大鼠Ⅲ度烧伤混合植皮愈合时生长因子mRNA表达的研究

目的：为了探索大面积Ⅲ度烧伤混合植皮创面愈合过程中生长因子的作用。方法：本实验以大鼠为模型，在异体皮移植后３、５、７、１４、２１和２８天以及自体皮移植后２、４、１１、１８和２５天分别取自体皮区、异体皮区皮肤，用酸性硫氰酸胍苯酚氯仿（ＡＧＰＣ）法提取总ＲＮＡ，经逆转录聚合酶链反应（ＰＴＰＣＲ），测定ＴＧＦα、ＴＧＦβ１、ＰＤＧＦ和ｂＦＧＦ的ｍＲＮＡ表达量。结果：１）这四种生长因子ｍＲＮＡ表达在自体皮区及异体皮区各时相都能被检测到，并且自体皮区表达均高于异体皮区。２）在自体皮区，ＴＧＦα的表达在２大以后持续升高，表达峰值在１８天；ＴＧＦβ１在２天就有高表达，第二峰值出现在１８天；ＰＤＧＦ在２天有较高表达，表达峰值在４天，随后逐渐下降，２５天回升：ｂＦＧＦ也在２天有很高表达，以后下降，象ＰＤＧＦ一样，２５天回升。３）在异体皮区，创面愈合早期这四种生长因子表达都较低，以后各有不同程度升高。结论：１）移植的自体皮与异体皮都存活，并反映了自体皮区的愈合再生较异体皮区旺盛。２）在自体皮区这四种生长因子通过自分泌作用，旁分泌作用，到达创伤区，沿着信号转导通路，相互协同发挥效应，促进创面愈合。３）在异体皮区存在排异反应，?

减轻烧伤创面早期进行性损害的研究

烧伤创面早期存在进行性损害过程,寻找阻断这种损害的方法极具意义,且是烧伤领域研究的重点之一。本文综合介绍近年来有关这方面的研究。

人外周血淋巴细胞褪黑素受体的基因与蛋白表达的研究

目的 :研究人外周血淋巴细胞褪黑素受体 (MR)的基因与蛋白表达的特点。方法 :分离健康成年人外周血淋巴细胞 ,采用异硫氢酸胍 -苯酚 -氯仿一步法抽提总RNA ,分别采用Northern印迹和RT -PCR方法检测MR亚型mt1和MT2 的mRNA ,并将RT -PCR的阳性产物通过自动测序仪测序 ;同时应用免疫组化染色方法检测mt1和MT2 受体亚型蛋白在淋巴细胞内的分布特点。结果 :Northern印迹方法检测出长约 1 1kbmt1mRNA ,但未检出长约 1 1kbMT2 的mRNA ;RT -PCR方法则得到了 36 8bpmt1cDNA片段 ,无 32 1bpMT2 cDNA片段 ,同时将mt1阳性条带通过胶回收、测序 ,结果显示扩增产物与人mt1受体亚型的基因序列相吻合 ;免疫组化结果显示 :人外周血淋巴细胞存在mt1受体蛋白 ,主要分布于细胞膜和细胞浆 ,呈棕褐色阳性颗粒 ,而细胞核上未见阳性颗粒 ,MT2 受体蛋白则未检出。结论 :证实正常人外周血淋巴细胞存在mt1的基因与蛋白的表达 ,而无MT2 的基因与蛋白的表达 ,提示外周血淋巴细胞为褪黑素 (Mel)作用的外周靶器官 ,为研究生理及病理情况下Mel对免疫系统的调节奠定了基础。

烧伤创面覆盖物

由于严重烧伤病人往往面临供皮区相对不足，探索和研究烧伤创面人工覆盖物已日益引起人们的关注。本文综合回顾了烧伤创面覆盖物的发展历史及其近年来的进展情况，分别叙述了各种覆盖物的优势，存在的不足，并简述了有些覆盖物在临床上的使用情况。

烧伤急性期中性粒细胞的激活

烧伤机体内的一系列介质可最先激活中性粒细胞,使之表达膜表面分子,并与内皮细胞粘附而游出血管,激发氧自由基等物质的产生和释放。但大量中性粒细胞在血管内同时激活,不但会导致机体早期抗感染能力下降,还会带来组织继发损伤,因此应设法使其活化保持在有利于机体的水平上。

L-精氨酸对糖尿病烧伤创面促愈作用的研究

目的 探讨精氨酸对糖尿病烧伤创面修复的影响及其可能的机制。 方法 SD大鼠随机分为正常对照组 (A组 )、糖尿病对照组 (B组 )、糖尿病精氨酸干预组 (C组 )和糖尿病甘氨酸对照组 (D组 )。糖尿病模型通过腹腔注射STZ建立 ,然后喂养 8周后给予深Ⅱ度烫伤 ,于伤后 0、1、3、7、14、2 1d时相点对创面愈合面积、组织形态学改变、创面组织糖含量、羟脯氨酸 (OHP)含量及局部组织释放转化生长因子 β1 (TGF β1 )含量进行检测。 结果 应用精氨酸后 ,皮肤组织糖含量降低 ,创面局部炎症反应出现较早 ,坏死组织脱落及上皮匍行提前 ,OHP含量、组织释放TGF β1 能力均增加 ,创面愈合明显加快 (P <0.0 5～ 0.0 1)。 结论 L 精氨酸可通过降低皮肤组织糖含量及增加TGF β1 的合成和释放 。

自体皮与异体皮混合移植中的层粘蛋白表达

目的 通过对大张异体皮打洞嵌植小块自体皮混合移植皮片中层粘蛋白 (L N )的表达研究 ,探讨自体皮与异体皮混合移植促进 度烫伤创面愈合的机制。方法 清洁级 SD大鼠背部脱毛后 ,造成占体表总面积10 %～ 15 %的 度烫伤。伤后 3天切痂 ,移植大张打洞的异体皮。异体皮移植后第 3天 ,嵌植小块自体皮 ,完成皮肤混合移植。在异体皮移植后 3、5、7、14和 2 1天 ,采用免疫组织化学方法测定移植皮片中 L N的表达。结果 异体皮移植后第 7天出现排异反应 ,表现为异体表皮逐渐被爬行而来的自体表皮所铲除替代 ,异体真皮表面仍可见 L N阳性表达。异体皮移植后第 14天 ,从自体皮岛迁移来的表皮细胞下有零星 L N表达 ,异体皮中的 L N仍基本保持完整。异体皮移植后第 2 1天 ,自体表皮已基本覆盖异体皮区 ,L N表达已基本完整。结论 大张异体皮打洞嵌植小块自体皮混合移植中的异体皮为创面愈合提供了基底膜成分 。

大鼠深度烫伤后局部组织中PDGF mRNA表达水平

目的：研究深度烫伤后局部组织中ＰＤＧＦｍＲＮＡ表达水平及其意义。方法：应用α－ ３２ＰｄＡＴＰ标记的ＰＤＧＦ－ ＡＡ和－ ＢＢ的ｃＤＮＡ 探针和斑点杂交测定大鼠深度烫伤后不同时相局部组织中ＰＤＧＦｍＲＮＡ的表达水平。结果：烫伤后组织中ＰＤＧＦ－ ＡＡ和－ ＢＢｍＲＮＡ的表达，较之对照组都有所升高，且在烫伤早期出现高峰，尤其是－ ＢＢｍＲＮＡ表达水平在深度烫伤后期又有持续升高，且绐终高于－ ＡＡｍＲＮＡ的表达水平。结论：ＰＤＧＦ在大鼠深度烫伤后的炎症反应和修复愈合过程中起着一定的作用。

无细胞真皮基质与自体皮复合移植愈合过程的观察

目的 :为改善植皮区外观和功能 ,并同时减轻供皮区瘢痕增生。方法 :应用自制的无细胞真皮基质与薄的刃厚自体皮复合移植应用于 2例切削痂后的烧伤创面。结果 :未发现对复合移植物的排异反应。创面愈合后 ,大体观察发现移植网状自体皮的网状形式已变得不明显 ,自体小皮片的轮廓基本消失 ,均反应了愈合过程的特殊性。光镜和电镜观察发现复合移植区基底膜清晰、连续且完整等。与对照部位相比 ,复合移植区瘢痕增生减轻 ,未见明显挛缩 ,皮肤弹性较好。结论 :至少到目前为止的观察期 (3～ 4个月 )内 。

用Ex Vi Vo法观察三种高聚物表面与血液成份间相互作用

本实验应用Ex Vi Vo法将PDMS、PTFE、和PDMS/PU三种材料与兔颈总动脉和颈总静脉形成A—V短路,观察血液流经材料表面后材料表面与血液成份间的相互作用.从扫描电镜上观察到:随着材料表面与血流接触时间的延长,血液有形成份在三种材料表面的附着趋势及附着后的变化程度不断增加,且随以下顺序即PDMS>PTFE>PDMS/PU.

哌拉西林/他唑巴坦防治烧伤感染的多中心临床试验

目的 评价哌拉西林 /他唑巴坦防治烧伤感染的疗效。 方法 选择脓毒症或烧伤总面积大于 5 0 %TBSA或Ⅲ度烧伤面积大于 30 %TBSA的脓毒症高危患者 6 3例。给药方案为 ,治疗脓毒症剂量 4 .5g ,1次 /6～ 8h ;预防性治疗剂量 4 .5g ,1次 /8h。静脉给药。脓毒症状完全消失或局部创面感染未发展成脓毒症为有效。 结果 总有效率为 90 .4 % ,控制脓毒症有效率为 75 % ,预防局部创面感染发展成脓毒症有效率为 95 .7%。治疗组和预防性治疗组细菌清除率分别为 71.4 %和5 1 4 %。 结论 在烧伤中心 ,哌拉西林 /他唑巴坦是治疗病原菌敏感的脓毒症和预防性治疗经验性用药的有效抗生素。

冬眠药物对兔烧伤后脏器的保护作用

冬眠药物对兔烧伤后脏器的保护作用许伟石，袁克俭，金小龙，杨惠忠，章雄我们通过光镜和电镜从病理形态变化观察了兔严重烧伤后在液体复苏同时应用冬眠药物对内脏的保护作用，现将结果报道如下。一、材料和方法新西兰兔，雌雄不拘，体重２．５～３ｋｇ，随机分为冬眠药物...

重组核心蛋白多糖对人正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞增殖及生物学活性的影响

目的 观察重组核心蛋白多糖 (Decorin)对人正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞体外增殖和生物学活性的影响 ,以探讨Decorin在增生性瘢痕形成和成熟中的作用。 方法 分离培养人正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞 ,分别加入不同质量浓度 (0 .0 1,0 .1,2 ,10 μg/ml)的重组Decorin ;培养 12 ,2 4 ,4 8h用二甲基噻唑二苯基四唑溴盐 (MTT)法测定细胞增殖速度 ;培养 4 8h用流式细胞仪检测细胞周期和凋亡 ;收集细胞培养上清 ,ELISA法检测TGF - β1蛋白水平 ,放射免疫方法检测Ⅰ、Ⅲ型前胶原蛋白 (PCⅠ、PCⅢ )含量。 结果 2 ,10 μg/ml的Decorin可有效抑制正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞的增殖 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,明显增加两种细胞处于G1期的百分比(P <0 .0 1) ;并抑制细胞分泌转化生长因子 (TGF) - β1和PCⅠ、PCⅢ ,下调PCⅠ /PCⅢ比值。实验组和对照组 (未加重组Decorin)均未检测到终末期凋亡细胞。 结论 Decorin可抑制正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞的增殖及其生物学活性 ,可能在预防增生性瘢痕形成和促进瘢痕成熟中起一定的作用。

大鼠Ⅲ度烫伤后异体、自体皮混合移植局部透明质酸含量的变化

目的探讨混合移植皮片中细胞外间质的变化。方法采用放射免疫方法测定了大鼠Ⅲ度烫伤后混合移植（异体皮打洞嵌植自体皮片）后３、５、７、１４、２１、２８ ｄ自体皮区和异体皮区透明质酸的含量变化。结果移植后自体皮区和异体皮区透明质酸含量变化均是先下降后上升，但自体皮区升高早于异体皮区，在移植后第１４天（嵌植第１２天）即开始显著升高，至２８ｄ仍显著高于正常对照，而异体皮区在移植后第 ２１天才显著升高，升高幅度也无自体皮区明显。结论在植皮同时适当外用透明质酸可能更有利于移植皮区的愈合和重建。

褪黑素对T淋巴细胞株免疫相关基因表达谱的作用

目的 利用基因表达谱芯片研究T淋巴细胞株 (HUT78)在褪黑素作用后免疫相关基因表达的差异性。方法 用Cy5和Cy3两种不同的荧光染料通过逆转录反应将干预组和对照组的HUT78细胞的mRNA分别标记成两种探针 ,并与载有一组靶基因的基因表达谱芯片进行杂交 ,通过扫描荧光强度 ,计算机软件分析 ,寻找经褪黑素作用后表达有差异的基因。结果 T淋巴细胞株受褪黑素作用 2 4h后 ,共筛选出 42条差异表达基因 ,其中 3 5条基因上调 ,7条基因下调。结论 褪黑素激活的人淋巴细胞 。

不同植皮手术对Ⅲ度烫伤大鼠局部细胞因子活性的影响

目的 观察烫伤大鼠经不同植皮手术后 ,植皮片中IL - 1,IL - 6,TNF的动态变化。方法 Ⅲ度烫伤大鼠经切痂后 ,分别采用单植自体皮、单植异体皮与混合植皮 3组方案。于植皮后 6小时及 1,3 ,5 ,7,10 ,14 ,2 1,2 8天检测皮瓣浸液中IL - 1,IL - 6及TNF的生物学活性。结果 单植的异皮 (als)、单植的自皮 (aus)、及混合皮瓣中的异皮 (mals)与嵌植入的自皮 (maus) 3天内均存在3种因子的早期应激变化 ,3天后变化不一。aus继早期应激后始终呈下降趋势 ,als的活性 5天后明显升高并一直维持峰值。 7天时 ,IL - 1在mals降至最低 ,maus却升至最高 ,而恰在此时mals显示IL - 6最高峰。TNF在mals与maus组几乎所有时相均表现低活性状态。 7天后mals与maus中 3种因子的活性变化几近同步。结论 ( 1)高度分泌的IL - 6在一定条件下可能诱生IL - 1ra与可溶性TNF受体 ,从而降低局部IL - 1与TNF的活性 ,减缓局部的排异反应。 ( 2 )IL - 6属Th2 细胞因子谱 ,因此Th2 细胞的激活可能导致局部免疫耐受。 ( 3 )mals与maus后期的同步变化是否提示存在嵌合体有待探讨。

不同厚度真皮组织缺损与增生性瘢痕形成的关系

目的探讨损伤后不同厚度真皮组织缺损与增生性瘢痕发生之间的关系。方法选择四肢部位供皮区共32处作为研究创面,分为刃厚皮供皮区(A组)、中厚皮供皮区(B组),再根据是否移植具有一定厚度的自体皮片,将A组分为A1组(刃厚皮不植皮组)、A2组(刃厚皮植皮组);将B组分为B1组(中厚皮不植皮组)、B2组(中厚皮植刃厚皮组)、B3组(中厚皮植中厚皮组)。留取所取皮片及移植皮片标本,计算机测量所取皮片及移植皮片的真皮厚度;术后6个月,应用温哥华瘢痕评估量表评估上述供皮区瘢痕形成及增生程度。结果A组缺损真皮厚度在0.146～0.163mm之间,B组缺损真皮厚度在0.456～0.656mm之间;随着真皮缺损的增加,愈合后瘢痕温哥华评分值也相应增加;缺失真皮的创面回植自体皮片后,其术后瘢痕评分值会相应减少,并与移植皮片厚度成反比。结论真皮组织缺损厚度与瘢痕增生的程度成正比,真皮组织的回植可减轻瘢痕增生。