11β-HSD控制糖皮质激素对睾酮合成抑制的研究——11β-HSD活性、皮质酮浓度及睾酮水平之间关系

本研究的目的是通过评价大鼠Leydig细胞中 11β 羟类固醇脱氢酶 (11β HSD)活性水平及糖皮质激素浓度对睾酮合成的影响来证实 :Leydig细胞中 11β HSD通过控制细胞内皮质酮 (大鼠体内的糖皮质激素 )的浓度决定着其对睾酮合成抑制程度。结果表明 ,切除肾上腺的大鼠其Leydig细胞中 11β HSD活性明降低 ,血清睾酮水平及Leydig细胞合成睾酮能力显著升高。经补充皮质酮后 ,原已降低的 11β HSD活性和皮质酮水平得到了恢复 ,二者恢复趋势呈正相关 ,提示 ,11β HSD活性的恢复 (上升 )是皮质酮代谢的需要 ,升高的睾酮浓度逐渐回复至正常水平。补充高浓度的糖皮质激素超过了 11β HSD发挥作用的阈值 ,导致该酶对皮质酮浓度的控制作用被破坏 ,Ley dig细胞合成睾酮能力显著下降。本研究进一步阐明了Leydig细胞中 11β

皮质酮诱导青春期大鼠睾丸间质细胞凋亡的研究

本研究目的旨在观察皮质酮能否诱导青春期大鼠睾丸间质细胞凋亡。用皮质酮分别经体内、外途径处理大鼠睾丸间质细胞。凋亡细胞经碘化丙碇 (PI)标记后用流式细胞仪检测。体外研究结果表明 ,经 1 0 0nM皮质酮处理 2 4小时后的睾丸间质细胞 ,其凋亡量 (36 .5 % )显著高于对照组 (1 2 .7%。P <0 .0 1 )。在体研究得到类似结果 ,经皮质酮 (2 .5mg/ 1 0 0 g体重 )处理 2 4小时后的大鼠 ,其纯化的睾丸间质细胞凋亡量 (2 0 .5 % )显著高于对照组(5 .0 % ,P <0 .0 1 )。上述结果提示 :皮质酮在体内、外均能诱导青春期大鼠睾丸间质细胞凋亡。这一现象可能是高糖皮质激素血症导致间质细胞中睾酮合成量减少的原因之一。

糖皮质激素对大鼠生精细胞作用的研究

本文在建立糖皮质激素作用的大鼠的体内模型基础上 ,采用TUNEL染色 ,经激光共聚焦显微镜分析、透射电镜观察等方法 ,研究糖皮质激素对大鼠生精细胞凋亡的作用。结果表明 。

大鼠内源性糖皮质激素对间质细胞功能的影响

本文旨在评价大鼠体内糖皮质激素（大鼠体内是皮质酮）对间质细胞中睾酮合成和１１－β羟类固醇脱氢酶（１１β－ＨＳＤ）活性的影响。为观察内源性皮质酮对间质细胞中睾酮合成的影响，本文测定了切除肾上腺雄性大鼠（４５天龄）血清皮质酮、睾酮，ＬＨ含量和经ＬＨ刺激的纯化间质细胞中睾酮生成量及纯化间质细胞中１１β－ＨＳＤ活性水平。结果表明，切除肾上腺后大鼠血清睾酮水平高于手术对照组及切除后补充皮质酮大鼠。切除肾上腺后大鼠和切除后补充皮质酮大鼠血清ＬＨ水平均无明显变化，表明在上述二实验组中，由于内源性皮质酮变化而导致的间质细胞中睾酮生成的变化不依赖ＬＨ的存在。切除肾上腺后大鼠其纯化的间质细胞睾酮生成量比对照组增加一倍。但经补充皮质酮后睾酮生成量被抑制到对照组水平以下，表明给切除肾上腺后大鼠补充皮质酮能明显地抑制睾酮生成。切除肾上腺后大鼠间质细胞中１１β－ＨＳＤ活性降低，并且这一降低可经补充皮质酮得到恢复。上述结果表明生理性浓度皮质酮对间质细胞中睾酮合成行使直接的负性控制，同时诱导细胞内１１β－ＨＳＤ活性，由此保护间质细胞中睾酮合成免于受到糖皮质激素的过度抑制。

大鼠间质细胞中11β-羟类固醇脱氢酶特性的研究

糖皮质激素经受体介导对间质细胞中睾酮合成行使直接的抑制作用。间质细胞中１１β－羟类固醇脱氢酶（１１β－ＨＳＤ）通过控制细胞内糖皮质激素浓度调节睾酮合成。至今，已鉴定了两种１１β－ＨＳＤ同工酶，Ⅰ型从肝脏中纯化，是以ＮＡＤＰ（Ｈ）为辅酶的氧化还原酶。从肾脏纯化的Ⅱ型，是依赖ＮＡＤ的氧化酶。有关间质细胞中１１β－ＨＳＤ的研究，尤其对其特性的研究尚不深入。本研究通过测定间质细胞中Ⅰ型１１β－ＨＳＤ抗原及其ｍＲＮＡ表达，观察间质细胞中该酶的优势辅酶，纯化的活间质细胞中１１β－ＨＳＤ催化反应类型及间质细胞１１β－ＨＳＤ对糖皮质激素调节的反应等几个方面来评价间质细胞中１１β－ＨＳＤ的特性。结果发现，间质细胞显示Ⅰ型１１β－ＨＳＤ抗原及其ｍＲＮＡ的表达（ＲＴ－ＰＣＲ产物，６９６ｂｐ），未见有Ⅱ型ｍＲＮＡ表达。间质细胞中该酶是以ＮＡＤＰ（Ｈ）为优势辅酶（Ｐ＜０．０５），以氧化反应为优势的氧化还原酶（Ｐ＜０．０５）。切除肾上腺后大鼠其纯化的活间质细胞及培养的间质细胞１１β－ＨＳＤ氧化酶活性受糖皮质激素调节（Ｐ＜０．０５）。本研究表明，大鼠间质细胞中１１β－ＨＳＤ是一个以催化氧化反应为优势，以ＮＡＤＰ（Ｈ）为辅酶的Ⅰ型同工酶，?

大鼠间质细胞中11β-羟类固醇脱氢酶mRNA的表达

间质细胞中１１β－羟类固醇脱氢酶（１１β－ＨＳＤ）通过控制细胞内糖皮质激素（大鼠体内是皮质酮）浓度调节睾酮合成。大鼠出生后２６天内，其未成熟间质细胞不含１１β－ＨＳＤ，随着间质细胞成熟，１１β－ＨＳＤ逐渐产生，成年大鼠间质细胞中１１β－ＨＳＤ活性最高。１１β－ＨＳＤ控制着间质细胞中糖皮质激素浓度，生理浓度糖皮质激素同样调节着１１β－ＨＳＤ活性水平。本研究观察了三个不同年龄组大鼠和切除肾上腺后及切除后补充皮质酮大鼠，间质细胞中１１β－ＨＳＤｍＲＮＡ表达情况，发现：出生２１天大鼠间质细胞中无１１β－ＨＳＤｍＲＮＡ的表达，４５天大鼠有１１β－ＨＳＤｍＲＮＡ表达，９０天大鼠表达量最大，切除肾上腺后大鼠间质细胞中１１β－ＨＳＤｍＲＮＡ表达降低，切除后经皮质酮补充大鼠１１β－ＨＳＤｍＲＮＡ表达量回复到对照组水平。结果表明三个不同年龄组大鼠间质细胞中１１β－ＨＳＤｍＲＮＡ表达情况和以往采用免疫组织化学及生物化学方法测定抗原含量或酶活性的结果是一致的。