上海地区初次献血者肝炎血清学标志的调查

对乙型肝炎血清学标志在献血者人群中的阳性率,我国虽曾做过不少调查,但由于所用检测方法不够精确,各地报告很不一致。本调查中用美国Abbott公司的酶免疫试剂检测了上海地区1004名初次献血者的HBsAg、抗-HBc和抗-HCV,现将结果报告如下。

上海地区汉族人血栓调节蛋白基因1418位多态性研究

目的:探讨上海地区汉族人群中血栓调节蛋白(TM)胞外编码区基因片段是否存在多态性。方法:以基因组DNA为模板,用PCR扩增目的片段,构建测序质粒,进行测序分析。结果:28名上海地区汉族正常人标本中,TM1418位基因型为T/C16名、T/T10名、C/C2名。结论:上海地区汉族人群中TM胞外编码区基因片段1418位存在C/T两态,且以基因型T/C(表型为TM455V/A)和T/T为主(白人和黑人以基因型C/C为主),等位基因T的频率(64.3%)明显高于白人(<35%)和黑人(<7%)。

肝炎检验中血清学标志物选择的探讨

病毒性肝炎已有五型血清学标志物10余种,各具不同的临床意义。在临床初步诊断为肝炎时,应选择检测哪些标志物?目前检测这些标志物的国产试剂质量是否符合要求?

滴金免疫测定法在检测日本血吸虫抗体中的应用

滴金免疫测定法(DIGFA)是以胶体金作为标记物的快速斑点免疫结合试验,抗原、抗体通过渗滤在膜上进行反应,阳性结果出现红色斑点。本文用血吸虫虫卵浸出液为抗原,金标记A蛋白为显示剂,建立了检测血吸虫抗体的DIG-FA。以本法检测血吸虫病患者血清81份,阳性卒92.6％;献血者血清50份,特异性为98％;42份产前检查的孕妇血清均为阴性;6例华枝睾吸虫患者未出现交叉反应;6例并殖吸虫患者中4例出现不同程度的阳性反应,其中3例环卵反应亦为阳性,环沉率8～15％。提示本法的敏感性和特异性与环卵反应相近。

抗rhNDPK-A单克隆抗体的制备及鉴定

目的 :研制抗rhNDPK A (recombinanthumannucleosidediphosphatekinase A)单克隆抗体 (mAb) ,并鉴定其特性。 方法 :以纯化的rhNDPK A免疫BALB/c小鼠 ,采用杂交瘤技术制备抗rhNDPK AmAb ;用免疫双扩散鉴定Ig亚类 ;West ernblot鉴定mAb的特异性 ;间接ELISA检测mAb的腹水效价、亲和常数 ,并进行表位分析。结果 :获得 6株可分泌特异性mAb的抗rhNDPK A的杂交瘤细胞系 2D9、8C7、13E2、15D9、15E3和 2 0D9,Ig亚类均为IgG1;其效价为 1× 10 -4～5× 10 -6;亲和常数为 4 .5× 10 -9～ 2 .8× 10 -10 mol/L ;共有3个抗原表位。结论 :获得抗rhNDPK A的mAb 。

以合成多肽为抗原检测EB病毒抗体的酶免疫测定法

用固相合成肽方法合成了３ 个ＥＢＶ多肽抗原， 建立了测定ＥＢ病毒抗体的酶免疫测定法。共测定４５ 份鼻咽癌病人血清标本， 阳性率为８９％ 。本方法观察结果方便， 操作简单， 试剂稳定。

活化的硝酸纤维膜用于HIV抗体滴金免疫法测定

本文比较了硝酸纤维膜的活化与不活化用于ＨＩＶ抗体的滴金免疫测定，且对方法学进行了考核。１材料１．１ＨＩＶ多肽抗原本室制备［１］。１．２血清标本１５份ＨＩＶ抗体阳性血清由澳大利亚皇家布里斯班医院、亚历山德拉公主医院及上海市卫生防疫站提供，５６份正常人血...

两株甲胎蛋白抗原决定簇的单抗在ELISA检测中的应用

应用杂交瘤技术获得了两株抗AFP单抗,命名为G4和A6-C6。用ELISA方法测定证明该两株单抗是抗不同的抗原决定簇。其腹水的抗体滴度G4和A6-G6分别为4-5×10^(-5),1×10^(-6)。免疫双扩散试验表明G4、A6-C5均属IgGl。用这两株单抗建立了检测AFP的双位点ELISA方法,经临床初步应用得到满意的结果。

抗子宫内膜抗体和子宫内膜异位症

目的：研究抗子宫内膜抗体（ＥＭＡｂ）与子宫内膜异位症（内异症）的关系。方法：改良法提取、纯化正常人及内异症患者的子宫内膜抗原（ＥＭＡｇ），分析其氨基酸组成，并用ＳＤＳＰＡＧＥ及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析两者蛋白质组成及抗原特异性；建立ＥＬＩＳＡ方法并测定、分析正常人及内异症患者血清ＥＭＡｂ。结果：正常人ＥＭＡｇ有２条蛋白质条带（４８０ｋＤ和大于９７．４ｋＤ）；内异症患者则有３条蛋白质条带（４６０、５４０和大于９７．４ｋＤ），前者仅１条蛋白质条带（大于９７．４ｋＤ），后者则３条蛋白质条带可与ＥＭＡｂ特异反应，且两者在氨基酸组成上亦有差异；内异症患者血清ＥＭＡｂ阳性率明显高于正常人及非内异症（其它妇科疾病）患者。结论：ＥＭＡｂ与内异症密切相关。

单克隆抗体的制备──不同诱导剂预处理小鼠的比较

常用单抗制备的方法是将能分泌抗体的杂交瘤细胞接种同品系小鼠腹腔诱生含单抗的腹水。为了提高单抗腹水的产量，比较应用硅胶Ｈ、石蜡油及不完全佐剂，分别预处理ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。同时比较了硅胶Ｈ不同剂量及不同时间预处理小鼠作用。实验结果表明硅胶Ｈ诱导单抗腹水产量要比其它２组高，有显著差异（Ｐ＜０．０１）。硅胶Ｈ处理最适条件的实验表明２～５ｍｇ为无毒性的有效剂量。而硅胶Ｈ预处理和杂交瘤细胞接种的间隔期以７ｄ为宜。以此条件制备单抗腹水效果良好。

快速斑点免疫结合试验

斑点免疫结合试验(dot immunobinding assay,DIBA)是从ELISA 发展的较简便的标记免疫测定方法,其特点是以微孔薄膜作为固相载体,阳性结果在膜上出现着色斑点.近几年来利用微孔膜可作为滤膜的特性,创造了各种简便、快速的DIBA。

尿微量蛋白测定对高血压肾损害临床意义的探讨

用免疫速率散射浊度法测定了238例高血压患者尿液中白蛋白（Alb）、转铁蛋白（TRF）、a1-微球蛋白（a1－MG）和IgG的含量，阳性例数依次为94、89、74和50。有任一种蛋白阳性者共170例（71．4％），其中仅21例常规尿蛋白定性阳性。Alb阴性对例中有12例TRF阳性，和19例仅表现为a1－MG增高。50例尿IgG增高的病人尿Alb或TRF均增高，仅1例常规尿蛋白阴性，但IgG测定可反映肾小球损害的程度。高血压患者测定尿中以上四种蛋白对肾损害的早期诊断有重要意义。

一种新的免疫-PCR系统的建立和应用研究

把PCR技术作为指示系统引入免疫检测中，建立了免疫－KR技术。在本研究中，以PEI作交联剂，首次成功地将特异性抗体直接与DNA交联，构建了三种Ab－DNA基因探针，组成新的免疫-PCR检测系统．此三种特异性汕Ab-NDA探针可用于检测三种相应抗原。检测HSA抗原的最低含量可达10－10mg／ml，灵敏度比ELISA高106倍。

磁珠分离酶联免疫测定法在检测人血清肌红蛋白中的应用

目的 建立一种宽范围的定量检测人血清肌红蛋白(Mb)的磁珠分离酶联免疫测定法。方法 使用 国产聚苯乙烯磁珠,经碳化二亚胺活化表面自由羧基,得以与抗Mb单抗偶联,用此抗体包被磁珠作为固相,另 一Mb单抗标记辣根过氧化物酶,做双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测人血清Mb,共检测临床血清标 本50份,并与常规板式ELISA作对比。结果 磁珠酶免疫定量检测方法用于人血清Mb定量检测范围可从常 规板式ELISA的5～200μg/L扩展到5～1000μg/L。结论 利用国产磁珠建立的磁珠分离酶免疫定量检测 Mb方法优于常规板式ELISA。

外周血单个核细胞甲胎蛋白mRNA表达与肝癌的研究

目的 应用ＲＴ－ＰＣＲ技术研究原发性肝癌患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）甲胎蛋白（ＡＦＰ）ｍ ＲＮＡ 表达与肝癌转移的关系。方法 原发性肝癌４８ 例。慢性肝病患者２１ 例。正常对照２０ 例。采外周血，肝素抗凝，分离单个核细胞及分离总ＲＮＡ。逆转录酶合成ｃＤＮＡ。设计扩增ＡＦＰ基因的引物，进行巢式ＰＣＲ扩增。结果 正常人ＰＢＭＣ均无ＡＦＰｍ ＲＮＡ 表达。原发性肝癌患者的ＰＢＭＣＡＦＰｍ ＲＮＡ阳性率（２８／４８，５８．３３％ ）明显高于慢性肝病组（３／２１，１４．２８％ ，Ｐ＜ ０．０１）。伴远处转移的原发性肝癌患者全部为阳性（８／８）。结论 ＲＴ－ＰＣＲ检测原发性肝癌患者ＡＦＰｍ Ｒ－ＮＡ 有可能成为反映肝癌细胞血行播散的指标。