人胎胰腺巢蛋白阳性细胞的分离培养及其生物学特性研究

胰腺巢蛋白(nestin)阳性细胞是近年发现的与胰腺发育密切相关的一种多能干细胞。我们对人胎胰腺中的nestin^+细胞进行了分离和体外培养,并对其生物学特性进行了研究结果表明:(1)胎胰nestin^+细胞表达高水平ABCG2/BCRP1,并在形态和生长方式上均不同于导管上皮细胞;(2)Nestin^+细胞在体外可自发形成类胰岛细胞团(ICC,islet-likc cell clusters);(3)ICC中的nestin^+细胞具有多向分化潜能,可表达多种细胞特异抗原,经体外诱导可产生少量胰岛素阳性的类β细胞。

创伤愈合的细胞生物学研究进展

以皮肤创伤愈合为主 ,从创伤愈合各阶段中多种细胞的生物学特性变化角度 。

基因芯片在细菌基因组学和细胞微生物学研究中的应用

利用基因芯片可以鉴定病原菌在不同宿主微环境中受到差异调节的基因、直接或间接由转录因子控制的基因,以及编码多步骤代谢和生物合成途径中各种组分的基因;通过比较基因组学研究,评价相关菌种和菌株的自然群体内遗传多样性的范围和特性,并在ORF水平描述病原体和共生体之间的差异;同时也可进行感染组织细胞基因表达分析,研究病原体和宿主之间复杂的相互作用关系。

酵母双杂交系统在病原生物学研究中的应用

酵母双杂交系统作为一种新型的研究蛋白质之间相互作用的方法是功能基因组学和蛋白质组学中一种重要的手段,其在病原生物学的后基因组研究中也日益广泛和深入.本文将从病原体与宿主蛋白之间相互作用、病原体内蛋白之间相互作用以及病原体蛋白自身相互作用等三方面作一综述.

严重急性呼吸综合征冠状病毒的分子生物学研究进展

引起严重急性呼吸综合征的冠状病毒是一种新型正股单链RNA病毒,长度约30kb。不同的流行毒株间,只存在点突变。病毒基因组中,存在着调控病毒转录、包装的关键序列。病毒编码的膜蛋白质(S、M、E)以及病毒内部的N蛋白和复制酶、蛋白酶,对于病毒进入宿主、复制、包装、病理等过程起看重要作用,因而成为重点研究对象。本文综述了该病毒分子生物学、生物信息学研究的进展。

病原微生物蛋白质组研究

随着蛋白质组研究技术的发展 ,微生物蛋白质组学研究进展很快。本文从病原菌遗传变异、致病机理。

微生物基因组研究进展

微生物基因组研究近年来发展很快,借助基因测序技术已完成多种微生物基因组测序。原核细胞生物基因组与真核细胞基因组具有各自特点。许多由基因控制的细菌遗传性状与细菌毒力有关,选择合适的靶基因研究可用于发展疫苗和开发新的诊断工具。同时,加快基因组功能性研究迫在眉睫。

微生物基因组与药靶研究

微生物基因组研究及其相关的技术平台发展迅速,为发现新的药靶和研制新型抗微生物药物提供了有利条件.除了毒力因子、保守基因外,其他一些分子也可成为潜在的药靶.基因功能研究为发现潜在的药靶提供了可能,也是药靶研究中的主要难点之一.现在已有了对候选药靶进行识别和有效性评估的系统,但还有待于进一步完善.

钩体LPS生物合成与装配途径及相关基因分析

目的 预测问号钩体黄疸出血型赖株脂多糖 (LPS)合成、装配途径 ,并对其中几个关键基因的特征进行深入分析。方法 使用NCBI/BlastX ,ProDom/Blast ,Jpred2 ,TMHMM对问号钩体黄疸出血型赖株全基因组ORF基因所编码蛋白进行在线分析 ,并使用Bioedit,PepTool软件进行蛋白质一、二级结构分析。 结果 确定了脂质A和核心多糖生物合成基因lpxA、lpxB、lpxC、lpxD、lpxK、kdsA、kdsB、kdtA、lnt、htrB和O -抗原生物合成基因簇rfblocus等以及装配、跨膜转运中的基因rf bP、rfbX、rfc、rfaL、rfe绘制了LPS合成及装配途径示意图。并对合成和装配途径中几个关键的基因编码蛋白 (LpxA、Rfc、RfbX、RfaL)的二级结构、跨膜区域、结构域等进行了分析。结论 问号钩体黄疸出血型赖株LPS合成、装配途径与典型的革兰阴性菌 ,如大肠埃希菌K - 12相似 ,主要差异在于钩体特殊的脂肪酸代谢途径和O -抗原多糖结构。该研究为进一步探讨钩体LPS基因功能及其与致病性关系奠定基础。

微生物蛋白质组研究进展

本文概括性地叙述蛋白质组相关的基本概念,主要蛋白质组技术,微生物学蛋白质组、比较蛋白质组、功能蛋白质组研究进展和蛋白质组技术在细胞微生物学研究中的应用。

活性氧:从毒性分子到信号分子——活性氧与细胞的增殖、分化和凋亡及其信号转导途径

活性氧(reactive oxygen species,ROS)是生物体有氧代谢产生的一类活性含氧化合物的总称,主要包括O2·-、H2O2、·OH等,机体细胞通过多种途径维持ROS产生与消解的动态平衡。近年的研究揭示ROS参与细胞正常的生理过程,与细胞的增殖、分化及凋亡密切相关。不同刺激诱导细胞产生的内源性ROS可作为第二信使,通过改变氧化还原状态调节增殖、分化和凋亡相关的信号转导通路中多种靶分子的活性,最终决定细胞的命运。

猪粪经蝇蛆生态处理后粪臭素和排污量的变化

观察家蝇幼虫 (蝇蛆 )生态处理猪粪后 ,猪粪中粪臭素和排污量的变化。以养猪场的猪粪为试验材料 ,经当地蝇蛆处理的猪粪作为处理组 ,未经蝇蛆处理的猪粪为对照组 ,测定两组猪粪样本中粪臭素 ( 3 -甲基吲哚 ,简称 3 -MI)、CODCr、BOD5和 NH3-N的质量浓度。经蝇蛆处理后每 kg猪粪中的 3 -MI、CODCr、BOD5和 NH3-N分别为 2 .76× 10 - 3、5 6.3 6、14 .84和 3 .41g;对照组中上述物质分别为 3 8.5 8× 10 - 3、12 3 .0 1、60 .0 7和 3 .64 g。经蝇蛆处理后的猪粪中的 3 -MI、CODCr和 BOD5分别减少了 92 .8%、5 4.2 %和75 .3 %;而 NH3-N的含量仅减少 6.3 %。蝇蛆生态处理猪粪可有效减少粪臭素和有机污染物 。

家蝇幼虫处理猪粪的效果研究

目的 观察家蝇幼虫 (蝇蛆 )处理猪粪的效果和猪粪中粪臭素和排污量的变化。方法 随机挑选约 40 0 0只蛹孵化成蝇 ,取产卵高峰期所产的卵 ,置于猪粪内孵化饲养 ,1周后计算出得蛆量、剩余粪量和处理前后粪内大肠菌群数的变化 ,并检测两组猪粪样本中粪臭素 (3 甲基吲哚 ,3 MI)、化学需氧量 (COD)、生化需氧量 (BOD5)和氨氮 (NH3 N )的含量。结果 平均得蛆量为粪量的 10 .49%～ 11.3 4% ,粪量平均减少到处理前粪量的 5 3 .73 %～ 5 4.83 % ;每克粪大肠菌群数减少 99.96%。经蝇蛆处理后猪粪中的 3 MI、COD和BOD5分别减少 92 .80 %、5 4.17%和 75 .3 0 % ,有显著性变化(P <0 .0 1) ;NH3 N的含量仅减少 6.3 0 % ,无明显变化 (P >0 .0 5 )。结论 家蝇蛆生态处理猪粪 ,可减少粪的排放量和粪中的大肠埃希菌 ,也可有效地减少粪臭素和有机污染 ,有利于改善环境。

江浙沪和哈尔滨地区汉族D17S30位点的多态性分布

Ｄ１７Ｓ３０是位于人类染色体１７ｐ１３．３、以７０ｂｐ为重复单位的、具有高度多态性的ＶＮＴＲ位点。本文采用作者报道的微量快速Ａｍｐ－ＦＬＰ分型技术，对１００名哈尔滨市北方汉族人和１１０名江浙沪南方汉族人作了Ｄ１７Ｓ３０位点分型，发现在北方汉族与江浙沪南方汉族之间等位基因频率分布并无显著差异，但可见Ａ１和Ａ７基因频率北高南低，Ａ４基因频率则为南高北低，提示存在南北汉族之间的分化。Ｄ１７Ｓ３０位点南北方汉族观察杂合性均为０．８８，个体鉴别力均为０．９７，多态性信息含量均为０．８６。本文结果提示，采用微量快速Ａｍｐ－ＦＬＰ分型技术分析Ｄ１７Ｓ３０位点多态性，具有较高的灵敏度与准确性，可在我国作为一种高效的遗传标记应用于民族演变、法医学个体指认与亲子鉴定、遗传病基因连锁分析等研究领域。

钩端螺旋体赖株豚鼠感染模型的建立和免疫组化法对钩体抗原的检测

目的 建立钩端螺旋体赖型赖株感染豚鼠的动物模型 ,并用免疫组化法检测钩端螺旋体抗原在组织中的分布。方法 不同剂量钩端螺旋体赖株通过腹腔内注射感染豚鼠 ,观察豚鼠发病情况 ,及时解剖死亡豚鼠 ,HE染色观察肝、肾、肺等器官病变 ,EnVision二步法染色检测肝、肾、肺组织中钩体抗原。结果 感染后豚鼠发病 ,死亡与感染的钩端螺旋体剂量明显相关 ,大体标本及HE染色光镜下均出现典型钩体病病变。免疫组化显示在肝、肾、肺组织中均存在钩体抗原。结论 通过钩端螺旋体赖株腹腔注射的方法成功地建立了豚鼠动物模型。应用EnVision二步法染色 ,可有效显示组织中的钩体抗原。为进一步研究钩端螺旋体发病机制奠定了基础。

20例藏族人mtDNA多态性的研究

本文通过对20例藏族产妇胎盘线粒体DNA(mtDNA)限制性类型的分析,发现藏族mtDNA是高度多态的,其每个核苷酸位点的平均替换率为0.035,比世界上迄今所报道的值都大。

氧化酚砷对血液肿瘤细胞系的体外效应

目的：了解氧化酚砷（Ｐｈｅｎｙｌａｒｓｉｎｅ ｏｘｉｄｅ， ＰＡＯ）对血液肿瘤细胞系的影响。方法： ８种血液肿瘤系经０．０１μｍｏｌ／Ｌ、０.０５μｍｏｌ／Ｌ和０．１μｍｏｌ／Ｌ的ＰＡＯ处理达一定时间后，经台盼蓝排除法计数细胞活力和应用流式细胞仪检测细胞ＤＮＡ含量分布。结果和结论：在生长抑制和诱导凋亡方面，ＰＡＯ对血液肿瘤细胞的效应谱相对较广，０．０５μｍｏｌ／Ｌ和０．１μｍｏｌ／Ｌ的ＰＡＯ能抑制某些血液肿瘤细胞的生长，并诱导其凋亡。但是，不同来源的血液肿瘤细胞系对ＰＡＯ的敏感性不完全相同。

日本血吸虫Sjp50重组蛋白用于免疫诊断的研究

目的 克隆和表达日本血吸虫免疫素 Sjp5 0的编码基因 ,初步研究其免疫反应性。方法 根据 EST测序的结果设计引物 ,从含有免疫素基因片段的克隆中扩增得到该编码基因 ,亚克隆入原核表达载体 p GEX4 T- 1中表达 ,然后用 EL ISA方法初步检测重组蛋白的免疫反应性。结果 成功克隆和表达了日本血吸虫 Sjp5 0基因。该重组蛋白用于血吸虫抗体的 EL ISA检测 ,在动物实验中检测特异性和敏感性分别为 94 .12 %和 76 .6 7% ,非治疗组兔体内的抗体在感染后 9- 11周上升到高水平 ,并在感染后 2 1周仍维持在高水平 ,而治疗组兔血清中抗 Sj Fp5 0抗体水平在治疗后 11周迅速下降至感染前抗体水平。用于血吸虫病人血清中的抗体检测的特异性为 98.30 % ,急性病人和慢性病人检测的敏感性分别为 95 .2 0 %和 6 3.2 0 %。结论 获得了 Sjp5 0的重组蛋白 ,该蛋白能被日本血吸虫病人的血清所识别 ,且在动物实验中其抗体水平在药物治疗后 11周降至感染前的水平 ,具有诊断现症感染病人和疗效考核的潜能。

树突状细胞在狼疮性肾炎肾组织中的分布及其临床意义

经肾活检和临床资料确诊的LN患者 5 3例 ,采用免疫荧光双标记染色与低照度荧光图像分析检测方法 ,观察到LN患者肾组织中树突状细胞分布的面积、数量及密度均明显增多。树突状细胞主要分布于肾小管间质和肾血管 ,而肾小球基本未见分布。此外 ,树突状细胞在肾小管间质分布程度与肾小管间质病变程度及肾功能呈正相关。提示树突状细胞可能参与了狼疮性肾炎的发病机制 。