脂联素基因多态性与2型糖尿病的关系

目的研究脂联素基因单核苷酸多态性 (SNP) 4 5T→G和 2 76G→T两个位点与上海地区汉族人 2型糖尿病之间的关系。方法采用病例—对照研究方法 ,以聚合酶链式反应—限制性内切酶长度多态性 (PCR RFLP)技术 ,对 195例 2型糖尿病患者和 187例正常对照者脂联素基因SNP4 5、SNP2 76多态性位点进行基因分型。结果SNP4 5和SNP2 6 7两个多态性位点的基因型和等位基因频率在 2型糖尿病组和正常对照组中的分布无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;各组中TG单倍型纯合携带者 (TG/TG)与TG单倍型杂合携带者 (TG/X)或未携带者 (X/X)的体重指数比较均无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论脂联素基因的SNP4 5和SNP2 76多态性位点与上海地区汉族人群中 2型糖尿病无明显相关性。

阿司匹林增加胰岛素抵抗大鼠胰岛素敏感性的实验研究

目的 观察阿司匹林对高脂饮食大鼠胰岛素敏感性的影响。方法 灌服阿司匹林前后采用腹腔注射胰岛素耐量试验 (IITT)观察大鼠胰岛素的敏感性 ,并测定空服胰岛素、血糖和血脂等。结果 高脂饮食 4月、阿司匹林治疗 4周后 ,IITT发现高脂组腹腔注射胰岛素后 1h、1 5h和 2h的血糖及空腹胰岛素和甘油三酯水平显著高于正常对照组 (P <0 0 5或P <0 0 1 ) ;而阿司匹林治疗组腹腔注射胰岛素后 1h、1 5h和 2h的血糖及空腹胰岛素和甘油三酯水平显著低于高脂组 (P <0 0 5或P <0 0 1 ) ,与正常对照组差异无显著性。

胰岛素的长期作用对人脂肪细胞代谢的影响

目的探讨胰岛素的长期作用对人脂肪细胞脂代谢的影响。方法 检测不同浓度胰岛素作用24h后脂肪细胞甘油释放率的基础值和刺激值,并使用RT-PCR检测脂肪分解的关键酶激素敏感性脂酶(HSL)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达。结果胰岛素的长期作用可增加脂肪细胞的甘油释放率,并呈剂量效应和时间效应,100、500、1000nmol/L的胰岛素可使甘油释放率的基础值和刺激值分别增加17%～147%和28%～241%(P<0.01)。胰岛素的长期作用对脂肪细胞的HSLmRNA表达无影响,TNF-αmRNA的表达明显增加。结论在体外胰岛素的长期作用与其短期作用有所不同,可增加脂肪细胞的脂肪分解,具脂肪分解作用的TNF-α表达增加可能发挥了一定的作用。

糖尿病妇女子宫动脉蛋白质差异表达的初步分析

目的 研究女性糖尿病患者子宫动脉蛋白质表达的差异,探讨糖尿病对女性生殖系统血管的影响。方法 14例因子宫肌瘤接受子宫切除术的患者,其中伴糖尿病4例、肥胖症5例,血糖和血脂正常5例(对照组)。分别于术中采集切除的子宫动脉,提取蛋白质后进行双向电泳,用PDQEST软件分析差异表达的蛋白质,并进行质谱分析。结果 蛋白质双向电泳可获得约1200个蛋白质点,不同组血管的差异表达蛋白质点约80个,10个蛋白质点表达差异达5倍,其中6个被确认为已知蛋白,分别为转移抑制因子相关蛋白-14 varient E、双重特异性磷酸酶-1、一种磷脂酶A2、G蛋白信号6调节蛋白、酪氨酸激酶t-Rorl和一种MHC Ⅰ类抗原蛋白。结论 无论与对照组还是与肥胖症比较,女性糖尿病患者子宫动脉蛋白质均呈差异表达。

小檗碱改善高脂饮食大鼠的胰岛素抵抗

目的:观察小檗碱是否能改善高脂饮食诱导的胰岛素抵抗,以探讨小檗碱干预糖耐量受损(IGT)的可能性。方法:8周龄雄性SD大鼠29只,分为正常组(NC,n=9)和高脂组(HF,n=20)。高脂饲料喂养14周后高脂组分为二组,10只大鼠继续喂养高脂饮食,另一小檗碱组(HF+B,n=10)每天灌胃小檗碱150mg/kg体重,治疗6周后进行口服葡萄糖耐量试验和胰岛素耐量试验(ITT),评估小檗碱对胰岛素敏感性的影响。结果:HF组大鼠体重、肝重和附睾脂肪重量均明显高于HF+B和NC组(均P<0.01),HF+B组空腹血糖和葡萄糖负荷后2h血糖明显低于HF组(分别为5.70±0.52mmol/Lvs6.66±0.51mmol/L和7.88±0.46mmol/Lvs8.85±1.01mmol/L),空腹和葡萄糖负荷后2h胰岛素HF+B组也显著低于HF组(分别为0.63±0.25ng/mlvs1.64±0.68ng/ml和1.20±0.21ng/mlvs3.60±0.36ng/ml)。各时间点血糖和胰岛素HF组均显著高于NC组(均P<0.01)。Homa胰岛素抵抗指数HF组明显高于HF+B组(P<0.01)。ITT腹腔注射胰岛素后各时间点血糖下降幅度HF+B组均高于HF组,15min时HF+B组血糖下降23%,而HF组仅下降7%。结论:长期高脂饮食可导致大鼠胰岛素抵抗,小檗碱明显降低高脂大鼠的高胰岛素血症,改善胰岛素抵抗,因此适合于IGT的干预。

泛素在高糖诱导的血管内皮细胞凋亡中的表达

目的检测高浓度葡萄糖对血管内皮细胞凋亡的影响和泛素表达的变化。方法ECV-304细胞在高糖(25mmol/L)和正常糖浓度(5.5mmol/L)DMEM培养液中分别培养24、48、72h,用MTT法检测细胞活力,用琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡特异性的DNA片段,并用Northernblot检测泛素mRNA的变化。结果高糖24、48、72h组细胞OD值比正常浓度组均显著下降(P<0.05);1.8%琼脂糖凝胶电泳在高糖48、72h组检测到细胞凋亡特异性DNA片段;泛素mRNA在高糖24、48、72h组分别增加25.37%、53.47%和63.93%(P<0.05)。结论高浓度葡萄糖可增加血管内皮细胞凋亡,泛素mRNA在高糖诱导的内皮细胞凋亡中表达上调,且发生在凋亡形态学改变之前,泛素参与调节高血糖诱导的细胞凋亡。

TNF-α致脂肪细胞胰岛素抵抗相关基因的克隆和鉴定

目的分离和克隆肿瘤坏死因子α(TNF α)致 3T3 L1脂肪细胞胰岛素抵抗 (IR)的相关基因。方法分化成熟的 3T3 L1脂肪细胞用TNF α处理 4 8h后抽提总RNA ,采用mRNA差异显示技术分离和克隆TNF α引起脂肪细胞IR的基因 ,再通过半定量RT PCR证实。结果经mRNA差异显示技术分离和克隆到 10个已知基因的cDNA ,3个已知表达序列标签 (ESTs)片段和1个新的EST片段。半定量RT PCR证实TNF α上调 3T3 L1脂肪细胞Synip基因和血浆淀粉样蛋白A3(SAA3)基因的表达。结论Synip基因和SAA3基因的表达升高可能与TNF α致 3T3 L1脂肪细胞IR和相关的心血管并发症有关。

Galectin-3 mRNA在甲状腺肿瘤中的表达

目的探讨galectin 3mRNA在良性和恶性甲状腺肿瘤组织中的表达情况。方法对 8例甲状腺乳头状癌、4 5例良性腺瘤结节和 2 1例正常组织 ,采用Trizol抽提总RNA ,RT PCR扩增、凝胶电泳 ,检测galectin 3mRNA的表达 ,并进行统计学分析。结果galectin 3mRNA在甲状腺乳头状癌的表达为 10 0 % ,在良性腺瘤结节和正常组织的表达分别为 88.9%和 4 7.6 %。癌与腺瘤之间没有显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,癌和腺瘤与正常组织之间均有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论galectin 3mRNA对于甲状腺癌的分子诊断不是一个适合的靶标 ,可作为甲状腺乳头状癌鉴定的辅助指标。

hTRIP15对甲状腺激素受体功能的影响

目的确立人甲状腺激素受体相互作用蛋白15(hTRIP15)对甲状腺激素受体(TR)功能的影响。方法应用融合蛋白、蛋白体外翻译及谷胱苷肽S转移酶“拉下”(GSTpulldown)试验研究蛋白—蛋白的相互作用,凝胶阻滞(gelshift)试验检测蛋白-DNA的结合活性。结果经大肠杆菌表达hTRIP15融合蛋白或体外翻译TRα所显示的分子量与预测大小相吻合。hTRIP15及hTRIP15N末端均可与TRα相互作用;hTRIP15抑制TR与TR反应元件(TRE)结合,且增加hTRIP15剂量时更明显。结论提示hTRIP15作为共抑制因子调节TR对靶基因的转录,hTRIP15N端是TR结合功能域,而C端可能为调节功能域。

性激素与动脉硬化性心血管疾病及其相关事件的关系

性激素与心血管疾病及其相关事件密切相关,它可以通过影响人体的脂质代谢、凝血功能及血管内皮功能而改变心血管系统的生理及病理状态。绝经后妇女的激素替代治疗对于心血管疾病的益处与风险仍存在争议,但在实际应用中按照个体化原则处理已经成为激素替代治疗的共识。

中国人膜联蛋白A1基因单核苷酸多态性及其与2型糖尿病的相关性

目的 筛查上海地区汉族人群中膜联蛋白 A1(annexin A1,ANXA1)基因的单核苷酸多态性 (single nucleotide polymorphisms,SNPs) ,并通过关联分析研究其与 2型糖尿病的相关性。方法 选取2 4例 2型糖尿病患者的 DNA样本 ,采用直接测序法对 ANXA1基因的启动子区、全部外显子及其临近内含子区作 SNPs筛查 ,并在其余的 171例 2型糖尿病和 189名正常对照间作进一步的基因分型。结果ANXA1基因测序长度 6 798bp,共检出 7个 SNPs,其中启动子区 2个 (- 7974 C>T,- 70 4 0 G>T) ,内含子区 3个 (+90 5 9A>G,+92 0 4 C>T,+10 4 86 A>G) ,5′-非翻译区 1个 (- 6 6 14 A>G) ,编码区 1个(+1784 A>G)。进一步的基因分型后显示这些 SNPs的等位基因频率在 2型糖尿病和正常对照组之间差异无显著性 (P>0 .0 5 )。结论 ANXA1基因多态性与上海地区汉族人群中 2型糖尿病无显著相关性。