深入开展临床血液学的实验室检查

临床血液病的诊断须以临床资料(病史、症状、体征)为基础,再借助于辅助检查(检验、影像、病理)的结果,通过医师的积极思维,最终得出可靠的诊断.因此,实验室检查是血液病诊断中不可缺少的手段.这种检查一般可分为常用实验和现代实验两部分,根据临床需求将两部分实验紧密结合应用,才能对血液病的诊断、鉴别诊断、疗效观察和预后判断做出正确的结论.

恶性血液病中着丝粒和着丝粒周染色体重排的研究进展

用染色体特异的卫星DNA探针进行染色体荧光原位杂交 (FISH)分析恶性血液病 ,发现着丝粒和着丝粒周染色体的重排并非罕见。分子生物学技术和基因组计划的发展 ,促进了对异染色质分子本质的研究。本文就着丝粒和着丝粒周异染色质的分子结构及其重排机制作一综述。

低剂量氧化砷治疗早幼粒细胞白血病的实验研究

背景与目的:低剂量三氧化二砷(arsenictrioxide,As2O3)是治疗急性早幼粒细胞性白血病(APL)的有效手段之一,它不仅对初发APL病人有效,而且对全反式维甲酸(ATRA)已耐受的复发APL病人可获得完全缓解。然而,目前其诱导APL缓解的机制尚不清楚。为此,本研究试图探讨低剂量As2O3治疗APL的可能机制。方法:以APL细胞株NB4和来源于APL患者骨髓的原代细胞为模型,通过观察细胞形态、对四氮唑蓝的还原能力和细胞表面分化抗原的变化来鉴定细胞分化;并应用免疫荧光和Westernblot分析细胞内PML-RARα融合蛋白的变化。结果:0.25μmol/LAs2O3联合环腺苷酸(cAMP)拟似物8-对氯苯硫基环腺苷酸(8-CPT-cAMP)可诱导NB4细胞和原代细胞分化,而且该效应能被蛋白激酶PKA的抑制剂H89抑制。进一步研究还显示8-CPT-cAMP可以促进As2O3介导的PML-RARα融合蛋白降解。结论:cAMP可增强As2O3对APL细胞的分化诱导效应。

缺血性中风高凝状态的临床研究

本文用24项新颖的指标,对121例正常人及40例缺血性中风患者进行了临床研究。结果表明,患者的凝血因子增高,抗凝因子减低,血小板功能亢进,血液粘稠度增加。揭示患者体内有高凝状态存在,为本病的防治提供了依据。

正常孕妇产前和产后抗凝和纤维蛋白溶解变化的研究

本文报道早孕、中孕、晚孕和产后第1～2天、第3～4天、第5天以上的正常孕(产)妇的抗凝和纤维蛋白溶解(纤溶)的研究结果。抗凝系统中ATⅢ_A和ATⅢ_(Ag)减低,产后第1～2天即恢复至正常;PC_A和PC_(Ag)正常或减低,产后第3～4天或第5天以上才恢复至正常;TPS和FPS有不同程度的减低,产后第5天以上仍未恢复至正常。纤溶系统中t-PA和PAI_s增高或正常,产后第5天以上仍未恢复至正常;PLG升高,产后第5天仍未恢复正常;PL减低,产后第1～2天即恢复至正常。FDP_s明显升高,产后第2～4天恢复至正常。

病毒性肝炎患者凝血纤溶系统的研究

目的:研究病毒性肝炎患者凝血纤溶状态的改变,探讨各指标对于肝炎的提示作用。方法:对正常人和各类肝炎患者检测凝血因子、AT、PC、PS等29项指标以反映凝血抗凝系统状态;检测t-PA、PL、PAI、PLG、FDP、α_2PI、DD、PAP等10项指标以反映纤溶系统状态。用SAS软件进行统计分析。结果:除急性肝炎患者因子Ⅱ:C、Ⅸ:C、Ⅹ:C、Ⅻ:C、Fg、PAP:Ag、DD不改变外,其余各类肝炎患者各指标与正常人比较均有显著差异;各指标均与肝炎的严重程度相关;AT/α_2PI比率均<1;α_2PI低于正常人的40％时,病人可出现出血;AT<20％预后不佳;vWWF:Ag/Ⅷ:C比值升高提示患者有并发DIC的可能。结论:肝炎患者抗凝活性下降,存在着纤溶;各指标可用于评价肝脏损伤,防治出血,判断预后。

急性白血病免疫治疗的研究现况和前景

要进一步延长急性白血病治疗后缓解期和消灭残余微量白血病细胞,重要方法之一是开展免疫治疗。在研 究中的免疫治疗方法有4种:①单克隆抗体(单抗),其中Mylotarg(抗CD33单抗接上细胞毒抗生素利东霉素)用于治 疗复发和难治急性髓性白血病(AML)及急性早幼粒细胞白血病(APL)分子复发,取得良好效果;Campath-1H(抗 CD52单抗)治疗幼淋细胞白血病(PLL),关罗华治疗B-PLL,缓解率高。其他研究的单抗尚有IL-2单抗治疗急性T 细胞白血病、抗220KD单抗6G7治疗急性白血病、重组免疫毒素BL22(抗CD22)治疗毛细胞白血病以及一些用同位 素标记的单抗治疗各种急性白血病;②过继性细胞免疫治疗,用细胞因子诱导的杀伤细胞、同种反应NK细胞、同种或 自身白血病特异的CD8+细胞毒T淋巴细胞和其他免疫效应细胞;③细胞因子及其他免疫调节刺,诸如IL-2,IL-12, GM-CSF,CD40L,FLT-3L,沙利度胺及其衍化物;④白血病疫苗,有抗原特异的、白血病细胞为基础的、负载白血病抗 原的树突状细胞(DC)和白血病来源的DC疫苗等几种不同刑型,以后两者剂型更受重视。总之,到目前为止,急性 白血病免疫治疗中最有效的方法是应用单抗,其他大多数方法也已显示应用前景,值得进一步研究。

酵母双杂交研究与RIG-G相互作用的蛋白

目的应用酵母双杂交技术研究能够与维甲酸诱导的G基因 (RIG -G)发生作用的蛋白 ,以了解其功能。 方法应用酵母双杂交技术 ,以RIG -G为诱饵 ,筛选人类骨髓cDNA文库 ,寻找能与之相互作用的蛋白。利用生物信息学 ,一对一酵母回复性杂交 ,β -GAL实验等提供的信息 ,筛除假阳性克隆 ,确定阳性克隆。 结果经过酵母双杂交共获得 10 9个克隆 ,经过验证 ,有 2 4个阳性克隆 ,它们分别是细胞的信号传导蛋白、细胞骨架蛋白、激酶等。 结论为了研究诸如RIG -G新基因的功能 ,酵母双杂交技术是可靠的分子生物学技术。

低分子量肝素的研究进展

低分子量肝素广泛应用于血栓栓塞性疾病的预防及治疗,其有效性和安全性均优于普通肝素。本文就其基础研究、临床应用情况及实验室监测指标等作一综述。

冠心病和缺血性中风高凝状态的研究

本文对346例次各型冠心病(CHD)、177例次缺血性中风(IS)患者及604例次正常人进行了血小板功能和凝血、抗凝的检测。结果发现,各型 CHD 和 IS 时,PAgT、β-TG 和 PF_4、TXB:的血浆水平升高,6-酮-PGF_(1α)则降低;VWF:Ag 和因子Ⅷ:C 水平升高,ATⅢ:A 降低、PLG:Ag升高。表明患者存在高凝状态或血栓形成,此为研究高凝状态提供了客观依据。

急性白血病止凝血异常的初步研究

止凝血异常是急性白血病最常见的临床症状之一。本文应用25项凝血、抗凝、纤溶指标对20例急性白血病患者进行检测。 材料与方法 1.研究对象 (1)正常人组 20例,男女各10例,年龄18～61岁,平均年龄39.2岁。近一个月内无服药史(包括避孕药)。 (2)急性白血病组 20例,男12例,女8例,年龄17～72岁,平均年龄45.5岁。

益母草对心肌缺血大鼠血液流变学及血栓形成的影响

目的:观察益母草注射液对心肌缺血大鼠血液流变学各项指标、血小板聚集率及体外血栓形成的影响。方法:结扎大鼠冠状动脉左室支复制心肌缺血的动物模型。心肌缺血1小时后从尾静脉注入益母草注射液,缺血2小时后取血栓测各项指标。结果:益母草注射液能明显降低大鼠心肌缺血过程中升高的全血粘度、血浆粘度、血沉及血浆纤维蛋白原(P<0.01～0.001),并可降低二磷酸腺甙(ADP)及胶原诱导的血小板聚集率(P<0.05～0.01);显著抑制体外血栓的形成,其主要表现为使血栓长度明显缩短(P<0.01),血检湿重和干重显著减轻(P<0.05～0.01)。结论:益母草注射液可减轻心肌缺血过程中血液粘度的升高,抑制血小板聚集及血栓形成,因而具有抗心肌缺血的作用。

AT基因13387-9delG突变引起遗传性抗凝血酶缺陷症的分子病理机制研究

目的 研究AT基因 13387 9delG突变引起AT缺陷症的分子病理机制。方法 用大引物法构建 13387 9delG突变体AT重组表达质粒 (ATM) ,并将其和正常AT重组表达质粒 (ATN)分别用Superfect 试剂转染COS7细胞或CHO细胞 ,进行体外表达试验、脉冲追踪试验以及细胞免疫荧光染色。结果 ATM转染的COS7细胞培养上清液中检测不到AT抗原 ,而在细胞裂解液中 ,其AT抗原仅为转染ATN的 2 7 13%。脉冲追踪试验发现 ,在ATM转染的COS7细胞培养上清液中 ,检测不到3 5S标记的AT蛋白 ,在chase 0min时 ,ATM细胞内3 5S标记的AT蛋白只有ATN的 2 7 8% ;在chase 180min时 ,ATM细胞内3 5S标记的AT蛋白为 0min时的 5 0 %左右。细胞免疫荧光试验的结果表明 ,ATM转染的CHO细胞内荧光强度明显低于ATN转染的CHO细胞。结论 编码的突变AT蛋白分泌障碍和细胞内快速降解 ,是AT基因 13387

遗传性凝血因子Ⅺ缺陷的分子发病机制研究进展

凝血因子Ⅺ(FⅪ)是血浆丝氨酸蛋白酶活化的凝血因子Ⅺ(FⅪa)的酶原,后者在钙离子存在时,可以活化FⅪ,形成活化的凝血因子Ⅺ(FⅪa).FⅪ由肝脏和巨核细胞所产生,人体内除血浆中存在有FⅪ外,血小板中也可能含有一部分FⅪ.

遗传性蛋白C缺陷症的研究进展

蛋白C(PC)是生理性抗凝系统PC系统重要的组成部分。遗传性PC缺陷症是由编码PC基因突变引起的常染色体遗传性疾病,其分子发病机制研究近年来有较大的进展,对突变与蛋白结构和功能改变之间的关系有较明确的认识。遗传性PC缺陷可以是仅有PC基因突变也可与其他凝血因子或抗凝因子基因突变共同存在,也是静脉血栓形成的主要危险性遗传因素之一。本文就此进行综述。

获得性血友病的临床研究

获得性血友病是指因体内产生抑制因子Ⅷ作用的特异性自身抗体而引起的出血性疾病。获得性血友病最多见于老年人,其次为产后女性。常表现为严重出血,甚至危及生命。本文着重介绍引起该病的相关疾病谱,自身抗体的性质和作用机制、实验室诊断方法及临床治疗的研究进展。

氧化砷对K526细胞增殖和凋亡的作用及其机制的初步研究

目的 :研究氧化砷 (As2 O3 )对 K5 6 2细胞增殖和凋亡的作用及其机制。方法 :以细胞形态、细胞生长及活力测定 ,流式细胞仪分析细胞周期相关 DNA含量并以基因组 DNA电泳等方法观察 As2 O3 对 K5 6 2细胞的作用 ,采用 Western印迹和 Northern印迹法就其作用机制进行初步探索。结果 :在 As2 O3 作用下 K5 6 2细胞生长受抑伴随活力下降 ;基因组 DNA电泳出现“梯”状条带 ,流式细胞仪检测出“凋亡峰”。实验进一步表明 As2 O3 可降低该细胞 bcr/abl融合蛋白的含量 ,但不影响 CML 特异性 bcr/abl融合基因的 m RNA水平。结论 :As2 O3 有抑制 K5 6 2细胞增殖和诱导该细胞凋亡的作用。初步研究结果表明 ,As2 O3 导致 bcr/abl融合蛋白含量降低 。