条件培养组在传代的颈椎病患者纤维环成纤维细胞培养的各时间点的细胞增殖活力(MTT)测定无明显差异(P>0.05),细胞增殖速度较慢,条件培养液对细胞增殖无明显影响。rhBMP2、rhBMP2+TNF-α条件培养组细胞趋化性生长明显,细胞呈漩涡状和复层生长,局部密度增高,可见有肉眼观呈黑色点状矿化结节出现。各条件培养组的ALP活力经测定均与空白对照组ALP活力有显著性差异(P<0.05),rhBMP2+TNF-α组的成纤维细胞所形成的骨钙素分泌量均与空白对照组有显著性差异(P<0.05),而rhBMP2组、TNF-α组则与空白对照组无显著性差异。结论颈椎间盘纤维环成纤维细胞存在成骨潜能,rhBMP-2对纤维环成纤维细胞体外有明确的诱导成骨作用,纤维环成纤维细胞的骨化在颈椎退变的病理过程中有重要作用。

转化生长因子β对退变颈椎间盘成纤维细胞的成骨诱导作用

目的探讨转化生长因子β(Transforming Growth Factorβ,TGF-β)对退变的颈椎间盘纤维环中成纤维细胞成骨诱导的作用,以进一步揭示颈椎病的发病机理。方法利用体外细胞培养技术,建立颈椎病患者的退变颈椎间盘纤维环中成纤维细胞的培养体系,观察在TGF-β条件培养液诱导下的成骨表现。结果非条件培养组和条件培养组在传代的颈椎病患者纤维环成纤维细胞培养的各时间点的细胞增殖活力(MTT)测定无明显差异(P>0.05),TGF-β条件培养组的ALP活力经测定与空白对照组ALP活力有显著性差异(P<0.05),TGF-β组的成纤维细胞所形成的骨钙素分泌量均与空白对照组有显著性差异(P<0.05)。结论TGF-β对纤维环成纤维细胞体外有明确的诱导成骨作用,退变的颈椎间盘纤维环成纤维细胞存在成骨潜能。

生长分化因子-5影响肢芽细胞分化的机制

目的研究生长分化因子-5(growthdifferentiatifoanctor-,5GDF-5)对肢芽细胞分化的影响机制及在骨形成过程中的作用机制。方法取妊娠第12d胎鼠肢芽,行肢芽细胞微团培养,以不同浓度(0ng/ml、10ng/ml、50ng/ml、100ng/ml、120ng/ml)重组鼠GDF-5,干预培养中的肢芽细胞。于细胞培养第1d、3d,用扫描电镜观察不同浓度GDF-5对肢芽细胞生长与分化的影响。于细胞培养第3d,采用免疫组织化学和实时定量PCR等方法观察GDF-5对肢芽细胞核结合转录因子(Cbfa1)与Ⅹ型胶原蛋白表达的影响。结果在细胞培养第1d,扫描电镜观察结果显示,GDF-5可使肢芽细胞连接更为紧密,高浓度GDF-5组有成熟软骨基质和软骨结节形成,低浓度组也有软骨结节形成,该效应与GDF-5浓度呈正相关。在细胞培养第3d,免疫组织化学检测结果显示,Ⅹ型胶原蛋白表达以120ng/ml浓度组最为广泛和强烈,0ng/ml浓度组表达最弱,其表达趋势接近于Cbfa1的表达,表明GDF-5有促进肢芽细胞向成熟软骨方向分化的作用。实时定量PCR结果显示,GDF-5在mRNA水平同样促进Cbfa1表达,其促进作用呈剂量依赖效应。结论GDF-5通过上调Cbfa1和Ⅹ型胶原蛋白表达的途径促进肢芽细胞向软骨分化和促进骨形成。