恶性肿瘤患者嗜酸性粒细胞增多性浆膜腔积液分析

目的对恶性肿瘤患者嗜酸性粒细胞增多性浆膜腔积液进行分析,探讨嗜酸性粒细胞增多与恶性肿瘤的关系,为临床诊断治疗提供参考。方法浆膜腔积液常规检查的制片采用推片法,以改良的瑞吉复合染色法鉴定细胞。结果40例恶性肿瘤患者嗜酸性粒细胞增多性浆膜腔积液细胞涂片分类嗜酸性粒细胞相对数为10%-86%,均值为28.2%。查见恶性细胞24例,未查见恶性细胞16例。28例已确认远处转移。结论恶性肿瘤患者浆膜腔积液中出现嗜酸性粒细胞增多可能提示疾病的恶化和愈后不良;恶性肿瘤患者的浆膜腔积液嗜酸性粒细胞增多与血液嗜酸性粒细胞不一定平行。

胸腺嘧啶磷酸化酶在结直肠癌组织中的表达

目的 研究胸腺嘧啶磷酸化酶 (thymidinephosphorylase ,TP)在结直肠癌组织中的表达 ,为临床用药提供指导。 方法 运用实时荧光定量RT -PCR和ELISA方法分别从mRNA和蛋白质水平对TP在结直肠癌组织及相邻正常组织中的表达进行检测。结果 无论是在mRNA还是蛋白质水平 ,肿瘤组织中的TP表达高于其相邻正常组织 ,肿瘤组织中的TP蛋白水平为 7.82± 4 .31ng/ μgTPO ,mRNA水平为 1.6 6± 0 .76 6 ;正常组织中TP蛋白水平为 5 .0 3± 2 .4 8ng/ μgTPO ,mRNA水平为 1.0 5± 0 .6 0 ;并且ELISA结果与实时RT -PCR结果具有一定的相关性 (r =0 .81)。结论 胸腺嘧啶磷酸化酶在结直肠肿瘤中的表达对于临床使用 5 FU类药物具有指导意义。

FQ-PCR检测造血干细胞移植受者HCMV感染及与淋巴细胞免疫表型变化的关系

目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测人巨细胞病毒（HCMV）DNA含量在异基因外周血造血干细胞移植（allo-PBSCT）受者HCMV激活感染中的诊断价值和淋巴细胞免疫表型变化与HCMV激活感染的关系。方法应用FQ-PCR和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测allo-PBSCT后受者HCMV DNA和抗HC-MV lgM抗体;用流式细胞仪测定淋巴细胞亚群。结果39例allo-PBSCT受者中19例检出HCMV DNA（〈30 d的有5例,2-3个月的13例,〉100 d的1例）。HCMV感染后血清HCMV、IgM阳性检出率非常低（4/19）,且出现时间较晚。移植后早期HCMV DNA阳性组与阴性组及健康组比较CD4^＋细胞、CD19^＋细胞及CD4/CD8比值显著下降,CD8^＋细胞和CD16＋56^＋细胞升高。HCMV阳性患者CD4/CD8比值在感染前后比较差异也有统计学意义。结论allo-PBSCT后HCMV活动性感染易发生于allo-PBSCT后早、中期,高峰期在移植后30-60 d;HC-MV活动性感染与细胞免疫功能紊乱互为因果,加重病情。

利用微滴数字PCR进行CpG岛甲基化表型结直肠癌分子分型

目的:利用微滴数字PCR(droplet digital PCR,DD-PCR)技术进行CpG岛甲基化表型(CpG island methylation phenotype,CIMP)结直肠癌分型,并探讨以血浆游离DNA进行CIMP分型的可行性。方法:收集2008到2012年在长海医院行结直肠癌手术的患者216例,抽提肿瘤组织DNA和血浆游离DNA,重亚硫酸盐处理后,利用DD-PCR进行CIMP分型。CIMP分型选用CACNA1G、IGF2、NEUROG1、RUNX3、SOCS1五个基因的甲基化位点,利用免疫组织化学技术(IHC)检测P53突变情况,以巢式PCR测序方法检测K-RAS和BRAF突变。结果:216例肿瘤中17例(7.9%)存在BRAF突变,96例(44.4%)存在K-RAS突变和112例(51.9%)P53-IHC(+)。31.5%(68/216)的结直肠癌为CIMP(+)(5个基因位点中高甲基化位点数目≥3),82.3%(14/17)的BRAF突变属于CIMP(+),而只有9.4%(9/96)的K-RAS突变和7.1%(8/112)的P53突变属于CIMP(+)。除了K-RAS,BRAF和P53突变外,同CIMP(-)结直肠癌相比,CIMP(+)肿瘤还具有独特的临床病理特征:肿瘤更易发生在结直肠的近端位置,黏液性癌比例偏高,分化程度较高,CIMP(+)患者生存时间显著短于CIMP(-)患者。利用血浆游离DNA进行分型和利用肿瘤组织进行分型的一致性为93.4%、灵敏度为87.2%、特异性为100%。结论:CIMP(+)结直肠癌具有独特的临床病理特征,且预后较差;在缺乏肿瘤组织的情况下,利用DD-PCR对血浆游离DNA进行CIMP分型是可行的。

高压氧对鼠血细胞免疫功能的影响（论著）

目的：了解高压氧对免疫功能的影响。方法：高压氧作用后，摘眼球取血，对正常和荷瘤Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠的ＲＢＣ－Ｃ３ｂ受体花环率，ＲＢＣ免疫复合物花环率及肿瘤细胞。淋巴细胞花环率进行了观察。结果：（１）高压氧处理组的ＲＢＣ－Ｃ３ｂ受体花环率明显高于对照组（Ｐ＝０．００７）；（２）肿瘤高压氧处理组的ＲＢＣ－Ｃ３６受体花环率明显高于单纯肿瘤接种组（Ｐ＝０．０２１）。（３）肿瘤高压氧处理组的肿瘤细胞－淋巴细胞花环率明显高于对照组（Ｐ＝０．００５）；（４）肿瘤高压氧处理组的肿瘤细胞：淋巴细胞花环率明显高于单纯高压氧处理组（Ｐ＝０．０３６）。（５）各组的ＲＢＣ－ＩＣ花环率无明显变化。结论：（１）压力为０．２ＭＰａ（２ＡＴＡ），氧浓度为８７％的高压氧不仅可以提高正常小鼠的免疫功能，而且可以提高荷瘤小鼠的免疫功能；（２）该条件的高压氧可使移植瘤引起的免疫功能低下程度得到减轻。