1株泛耐药肺炎克雷伯菌耐药机制的研究

目的研究1株泛耐药肺炎克雷伯菌(Kpn)的耐药机制。方法用Vitek-2系统进行细菌鉴定,纸片扩散法和肉汤稀释法进行药敏试验;PCR和DNA测序检测β-内酰胺酶基因和7个管家基因,多位点序列分型(MLST)进行7个管家基因的序列分析;改良Hodge试验、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)确证试验、利用抑制剂的双纸片增效试验和改良ESBLs确证试验检测β-内酰胺酶表型。结果该菌株呈泛耐药性,携带KPC-2和CTX-M-15基因,MLST显示ST11型;改良Hodge试验检出碳青霉烯酶;ESBLs确证试验呈假阴性结果,改良ESBLs确证试验呈阳性结果;用3-氨基-苯酚硼酸(APBA)的双纸片增效试验呈阳性结果,显示产KPC型A类碳青霉烯酶。结论该菌株的泛耐药性可能是由于产KPC酶,利用抑制剂的表型试验能简便准确地检出KPC和ESBL。

γ-谷氨酰转肽酶的病理生理基础和新的临床应用

血清γ-谷氨酰转肽酶（GGT）的测定是低廉的、敏感的实验室指标，它是反应肝功能异常和过量酒精摄入的传统标志。近来研究表明，GGT是氧化应激反应的标志，是独立的风险因子，在一些疾病的发生、病死率方面的预警优于肝脏疾病，如心血管疾病、代谢综合征、肾病等。GGT的重要生物学功能是参与细胞内外γ-谷氨酰循环，是决定细胞内外谷胱甘肤（γ-谷氨酰-L-半胱氨酸-L-甘氨酸）（GSH）水解的酶类，是参与细胞抗氧化的重要因子。在抗氧化／抗毒素方面起到防御的作用，并且平衡细胞的增殖和凋亡。同时，GGT引起的持久性器官污染进而引发肿瘤的发生已越来越受到重视。另外大量实验证实在动脉粥样斑块中检测到GGT，GGT在斑块内部稳定性方面起着相关的作用：如细胞成分的损害性凋亡，斑块的侵蚀和破裂，血小板聚集的增强和血栓形成等。该文正是通过GGT的病理生理基础理论，阐明这些疾病与GGT相关的发病机制。最后，简单表述GGT的检测，有蛋白层面酶活力的测定，组织、细胞中GGT含量的测定和GGT基因检测等。

急性心肌梗塞实验诊断指标的评价

本文应用一步夹心ＥＬＩＳＡ法定量检测血清肌钙蛋白（ＴｎＴ），３３名健康者浓度范围０～０．０８μｇ／Ｌ，１２名急性心肌梗塞（ＡＭＩ）患者均超过参考值上限（０．２μｇ／Ｌ），同时检测血清肌红蛋白（Ｍｂ），血清磷酸肌酸激酶同工酶（ＣＫ－ＭＢ）作比较后发现，ＴｎＴ灵敏度高，升高时间早，持续时间长，可判断梗塞预后，是一种特异的心肌损伤血清标志物。

聚凝胺配血方法中技术要点的探讨

作者在大量临床应用的基础上 ,探讨了影响聚凝胺方法配血的各种因素 ,包括加样的准确性、孵育的温度、时间、离心条件及结果观察技术等 ,认为其中加样的准确性最为重要。实验数据显示血清及红细胞的加样量每增加一倍 ,抗 D抗体的检测灵敏度降低 4～ 8倍 ,因此注意血清及红细胞加样量的准确性是聚凝胺配血方法的技术要点。

碳青霉烯类药物-EDTA纸片法检测肺炎克雷伯菌产KPC酶

目的 评估一种新方法（碳青霉烯类药物-EDTA纸片法）检测肺炎克雷伯菌产碳青霉烯酶表型的效率.方法 2012年1月～8月临床分离于上海浦东医院和上海第九人民医院的42株非重复的产碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌,菌种鉴定和药物敏感试验分别由VITEK-2 GN和纸片扩散法检测;β-内酰胺酶基因经Polymerase Chain Reaction（PCR）扩增、DNA测序确认;改良霍格试验（modified Hodge test,MHT）及以厄他培南、美罗培南和亚胺培南为底物的EDTA纸片法试验分别进行碳青霉烯酶表型试验;以PCR基因扩增试验结果为金标准,分析两种表型试验的灵敏度、特异度,判断EDTA纸片法的最佳底物.结果 42株产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌对亚胺培南、美罗培南和厄他培南的耐药率分别是97.6%,97.6%和100%;42株产碳青霉烯酶菌株均含肺炎克雷伯菌产碳青霉烯酶（Klebsiella pneumoniae carbapenemase,KPC）-2基因;MHT的灵敏度和特异度分别是95.2%和94.3%.以亚胺培南为底物的EDTA纸片法效果最好,灵敏度和特异度达到了97.6%和100%.结论 以亚胺培南为底物的EDTA纸片法优于MHT,可用于产KPC酶肺炎克雷伯菌的表型检测.

两种酶法糖化清蛋白检测系统的可比性及偏倚评估

目的对两种酶法糖化清蛋白(GA)检测试剂盒的检测结果进行方法学比对及偏倚评估。方法按照美国临床和实验室标准化协会(CLSI)的EP9-A2文件要求,以日本旭化成制药株式会社酶法GA%检测试剂盒为参比试剂,以宁波美康生物科技股份有限公司酶法GA%检测试剂盒为试验试剂,采用西门子公司ADVIA 2400全自动生化分析仪对GA%进行检测,判断两种试剂检测结果的可比性。结果两种试剂检测结果相关性良好,相关系数r=0.987,差异有统计学意义(P<0.01);结果的相对偏差在临床可接受范围。结论两种酶法GA检测试剂检测结果一致性较好,结果有可比性。

ICU患者感染鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药性及相关耐药基因分析

目的分析医院ICU病房患者感染鲍曼不动杆菌的耐药性及耐药基因,以指导临床抗感染治疗合理用药,更好地控制ICU病房感染发生。方法从本院ICU患者的相应部位收集标本,分离鉴定鲍曼不动杆菌,采用纸片扩散法对其进行碳青霉烯类抗菌药物耐药性分析。从分离菌株提取基因组DNA,并设计相应引物,采用PCR扩增OXA-23、OXA-24、OXA-51、OXA-58和NDM-1金属酶基因,对OXA-23基因和NDM-1金属酶基因扩增产物进行纯化并测序。结果 67株ICU病房患者感染鲍曼不动杆菌临床分离株对亚胺培南、美罗培南、帕尼培南、法罗培南、厄他培南、比阿培南的耐药率分别为86.0%、59.0%、71.0%、42.0%、39.0%和53.0%。PCR扩增鲍曼不动杆菌的OXA-23型酶基因片段大小为796bp、OXA-51型酶基因片段为862bp、OXA-58型酶基因为912bp、NDM-1金属酶基因片段为287bp,未扩增出OXA-24型酶基因。对纯化的OXA-23型酶基因和NDM-1金属酶基因PCR产物测序,得到相应的序列基因。结论本院ICU病房患者感染的鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗菌药物产生了不同程度的耐药性,这与患者长期大量使用此类药物有关。该分离菌耐药基因携带率较高,治疗时应合理选用药物。