罗氏沼虾SSR标记再开发及其影响因素初探

在NCBI的Nucleotide数据库中检索到592条罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)基因组序列,其中含有SSR(simple sequence repeats)的序列占总数的16.39%,重复基元共有29种,以二核苷酸重复类型和三核苷酸重复类型为主,出现频率分别为14.02%和6.08%。整理G-SSRs序列并设计44对引物,以罗氏沼虾上海地方种群样本DNA为模板,对设计引物进行筛选,有32对引物的扩增产物条带比较清晰,占所设计引物总数的72.72%。用初步筛选得到的26对设计引物和已报道的37对SSR引物对罗氏沼虾江苏、广西以及上海地方种群进行引物的多态性筛选,分别得到9对和7对多态性引物。结果表明,种群的不同、序列的筛选和引物的设计直接影响到获得多态性引物的数量。

杭州湾漕泾沿岸水化学状况

报道了 2 0 0 1年 1- 12月杭州湾畔金山漕泾地区用于水产养殖的河口沿岸水化学状况 :总含盐量 (12 .2 4± 1.92 )g/L ,碱度 (2 .12± 0 .2 7)mmol/L ,pH值为 7.99± 0 .11,阴阳离子中含量最高者分别为Cl-(6 .6 4± 1.0 4)g/L与Na+ +K+ (3.76± 0 .6 0 )g/L ,属典型河口区水质特点 ,系海水水质类型 (ClNaⅢ)。常规水质指标如下 :Nt为 (1.32± 0 .44 )mg/L ,其中NH3 Nt占 19.7%,NO-3 N占 78.8%,NO-2 N占 1.6 %,活性磷PO3 -4 P含量为 (2 .0 4± 1.5 7) μg/L ,氮磷比 (N/P)为 6 47(原子比 ) ;化学需氧量 (CODMn)为 (6 .89± 1.76 )mg/L ;五日生化需氧量(BOD5)为 (2 .5 6± 0 .5 2 )mg/L ;溶解氧 (DO)为 (7.95± 0 .5 6 )mg/L。

杭州湾漕泾沿岸水化学状况

本文报道了 1999年 1月 - 5月杭州湾畔金山漕泾地区用于水产养殖的河口沿岸水化学状况 :总含盐量 (16 .0 9± 2 .17)g L ;碱度 (1.61± 0 .61)mmol L ;pH值为 8.0 0± 0 .12 ;阴阳离子中含量最高者分别为 (8.37±1.2 3)g L的Cl- 与 (5 .0 5± 0 .72 )g L的Na+ +K+ ,为典型河口区水质特点。属海水水质类型 ,即氯化水、钠组、Ⅲ型 (ClNaⅢ)。常规水质指标如下 :Nt 为 (2 .0 1± 0 .40 )mg L ,其中NH3 -Nt 占 5 2 .9% ,NO-3 -N占 46 .6 % ,NO-2 -N占 0 .5 % ;有效磷PO3 -4 -P含量为 (0 .0 2 1± 0 .0 10 )mg L ;氮磷比 (N P) =2 12 (原子比 ) ;化学需氧量 (CODMn)为(10 .5 9± 1.42 )mg L ;五日生化需氧量 (BOD5 )为 (1.5 2± 0 .67)mg L ;溶解氧 (DO)平均值为 (8.2 9± 0 .68)mg L。

水产标准化在虾类可持续健康发展中的应用

虾类养殖业作为我国水产养殖业支柱产业之一，不仅为人们提供高档蛋白水产品，还为促进渔民增收、渔业增效做出了重要贡献。2008年我国的对虾产量占据全球对虾产量的份额达43．2％，是世界上对虾养殖面积最大、产量最高的国家。但我国当前的虾类养殖主要采用高密度、高换水率的传统方法，整体养殖技术水平不高，

应用多模型方法估算池养条件下罗氏沼虾的生长参数

为了更准确地描述罗氏沼虾的生长特性,在30周的养殖周期内采集了1172尾样本,其中雌虾612尾(全长范围34.58~149.50 mm)、雄虾560尾(全长范围40.71~168.89 mm),应用多模型方法对池塘养殖条件下罗氏沼虾的个体生长参数进行估算。采用特殊von Bertalanffy,广义von Bertalanffy,Logistic,Gompertz,Brody和Richards等6种备选生长模型分别模拟罗氏沼虾雌、雄个体的生长,利用极大似然法估算以上6种模型的生长参数,应用赤池信息准则(AIC)对模型拟合度进行检验。研究结果表明,以全长值80 mm为界,罗氏沼虾雌、雄群体全长频度呈现明显的双峰型分布结构,上峰组以全长110~120 mm占优势,下峰组以全长50~60 mm占优势。罗氏沼虾雌、雄群体体质量—全长回归关系分别为BW=1.536×10^(-6)TL^( 3.398)(♀)和BW=8.032×10^(-7)TL^(3.539)(♂),雌、雄均表现为正异速生长(b>3,P<0.05)。F-检验结果表明,雌、雄群体体质量—全长回归方程差异显著(P<0.05),应分性别开展研究。多模型推断(multi-model inference,MMI)检验结果表明,没有任何一种模型的Akaike权重(ωi)大于95%,可被单独用来描述雌、雄虾全长与周龄的生长关系。因此对雌虾中获得支持的4种生长模型和雄虾中获得支持的6种模型的生长参数分别进行多模型加权平均处理,据此求出雌虾和雄虾的多模型平均全长渐进值∞分别为123.91 mm和159.41 mm,作为描述雌、雄虾生长参数的稳健估计值。

室内凡纳滨对虾工厂化养殖循环水调控技术与模式

利用臭氧仪、泡沫分离器和粗滤器等组成的循环水处理系统开展室内凡纳滨对虾工厂化养殖。养殖初始用水及在每次循环处理前的来自虾池的循环水，均置于消毒池以臭氧处理4h、曝气2h，初始水经处理细菌总数约杀灭99％，弧菌量小于1cell·mL^-1。试验期间，按4～6d间隔，以水处理系统循环处理养殖水12h，以去除氨氮、亚硝基氮、有机物、悬浮物与细菌等。养殖约60d后，视水质监测结果增加粗滤和泡沫分离次数，并辅以生石灰水调节循环水pH。在128d全程养殖中，未用药和换水，水处理系统有效控制养殖水质指标在虾生长合适范围内，试验池各指标平均值为：浑浊度13．9NTU，pH8．08，氧化还原电位399mV，NH3-Nt（NH3-Nm）0．267（0．015）mg·L^-1，NO2^--N 0．203mg·L^-1，CODMn 10．34mg·L^-1。同时获得良好的养殖效果：收获虾平均体重13．56g，成活率59．6％，单位水体产量4．27kg·m^-3，饵料系数1．01。据试验结果与凡纳滨对虾养殖特点，提出了虾类室内工厂化养殖循环水调控模式。

河口区斑节对虾淡化养殖塘水化学状况与水质管理模式

为斑节对虾 (Penaeusmonodon )淡化养殖设计了 3种水质管理模式 (各设 2个水塘 ) :①全封闭式 ,将纳水河水注入池后不再换水 ,仅靠降雨淡化盐度 ;②半封闭式 ,初始水均取自经贮水塘沉淀、曝晒数日的河口水 ,水深为池深的 80 % ,待幼虾全长至 4cm时 ,据水质状况添加河水 ;③逐步加淡水递降盐度方式 ,幼虾长至 4cm时 ,每隔 1～ 2d添加 2～ 5cm河水 ,水满时排出部分水 ,日均降盐度百分比为 0 .2 %～ 1.6 % ,幼虾长至 8～ 10cm时 ,池水最终盐度可降至淡水范围 (S≥ 0 .5 5 )。结果显示 ,3种方法养殖均获成功 ,单产为2 340～ 2 5 5 7kg/hm2 ;方法①塘的成活率最高 ,为 6 6 .4 %～ 6 7.3% ,盐度降率为 12 .3%～ 16 .4 % ,主要离子总量降率为 10 .9%～ 19.0 % ;方法②因只添加少量河水 ,盐度降率仅为 32 .2 %～ 4 8.3% ,主要离子总量降率为 39%～ 6 4% ;方法③的水质类型始终为海水型 (ClNaⅢ) ,盐度降率为 5 2 .8%～ 93.2 % ,主要离子总量降率为5 0 %～ 96 %。各淡化塘全周期有效氮总量较低 ,平均为 0 .2 1～ 0 .5 0mg/L ,其中NH3 Nt含量占 6 6 %以上 ,DO均呈过饱和状态 (10 9%～ 198% ) ,pH与COD较高 ,分别为 8.79～ 9.2 5与 16 .5 5～ 2 4 .2 1mg/L。

Ca^(2+)、Mg^(2+)、盐度对凡纳滨对虾存活、生长及风味的影响

采取L49(78)安排7水平Ca2+、Mg2+、盐度正交试验,开展60d凡纳滨对虾养殖试验,通过比较凡纳滨对虾成活率、日均增长值、日均增重量及鲜味氨基酸含量,分析养殖水体中Ca2+、Mg2+、盐度三因子对凡纳滨对虾存活、生长及虾体风味的影响;采取L8(27)安排2水平Ca2+、Mg2+、盐度正交试验,分析养殖水体中Ca2+、Mg2+、盐度三因子间交互作用对凡纳滨对虾存活、生长及虾体风味的影响。结果表明:水体中Ca2+、Mg2+、盐度对成活率和虾体鲜味氨基酸都有显著影响(P<0.05),Ca2+、Mg2+对凡纳滨对虾生长具有显著影响(P<0.05),其中Mg2+对成活率影响最大,Ca2+对生长影响最大,而鲜味氨基酸受盐度影响最大。Ca2+浓度为100mg/L和400mg/L,Mg2+为1200mg/L,盐度为10时,成活率最高;Ca2+≥200mg/L与Mg2+≥300mg/L时,生长速度无明显变化,Ca2+浓度为100mg/L,Mg2+浓度为150mg/L,盐度为10~20时,体长和体质量增加最快;Ca2+、Mg2+含量与盐度越高,鲜味氨基酸含量越高,Ca2+浓度为400mg/L,Mg2+浓度为750mg/L,盐度为35和20时,风味氨基酸含量最高;低盐、低钙、低镁水体显著降低了凡纳滨对虾的生长存活;Ca2+与Mg2+对成活率及体质量日均增长具有显著的交互作用影响,Ca2+与盐度对成活率具有显著的交互作用影响,Mg2+与盐度对各试验指标均没有显著影响。

凡纳滨对虾室内封闭式养殖水质变化与氮收支的试验研究

采用模式Ⅰ(臭氧机、增氧机、净水网与复合微生物制剂等)与模式Ⅱ(增氧机、净水网、复合微生物制剂与漂白粉精等)开展室内凡纳滨对虾封闭式养殖试验,探讨了养殖池水质变化规律及氮收支状况。结果表明,在80d养殖过程中,两模式所调控的养殖试验池主要水质指标均控制在对虾生长的安全范围。其中以模式Ⅰ与模式Ⅱ分别调控水质的1号与3号试验池主要水质指标平均值为:pH分别为7.92与7.96,DO分别为6.43与6.37mg·L-1,TAN分别为0.517与0.558mg·L-1,NO2-N分别为0.396与0.318mg·L-1,异养菌总数6863与19cfu·mL-1,弧菌数分别为13456与25cfu·mL-1。两池单位水体产量分别为1.18和1.02kg·m-3。两试验池氮收支估算结果为:投入饲料氮分别占氮总输入94.6%与95.3%,水层与虾苗含氮共占5.4%与4.7%;水层氮(含排污水)占氮总输出50.7%与58.3%,其近似于通常泥底养虾塘水层与底泥含氮之和占氮总输出的比例,其次是收获对虾占氮总输出31.9%与25.3%,池水渗漏等损失输出氮量占氮总输出17.4%与16.4%。

室内凡纳滨对虾养殖密度对水质与生长的影响

在室内不用药、不换水条件下,采用150、350、550和850 ind.m-34种布苗密度,通过60 d淡水养殖试验,探讨了密度对凡纳滨对虾成活率、生长特征与水质的影响以及养殖的合适密度。结果表明,随密度增加水质逐步下降,如DO由6.65 mg.L-1降至6.18 mg.L-1,pH由8.31降至8.15,TNA由0.313 mg.L-1升至0.538 mg.L-1,CODMn由14.36 mg.L-1升至23.29 mg.L-1,各组上述指标除NO2--N间无差异外（P〉0.05）,其余相应指标间均存极显著（P〈0.01）或显著差异（P〈0.05）;成活率随密度增加而下降,由90.5%降至24.2%,但第3、4（35.4%、24.2%）无显著差异（P〉0.05）,其余组间差异极显著（P〈0.01）,但各组水质指标基本均在幼虾生长合适范围;第1～第3组增长量（6.07～6.23 cm）、增重量（4.042～4.575 g）与增长率（430.3%～551.1%）无显著差异（P〉0.05）,与第4组存在极显著（P〈0.01）或显著差异（P〈0.05）;养殖产量第3组最高（799.6 g.m-3,为最低的第4组的1.8倍;试验虾体长与养殖天数间具线性相关（L=at＋b）（a,0.075 1～1.044 0;b,0.897 9～1.189 3）,体重与体长间呈幂函数关系（W=aL3）（a,0.011 6～0.013 9）;据养殖综合效果,室内封闭式淡水养殖凡纳滨对虾可据自身条件,布苗密度可参考350～550 ind.m-3确定。

罗氏沼虾抗病选育群体的抗病性能及其遗传多样性分析

为深入了解罗氏沼虾抗病选育群体的抗病力和遗传信息,通过人工注射溶藻弧菌感染16个罗氏沼虾选育群体,并利用微卫星分子标记对选育群体进行遗传结构分析。结果显示,16个选育群体抗溶藻弧菌感染能力存在明显差别,并从中鉴定出抗病力强的群体3个（SCR11-6、SCR11-11和SCR11-16）,其在感染溶藻弧菌感染后的成活率达80%;抗病力比较强的群体7个;抗病力一般的群体4个,成活率为65%～70%;抗病力差的群体2个,成活率为35%～50%。8对微卫星引物共检测到53个等位基因,每对引物的等位基因数为5～9个,平均为6.625个,多态信息含量（PIC）为0.629 4～0.829 4,平均为0.732 3。16个群体的平均PIC为0.493 2～0.695 6,平均观测杂合度为0.506 2～0.651 3,平均期望杂合度为0.551 9～0.733 2,遗传相似系数平均为0.655 2,遗传距离平均为0.434 4。并对DP和SP两群体罗氏沼虾个体扩增出的差异条带进行统计,分析其与罗氏沼虾抗病性状的相关性。结果表明,5个微卫星位点SUGbp8-103b、SUGbp8-101c、MRMB11、SUGbp8-137和MRMC2分别在203、263、185、335和96 bp等位基因与罗氏沼虾抗病性状存在一定的相关性,其中,位点MRMB11在185 bp等位基因跟抗病性有极显著的正相关性,相关系数为0.282。研究表明,16个选育群体中有4个群体的抗病力较强,同时与其它12个选育群体相比,这4个群体遗传多样性也比较丰富,这些罗氏沼虾群体的筛选为罗氏沼虾抗病新品种的培育奠定了重要基础。

室内罗氏沼虾幼虾养殖密度对水质与生长的影响

通过室内60 d罗氏沼虾幼虾养殖试验,研究了不同养殖密度（150 ind/m3、400 ind/m3、550 ind/m3、800 ind/m3）对水质与幼虾生长特点的影响。试验发现,各密度组水质指标pH、DO、TAN、NH3-N、NO2--N和CODMn均控制在罗氏沼虾生长的适合范围之内,密度对主要水质指标未产生显著性影响;不同养殖密度对幼虾生长指标产生不同程度的影响,最低密度组成活率和增长率与其他各组存在显著性差异（P〈0.05）,次低密度组增长率与最高密度组存在显著性差异（P〈0.05）,最低密度组的增重率与其他各组存在极显著差异（P〈0.01）;4种密度组的罗氏沼虾幼虾体重（w）和体长（L）之间的关系都符合幂函数方程：w=aLb（a的范围为0.013 2~0.015 1,b的范围为3.433 0~3.502 1）;体长（L）和养殖天数（d）间符合线性相关：L=ad＋b（a的范围为0.038 5~0.049 2,b的范围为1.801 1~1.886 1）。室内高密度养殖罗氏沼虾幼虾可据自身养殖条件,参考150~400 ind/m3选用布苗密度。

养殖密度对罗氏沼虾生长、性别分化与性腺发育的影响

通过比较4个养殖密度(7.50×104、12.75×104、42.00×104、97.50×104尾/hm^2)条件下罗氏沼虾的生长、存活、性别分化、性腺发育等指标,研究养殖密度对罗氏沼虾生长、性别分化和早期性腺发育的影响。结果显示,在实验密度范围内,养殖密度显著影响罗氏沼虾的生长、规格整齐度、性别分化与性腺发育,随着实验时间延长,密度对生长的抑制效应越明显;7.50×104尾/hm^2组罗氏沼虾体质量增速加速度与97.50×104尾/hm^2组的倍数由养殖10 d时的2.3上升到80 d时的3.4;低密度组罗氏沼虾性别分化与性腺发育比高密度组早约10 d,但规格显著大于高密度组;7.50×104尾/hm^2组雌虾初始平均体长(4.158±0.592)cm比97.50×104尾/hm^2组大1.09 cm;养殖密度对性别比没有影响,但对雌虾成活率影响较大。研究表明,养殖密度显著影响罗氏沼虾生长和性腺发育,合适的养殖密度是预防罗氏沼虾性早熟的有效措施。

河口区室内幼虾养殖循环水处理技术与模式

利用臭氧与生物滤器循环水处理系统进行室内南美白对虾幼虾养殖。试验期间,按48～72h间隔以臭氧处理养虾循环水2h、曝气2～4h。水处理期间,暂停处理池、养虾池间水循环,过滤系统持续运转。53d中,水处理系统有效控制养殖水质化学指标与微生物指标均在合适范围内,各指标平均值为:NH3-Nt0.41mg·L-1,NO-2-N0.057mg·L-1,COD10.12mg·L-1,氧化还原电位379mV,浑浊度0.6NTU,细菌总数10200cell·mL-1,弧菌数6cell·mL-1;同时获得较高的幼虾成活率(78.3%～80.2%)。根据试验结果与河口水特点,提出了河口区室内养虾循环水处理模式。

罗氏沼虾形态性状对体重的影响

随机选取391尾5月龄罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii),测定体重、体长、全长、头胸甲长、头胸甲宽、头胸甲高、尾节长、额剑上齿数、额剑下齿数以及第1腹节至第6腹节的长、宽、高共27个性状指标。采用简单相关分析和偏相关分析,计算各性状指标间的简单相关系数和偏相关系数,并进行各性状对体重的多元回归分析,剔除偏回归系数不显著(P<0.05)的性状,建立了以罗氏沼虾体长、全长、头胸甲长、头胸甲高、第1腹节宽、第1腹节高、第2腹节宽、第6腹节宽对体重的多元回归方程。在此基础上进行了主成分回归分析和岭回归分析,并建立了其对体重的回归方程。最后计算其对体重的通径系数、决定系数。结果表明:除额剑上齿数和额剑下齿数外,罗氏沼虾其他形态性状对体重的简单相关系数都达到极显著水平(P<0.01),只有体长、头胸甲高、第1腹节宽、第1腹节高和第6腹节宽对体重的偏相关系数达到显著水平(P<0.05)或极显著水平(P<0.01)。通径系数大小顺序与决定系数一致,最大值分别为0.387和0.150。本研究为罗氏沼虾选择育种提供了测度指标。

罗氏沼虾育苗循环水处理技术与模式

将育苗用水经消毒及沉淀处理后作为试验基础用水,应用泡沫分离器、经预处理的生物滤器和紫外线消毒器等处理罗氏沼虾育苗循环水,使水质得到了有效控制。试验期间,对照池以大量换水及用药等传统方式维持水质,而试验池未曾用药和换水,较对照池节约水67.5%;试验池主要水质指标变化范围如下:NH3 Nm:0～0.010mg·L-1,NO2- N:0.01～0.63mg·L-1,pH:7.48～8.37,CODMn:5.42～12.25mg·L-1,细菌总数:(4.2～130)×103cell·mL-1,弧菌数:(0.2～20)×102cell·mL-1;试验组出苗率为40%,高出对照组33.3%。生产性育苗试验中,试验池与对照池均获得了30%的出苗率。据试验结果及罗氏沼虾育苗特点,提出了处理罗氏沼虾育苗循环水的技术与模式。

罗氏沼虾种群SSR分析中样本量及标记量对遗传多样性指标的影响

利用60对微卫星分子标记分别对罗氏沼虾3个养殖群体进行遗传多样性分析,通过比较样本量及标记量对遗传多样性指标的影响,探讨最适宜的样本量及标记量。结果显示,样本量和标记量的大小均对遗传多样性指数有较大的影响,其中样本量与平均等位基因数和平均有效等位基因数呈高度正相关,与杂合度和Nei氏遗传多样性指数分别呈中度、高度相关,样本量为10~30时,遗传参数变化差异显著,样本量大于30,变化差异不显著;标记量与遗传参数也存在不同程度的相关性,标记量为5~25时,各遗传多样性指数变化有明显差异,标记量大于25时,各遗传参数变化较小,多态信息含量不同的标记直接影响到群体遗传参数。性别对群体遗传多样性指标无显著性影响。研究表明,应尽可能选择多态信息含量高的微卫星分子标记开展罗氏沼虾群体遗传多样性分析,可不考虑样本性别,样本量不宜小于30,标记量不宜少于25。

人工湿地联合塘内设施调控生产性虾塘水环境的效果与技术

研究了由表面流与水平潜流组成的复合人工湿地联合使用塘内曝气增氧机与人工净化网调控生产性淡水对虾养殖塘水环境的效果与技术。养殖中后期(约60 d后),湿地以1.65 m/d水力负荷,3次循环处理虾塘废水,有效调控虾塘水质,确保养殖成功。结果表明湿地对废水中有害物质均可程度不等地去除,蓝绿藻得以控制,出口水NO2-N与BOD5分别为极显著(P<0.01)与显著(P<0.05)去除,去除率与去除速率分别为72.6%,0.467 g/(m2.d)与29.7%,2.651 g/(m2 d),3PO 4-P为41.7%,0.022 g/(m2 d),TN为26.1%,2.619 g/(m2 d),CODMn为15.9%,3.738 g/(m2 d),NO3-N去除率仅3.6%,但去除速率较高[0.462 g/(m2 d)]。湿地静止4 d期间,废水中NO2-N与NO3-N去除率达96.8%与93.3%,均极显著去除(P<0.01)。养殖周期试验塘水化学指标均维持在虾安全生长范围内,收获虾8.81 g,9.36 cm;对照塘因爆发蓝绿藻仅养殖60 d,收获虾3.06 g,6.54 cm。试验表明,在不用药、不换水条件下,联合塘内设施,人工湿地以较高水力负荷与低频率运转可有效调控虾塘水质,确保养殖成功。

盐度对凡纳滨对虾生长和氮磷收支的影响

采用海水、河口水与淡水及简易设施开展室内封闭式高密度对虾养殖试验,探讨了盐度对虾生长与氮磷收支的影响。结果表明,100 d养殖试验中,未曾换水与用药,养殖试验池主要水质指标虽有程度不等差异,但均控制在对虾生长安全范围。3个试验组对虾成活率随盐度降低分别显著下降88.2%、53.9%和34.8%,(P<0.05);终末体重,河口水组(9.20 g)显著高于海水组(8.49 g)和淡水组(8.45 g)(P<0.05);单位水体产量随盐度降低极显著下降2 443.52、1 597.50和659.52 g.m-3(P<0.01)。试验池氮、磷收支估算结果显示:各试验组氮磷主要收与支的同类项所占比例较接近,特点相同,投入饲料氮与磷分别占氮与磷总收入98.9%、98.1%、96.4%与99.3%、98.9%、97.9%,水层与虾苗共含氮与磷分别占1.1%、2.0%、3.7%与0.7%、1.1%、2.1%;排污、不换水水泥池水层氮占氮总输出比例最高,略高于虾体;污水磷占磷总输出比例明显高于其余项,此不同于泥底虾塘为沉积物氮、磷占氮、磷总输出的比例最高。试验池水层与污水共含氮与磷分别占氮与磷总输出57.7%、61.3%、57.2%与67.9%、66.7%、73.3%,低于虾塘泥底沉积物与水层合计氮与磷占总氮与总磷输出比例;收获虾体氮、磷占氮、磷总输出:35.3%、34.5%、34.4%与19.3%、18.9%、19.0%,饲料利用转化率较好;池水蒸发渗漏与池壁吸附等损失输出氮、磷占氮、磷总输出:7.0%、4.2%、8.5%与12.8%、14.3%、7.6%。