上海地区0～6岁汉族儿童维生素D受体基因多态性分布

目的研究上海地区0～6岁汉族儿童维生素D受体基因多态性的分布频率,了解上海地区汉族儿童维生素D受体各种基因型的分布情况。方法随机收集儿保门诊就诊的0～6岁汉族儿童204名,其中男140名,女64名,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法,分析4个限制性酶切位点(ApaⅠ、TaqⅠ、BsmⅠ、FokⅠ)的多态分布。结果0～6岁汉族儿童a、T、b、F等位基因位点占优势,分别占75.0%、97.7%、97.4%、60.0%;aa、TT、bb、Ff等位基因型占优势,分别为52.9%、91.7%、90.2%、47.6%;对每一个体4种等位基因型分析显示以aaTTbbFf、aaTTbbFF、AaTTbbFF占多数,分别为25.5%、14.2%、11.8%。与文献报道的其他人种VDR的基因多态性分布存在差异。结论上海地区0～6岁汉族儿童VDR基因在ApaⅠ、TaqⅠ、BsmⅠ、FokⅠ酶切位点的多态性分布存在种族特异性。

上海市婴幼儿血铅水平与体格发育的关系

目的探讨低水平铅暴露对儿童体格发育的影响。方法在上海市5个区县30所托幼机构，对1969名儿童进行了血铅水平的流行病学调查和体格发育等指标测量，并根据儿童身高、体重、头围和胸围计算其Z标准分，然后与血铅水平进行相关分析和逐步回归分析。结果上海市儿童血铅水平几何均数为0．400μmol／L，≥0．483μmol／L的比例为37．8％，血铅水平的几何均数与儿童身高、体重及头围的Z标准分呈显著的负相关。结论低水平铅暴露对上海市婴幼儿的体格发育可能具有不利影响。

染色体倒位与优生研究

为研究染色体倒位与优生的关系 ,应用外周血淋巴细胞、羊水细胞进行染色体制备和显带 ,并结合遗传咨询和跟踪随访。结果在3727例外周血染色体检查对象中 ,发现44个染色体倒位家系55个染色体倒位携带者 ,检出率为1.47 %。34.54 %倒位携带者有异常表型 ,主要为性分化异常、智能低下、多发畸形。不良孕产是常染色体倒位携带者的主要临床表现 ,其早期自发性流产率为42.86 % ,活产儿占妊娠总数的36.73 % ,其中表型正常14.29 % ,表型异常22.44 %。对9个染色体倒位携带者家系实施产前诊断 ,发现后代均为携带者 ,未见重组染色体异常胎儿发生。提示染色体倒位是常见的染色体结构重排 ,其中Y染色体倒位inv(Y)与性分化、性发育异常有关 ,inv(9)与流产关系密切 ,部分携带者有表型异常。对染色体倒位携带者可通过遗传咨询 ,进行孕前、孕期、产前、产后指导和干预。但对倒位携带者进行染色体病产前诊断是否有必要 ,尚待进一步积累和总结。

染色体平衡易位与优生研究

为研究染色体平衡易位与优生的关系 ,应用外周血、羊水、精液作染色体制备与显带 ,并进行遗传咨询、产前诊断和跟踪随访。对3727例外周血染色体检查发现41个平衡易位家系 (31个相互易位 ,10个罗伯逊易位 )和56例平衡易位携带者 ,检出率为1.50 % (相互易位1.18 % ,罗伯逊易位0.32 % )。不良孕产是平衡易位携带者主要临床表现 ,其早期自发性流产发生率为41.23% ,女性携带者流产率高于男性 ,生育的活产儿占总妊娠数的50 % ,其中表型正常30.7 % ,表型异常19.3 % ;罗伯逊易位携带者胚胎丢失率高于相互易位携带者。少数平衡易位携带者有表型异常 ,主要表现为先天性多发性畸形、智能低下等 ,发生率为12.5 % ;对13例平衡易位携带者进行产前诊断 ,正常核型7例 ,携带者核型5例 ,染色体异常胎儿1例 ,表型异常者7例 ,占12.5 %。提示减数分裂的联会互换产生不平衡重排配子 ,是导致平衡易位携带者不良生育的主要原因 ,部分平衡易位携带者有表型异常。羊水细胞培养染色体核型分析是安全、可行的产前诊断方法 。

硫酸镁治疗缺氧小猪肺动脉高压的实验研究

为探讨硫酸镁治疗新生儿持续肺动脉高压 (PPHN)的疗效 ,以12只实验小猪吸入低浓度氧气造成缺氧性肺动脉高压模型模拟PPHN。通过颈外静脉插入心导管 ,进入肺动脉检测肺动脉压力 (PAP)和心输出量等 ,通过股动脉插管检测体循环血压 ,同时检测心率、血氧饱和度 (SaO2)、血气分析和血镁浓度。结果显示 ,实验小猪缺氧10分钟后肺动脉收缩压 (SPAP)升高53.5%±25.4% (P<0.001) ,舒张压 (DPAP)和平均肺动脉压 (MPAP)分别升高57.1%±31.0%和50.6%±27.8% (P<0.001) ;静脉滴注硫酸镁后SPAS下降24.1 %±5.0 % (P<0.001) ,DPAP和MPAP分别下降22.7 %±7.2 %和19.8%±6.4% (P<0.001)。SaO2 和血氧分压均有升高。体循环血压也有下降 ,但下降幅度较小且与剂量有关。心率有轻度降低 ,心输出量无改变。血镁浓度明显升高 ,从0.79±0.14mmol/L升高至2.74±0.96mmol/L(P<0.001)。提示硫酸镁能显著降低肺动脉高压 ,改善血氧分压 ,对体循环血压、心率及心输出量影响较小 ,而且价格便宜 ,使用方便 ,值得在PPHN治疗中提倡。

S-腺苷-L-蛋氨酸防治全胃肠外营养所致肝内胆汁郁积的实验研究

目的研究S腺苷L蛋氨酸(SAMe)对全胃肠外营养(TPN)所致胆汁郁积的防治效果及其对肝细胞凋亡的作用。方法新生兔24只,随机分为正常对照组、TPN对照组、SAMe治疗组,治疗组在TPN同时加用SAMe100mg/(kg·d)。结果SAMe治疗组血清胆汁酸、ALT、AKP、总胆红素、总蛋白和白蛋白与正常对照组相比差异无显著性(P>0.05),直接胆红素仍高于正常对照组(P<0.01),但较TPN对照组有明显下降(P<0.01)。正常对照组肝细胞形态正常;TPN对照组可见明显肝内胆汁郁积表现,并可见肝细胞轻度脂肪变性;SAMe治疗组肝细胞形态基本正常。正常对照组肝细胞凋亡数为0.263%±0.041%;TPN对照组肝细胞凋亡数为1.060%±0.217%;SAMe治疗组肝细胞凋亡数为0.467%±0.182%,较TPN对照组明显降低(P<0.01)。结论SAMe可有效防治TPN所致郁胆,其作用机理可能与抑制肝细胞凋亡有关。

新生兔全胃肠外营养所致肝损害的实验研究

全胃肠外营养 (TPN)可引起肝脏并发症 ,在新生儿主要表现为肝内胆汁淤积。为研究新生儿TPN肝脏并发症问题 ,建立了新生兔TPN致肝脏并发症的动物模型。24只新生新西兰白兔分为3组 :正常对照组、TPN1周组、TPN2周组。正常对照组母乳喂养1周 ,TPN组动物经输液泵接受持续TPN。TPN1周组血清胆汁酸、胆红素较正常对照组明显增高。TPN2周组有进一步升高。TPN组肝组织可见小叶间胆管胆栓形成、胆管增生、枯否氏细胞及肝细胞胆色素沉积等淤胆表现 ,并可见轻度肝脂肪变性 ;TPN2周组上述改变进一步加重。TPN组肝组织电镜下形态特征为线粒体肿胀、毛细胆管扩张。

国产房间隔缺损堵塞装置内皮化的实验研究

目的 评价国产房间隔缺损(ASD)堵塞装置的内皮化。方法 选用乳猪6头(平均体重7.5kg),利用穿刺针和Rashkind球囊房隔造口术,建立大小不等ASD动物模型;选择适当大小的国产ASD堵塞装置进行封堵;术后1、3和6个月分别将小猪处死(每次2只),取堵塞装置行扫描电镜检查。结果 术后1个月,装置表面被胶原纤维所覆盖,装置边缘见散在内皮细胞;术后3个月,装置表面大部分被内皮细胞所覆盖,伞尖表面光滑,无内皮细胞覆盖;术后6个月,装置表面完全被内皮细胞所覆盖,伞尖表面光滑并有内皮细胞上爬。结论 国产ASD堵塞装置置入动物体内3个月已大部分内皮化,6个月时已完全内皮化。

染色体平衡易位遗传效应的相关研究

目的研究染色体平衡易位的遗传效应。方法应用外周血淋巴细胞培养、染色体显带技术进行核型分析,通过遗传咨询进行跟踪随访。结果在4498例外周血检查对象中,发现52个染色体平衡易位家系、68例染色体平衡易位个体,检出率1.51%,其中相互易位40个家系54例,罗伯逊易位12个家系14例,检出率分别为1.20%和0.31%。平衡易位涉及两条常染色体间与X染色体和多条染色体间相互易位。有异常表型者13例,占19.12%,表现为生长发育落后、智力低下及各种先天异常。结论部分染色体平衡易位个体有异常表型伴智力低下,对智力低下患者可作染色体核型分析。复杂型易位表型异常风险随断裂点数目增加而增高,自发性流产率及生育畸形儿的风险也随之增高。

脑缺氧缺血损伤新生大鼠热休克蛋白70基因的表达研究

目的 对所建立的新生大鼠脑缺氧缺血 (HI)模型进行热休克蛋白 70基因的表达研究 ,评估检测该基因的表达能否作为缺氧缺血及其程度的有用标志。方法 应用自行研制的新生大鼠缺氧实验装置 ,建立新生大鼠脑缺氧缺血模型。应用竞争性RT PCR方法对脑HI模型进行热休克蛋白 70基因表达的检测。结果 HI组在HI后 2h即观察到HSP70mRNA出现明显表达 ,48h达高峰 ,并在 72h内维持较高水平 ,HI后 7d表达明显下降 ,但仍高于正常水平。正常新生大鼠在相应各时段内 ,其HSP70mRNA的表达则极其微弱。结论 缺氧缺血诱导了HSP70基因的表达 ,检测HSP70基因可作为缺氧缺血及其程度的有用标志 。

国产房间隔缺损堵塞器关闭猪房间隔缺损的实验研究

目的 评价国产房间隔缺损(ASD)堵塞器关闭猪ASD的可行性、有效性和安全性。方法 选用3-4周乳猪共6头,体重5-10 kg(平均7.5kg);应用房隔穿刺和Rashkind球囊房隔造口术,建立ASD动物模型;在x线和超声引导下,用测量球囊测定ASD最大伸展直径并结合经胸超声(TTE),选择适当大小的国产ASD封堵器进行堵塞。结果 6头猪完全封堵,仅1例术后即刻有微量的残余分流,24h消失;随访1-6个月,无并发症发生。结论 国产ASD堵塞器关闭猪ASD成功率高、并发症少、创伤小,是一种安全、有效、可行的方法。

Turner综合征130例临床与细胞遗传学研究

为分析和探讨Turner综合征的临床以及细胞遗传学特征,通过遗传咨询和染色体核型综合分析进行疾病诊断 ,确诊了Turner综合征130例 ,年龄17d～38岁 ,其中<1岁3例 ,占2.3%,1～12岁55例 ,占42.3%。身材矮小103/109例 ,占94.5% ,成人身高平均为139cm。智能低下15/66例 ,占22.7 %。发现和证实18种染色体核型以及部分少见特殊病例。提示Turner综合征以身材矮小为主要临床表现 ,婴幼儿以手足背水肿、蹼颈为特征 ,儿童期以矮小为就诊原因 ,成人以闭经、第二性征不发育为主诉 ,细胞遗传学分析为确诊的主要手段。各种类型的染色体核型 ,具有特征性的X染色体数目异常或结构异常 ,与临床有一定的相关性和指导意义。

苯丙氨酸及其代谢物影响P19细胞神经分化的形态学研究

本研究通过免疫组化及活细胞计数法研究了苯丙氨酸及其代谢物对 P19细胞神经分化的影响。结果显示 :在 P19细胞神经分化诱导期加入苯丙氨酸及其代谢物可降低 P19神经元存活率 ,导致 P19神经元肿胀、崩解 ,神经突起纤细且分支少 ,神经纤维丝蛋白的染色性降低 ,同时发现 P19神经元中多极神经元 /单双极神经元的比例下降。本研究表明 ,苯丙氨酸及其代谢物可影响 P19细胞的神经诱导和分化 。

新入学大学生体质指数分布调查

目的调查新入学大学生的体质指数和营养状况.方法统计上海某大学2001 ～ 2003年秋季本专科入学新生2 585例,测得身高、体重、脂肪含量等,按照BMI=体重(kg)/身高2(m2)计算获得BMI值.结果BMI值小于18.5 kg/m2的学生占26.1%,BMI值大于24 kg/m2者占15.6%,其中男生组BMI值小于18.5 kg/m2者人数百分比较女生组少,男生组BMI值大于24 kg/m2者人数百分比较女生组多.结论在新入学大学生中,体型异常者约占总人数的40%,对该人群进行一定的营养指导,并进行长期的随访监测,以期改善其体型与营养状况.

肺动脉高压时EVE动态变化及与肺血管重建过程关系的实验研究

为探讨肺动脉高压时内源性血管弹性蛋白酶 (EVE)的动态变化及其与肺血管重建之间的关系 ,利用野百合碱建立大鼠肺高压模型 ,于实验第2、8、14、21天 ,使用荧光分光光度计检测肺动脉的弹性蛋白离解活性 ,通过右心导管法测定肺动脉压力 ;并在上述时间点 ,对周围肺动脉进行组织病理学分析。结果显示 ,肺动脉的弹性蛋白离解活性在注射野百合碱后的第2天即明显升高(3.87±0.45) ,第8天降为正常 (0.18±0.02) ,第14天再次出现升高现象 (1.45±0.18) ,并一直持续到第21天(1.91±0.22) ;而肌性肺动脉的比例增加在注射野百合碱后第8天出现(32.67±4.23) ,肺动脉中膜的增厚 (4.20±0.37)及肺动脉压力的增高 (21.00±2.10)在第14天后出现。提示EVE活性的早期升高可能是肺动脉高压的一种重要触发因素 ;

以纸片法筛查儿童铅毒性易感性的方法学研究

目的 建立以纸片末梢血筛查儿童铅毒性易感性的方法。方法 以Chelex 10 0为介质及氯仿法抽提基因组DNA ,并比较二者的DNA得率。PCR扩增σ aminolevulinatedehydratase(ALAD)基因片段 ,以限制性内切酶MspⅠ分析ALAD基因型。结果 以Chelex 10 0为介质抽提基因组DNA的得率为 17.1μg/ml,氯仿法抽提基因组DNA的得率为 17.5 μg/ml,两种之间的差异无显著性意义 (P >0 .0 5 )。以两种方法提取的DNA为模板扩增ALAD基因片段及进行ALAD基因型分析均具有较高的特异性 ,但以Chelex 10 0为介质抽提基因组DNA扩增时敏感性有所降低。

21三体综合征的诊断与干预研究

目的在细胞、细胞分子和分子水平对21三体综合征(Downsyndrome,DS)进行诊断和干预。方法采用染色体显带、荧光原位杂交(FISH)、多聚酶链反应(PCR)技术,从外周血淋巴细胞、羊水细胞进行DS的诊断、产前诊断和干预。结果在遗传咨询确诊的446例患者中,21三体型、嵌合型、易位型分别占85.43%、6.05%、8.52%。对252例适应症对象进行改良羊水细胞培养产前诊断,取得满意的成功率,并检出DS胎儿3例。10例DS患儿外周血FISH分析,含3个杂交点细胞占90%,含2个杂交点者为10%。20例DS患儿外周血PCR分析,19例(占95%)在3个位点显示三条带。FISH和PCR的阳性结果与细胞遗传学的检测相一致。结论开展以传统细胞遗传学诊断与产前诊断,结合FISH和PCR技术共用,可最大限度地检出DS。

新生儿肺炎能量代谢测定研究

为探讨新生儿肺炎能量代谢的规律 ,应用开放式间接能量测定仪对15例新生儿肺炎患儿进行睡眠代谢率 (SMR)测定 ,并对19例新生儿肺炎患儿进行静息能量消耗 (REE)测定。结果显示 :新生儿肺炎SMR为166.1±24.1kJ/(kg·d) ,与测定时的体重、体表面积、预测值均呈显著相关关系 ;其REE为171.7±30.3kJ/(kg·d),与肺炎病理状况有关。研究表明 :新生儿肺炎能量代谢有其特殊性 。

用基因芯片研究高苯丙氨酸诱导神经元基因表达谱的改变

为深入了解苯丙酮尿症患者高苯丙氨酸损伤神经元的可能机制,我们将体外培养3 d的胚鼠神经元随机分为两组:高苯丙氨酸组和对照组。高苯丙氨酸组加入0.9 mmol/L苯丙氨酸诱导12 h,对照组加入等体积的培养液,抽提RNA,与大鼠神经生物学芯片U34杂交,检测胚鼠原代神经元高苯丙氨酸作用下表达谱的改变,并用实时荧光定量聚合酶链式反应方法验证基因芯片的结果。发现芯片上1323条总探针组合数中有167条基因表达增加(12.6％),表达下调的已知基因数为7条,占总探针组合数的0.5％。按基因功能,表达上升的基因可分为信号转导相关基因、神经元相关基因、细胞骨架基因、代谢相关基因、离子通道基因、转录相关基因、细胞因子基因、凋亡相关基因等。研究结果证实了以前的报道,如Na+、K+-ATP酶、凋亡、氧化应激、NMDA受体、Ca2+参与了高苯丙氨酸对神经元的损伤过程。结果还显示,在高苯丙氨酸环境下,CaMK Ⅱ、Ras、P38、钙通道基因表达上升,部分与囊泡形成、神经递质释放有关的基因表达增强,与神经递质谷氨酸有关的受体和转运体基因表达上升。我们推测高苯丙氨酸可能激活轴NMDR-Ca2+-CaMK Ⅱ-Ras.-P38,引起神经元突起异常;高苯丙氨酸环境下,神经递质释放可能异常;兴奋性神经递质谷氨酸可能参与了高苯丙氨酸引起的神经元损伤。