血透生物相容性系列研究——细胞因子和粘附分子在血透时变化及相关因素分析

血透生物相容性与血透并发症密切相关,并直接影响患者的存活率和生活质量.研究提示,血透相关的一系列变化可能与激活单核细胞释放细胞因子、影响白细胞粘附分子表达,引起与粘附功能相关的白细胞功能异常有关.本项目自90年代初在国内率先、在国际上也以领先步伐采用多聚酶联反应、细胞原位杂交技术、酶联免疫吸附试验及流式细胞仪分析方法等技术,全面系统地研究血透时不同透析膜初用、复用及不同透析时相IL-1β、TNF-α与IL-6在外周血单个核细胞中的基因表达与血浆游离水平的变化,粒细胞和单核细胞表面粘附分子CD11b、CD45和L-selectin的表达,以及血透对白细胞粘附功能的调节,评价、比较透析膜,并对复用的影响进行研究,进一步探讨透析的生物相容性,为阐述血透生物相容性和相关并发症的发生机理提供科学的理论基础.

血透生物相容性系列研究—细胞因子和粘附分子在血透时变化及相关因素分析

血透生物相容性研究是血透研究的热点,它与血透并发症密切相关,并直接影响患者的存活率和生活质量.

微波热调节肢体慢性淋巴水肿免疫紊乱的实验研究

对２０例肢体慢性淋巴水肿患者，在烘绑治疗前后，取外周血，用直接荧光标记单克隆抗体染色技术和流式细胞仪法检测Ｔ细胞亚群和ＨＬＡ－ＤＲ表型变化，并与正常健康人对照，结果表明：肢体慢性淋巴水肿患者外周血ＣＤ＿４明显下降，ＣＤ４／ＣＤ＿８比值明显下降（Ｐ＜０．０１），ＨＬＡ－ＤＲ水平增高。患者经微波烘疗两疗程后，ＣＤ＿４／ＣＤ＿８比值明显提高，ＣＤ＿４明显增高，ＨＬＡ－ＤＲ和ＣＤ＿８ＨＬＡ－ＤＲ明显下降。提示微波对肢体慢性淋巴水肿除热作用外，有明显的免疫调节生物效应。

半导体激光血管内照射对人体外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞的调节作用

本文报道了半导体激光血管内照射对人体外周血Ｔ淋巴细胞亚群及ＮＫ细胞的免疫调节作用。实验结果提示：在２３例经６５０ｎｍ．５ｍＷ的半导体激光血管内照射治疗一次，五次和十次的患者中，ＣＤ＋３细胞亚群的百分比与照射前（６３．６６％）比较，分别提高到６５．８６％，６９．９４％，７５．０４％。ＣＤ＋４Ｔ辅助细胞在第十次治疗后也有所增加。除此之外，半导体激光血管内照射对ＮＫ细胞比例及ＣＤ＋４／ＣＤ＋８比值具有双向调控作用，即偏离（即高于或低于）正常值的患者经照射后恢复到正常水平。这种双向调控作用将对临床治疗更有指导意义。

国产房间隔缺损堵塞装置内皮化的实验研究

目的 评价国产房间隔缺损(ASD)堵塞装置的内皮化。方法 选用乳猪6头(平均体重7.5kg),利用穿刺针和Rashkind球囊房隔造口术,建立大小不等ASD动物模型;选择适当大小的国产ASD堵塞装置进行封堵;术后1、3和6个月分别将小猪处死(每次2只),取堵塞装置行扫描电镜检查。结果 术后1个月,装置表面被胶原纤维所覆盖,装置边缘见散在内皮细胞;术后3个月,装置表面大部分被内皮细胞所覆盖,伞尖表面光滑,无内皮细胞覆盖;术后6个月,装置表面完全被内皮细胞所覆盖,伞尖表面光滑并有内皮细胞上爬。结论 国产ASD堵塞装置置入动物体内3个月已大部分内皮化,6个月时已完全内皮化。

流式细胞术检测细胞内细胞因子方法的建立

目的建立流式细胞术检测细胞内细胞因子的方法。方法运用荧光标记的抗细胞表面抗原单抗及抗细胞因子单抗，结合固定、破膜处理技术，检测产生ＩＦＮ－γ、ＩＬ－４的ＣＤ４＋、ＣＤ8＋细胞以及产生IＬ－１０的ＣＤ３＋细胞。同时以相应同种型ＩｇＧ染色细胞作为阴性对照，以确定细胞团于染色的特异性。结果产生ＩＦＮ－γ的ＣＤ４＋及ＣＤ８＋细胞明显多于产生ＩＬ－４的细胞，并且产生ＩＦＮ－γ的ＣＤ８＋细胞百分比较ＣＤ４＋细胞相对增多；同时产生ＩＦＮ－γ／ＩＬ－４的ＣＤ４＋、ＣＤ８＋细胞以及产生ＩＬ－１０的ＣＤ３＋细胞都较少。结论该方法可从单个细胞水平直接检测全血标本中Ｔ细胞亚群和单核细胞等细胞因子的分泌。

外源性谷氨酸致新生鼠脑兴奋毒性神经变性的形态学研究

目的 :探讨外源性谷氨酸对新生鼠脑细胞的兴奋毒性作用。方法 :新生 7天SD大鼠 ,背部皮下注射单钠谷氨酸 (MSG) 2mg/ g ,在 2h、6～ 8h、2 4～ 2 8h分别光镜和电镜观察脑细胞的形态改变。结果 :光镜下 ,2h未见明显异常 ,此后可见多处脑细胞肿胀 ,进而细胞固缩。电镜着重观察海马神经元 ,变化一为神经元胞体和树突巨大膨胀 ,伴随着内质网膜的空泡化及线粒体由最早期的浓缩到巨大膨胀 ,轴突基本正常 ,核染色质由簇状集聚于核膜下呈钟面排列到向中央积聚成轮廓不规则的团块 ;变化二为胞浆和胞核均浓缩 ,胞奖中有大小不等的空泡。结论 :外源性谷氨酸能引起未成熟脑细胞的死亡 ,为某些食品添加剂对儿童脑细胞的影响的相关研究提供一定的形态学基础。

细胞粘附分子研究的某些进展

细胞粘附分子研究的某些进展周同，宋长玲（上海第二医科大学附属瑞金医院上海２０００２５）汤雪明（上海第二医科大学生物物理教研室上海２０００２５）研究证实，细胞与细胞、细胞与细胞外基质（Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘ；ＥＣＭ）间粘附及相互作用是机...

腰椎椎管的动态三维图形重建及测量

本文研究了腰椎椎管ＣＴ图像的三维重建和动态显示，为脊柱生物力学的研究提供了一种全新的研究手段。应用轮廓重建方式对人体完整腰椎进行三维重建，重建的图形可进行空间任意的旋转、切割和投影变换，实现动态显示，精确地展示出腰椎椎管的三维空间结构和形态。在腰椎三维图形重建的基础上，应用图形处理技术对椎管有效截面积进行运动变化后的测量，获得有效截面积百分比。研究结果证明椎管有效截面积的动态变化与腰椎疾病临床症状和治疗效果有关。腰椎椎管ＣＴ图像三维重建的方法可推广到其他领域。

半导体激光(650nm,5mW)血管内照射对人外周血淋巴细胞凋亡的影响

本文报道了用半导体激光进行血管内照射（ＩＬＩＢ）对十三例患者外周血淋巴细胞凋亡的影响。发现照射前ＰＣＤ为５．４７±３．６５％，第一次照射后为７．１±３．１６％，第五次照射后为１６．７１±９．５％。二者均有非常显著性差异（ｐ＜０．０１）。

血管内照射（He－Ne）对患者外周血淋巴细胞中凋亡细胞（PCD）的影响

本文报道了用氦氖激光血管内照射（ＩＬＩＢ）治疗九例患者过程中，应用流式细胞仪检测外周血淋巴细胞中凋亡细胞的发生，结果提示，照射后凋亡细胞百分率为（６．４３±５．０７％）与照射前比较（０．３８±０．５３％），ｐ＜０．０５。

氦氖激光对离体小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

为探索低功率激光照射治疗的机理，本实验用氦氖激光（功率１０．２ｍＷ）照射离体小白鼠腹腔巨噬细胞观察其吞噬鸡红细胞的功能。当照射１５分钟时（光剂量１．１４Ｊ／ｃｍ２），巨噬细胞吞噬功能达最大值，以后开始下降，照射至４０分钟时（光剂量３．０４Ｊ／ｃｍ２），巨噬细胞吞噬功能下降至对照组以下，出现抑制现象。

内分泌细胞溶酶体的超微结构研究

用电镜细胞化学方法研究内分泌细胞溶酶体的结构与功能。研究结果表明,所有内分泌细胞都存在丰富的溶酶体,分泌自噬作用普遍存在于分泌肽类激素的细胞中,自体吞噬活动活跃是分泌类固醇激素细胞的重要特点。溶酶体通过分泌自噬和自体吞噬分别在两类内分泌细胞中参与激素分泌的调节。

大鼠溶脲脲原体感染与曲细精管微结石形成

４０例ＳＤ雄性大鼠膀胱内接种溶脲脲原体（Ｕｒｅａｐｌａｓｍａｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ，Ｕ．Ｕ，１０５ＣＣＵ／ｍｌ）。从２５例接种动物的睾丸组织中培养出Ｕ．Ｕ。聚合酶链式反应（ＰＣＲ）扩增得到Ｕ．Ｕ．特异性ＤＮＡ片段（４６０ｂＰ）。４０例接种动物中，有１６例检出膀胱结石，化学分析表明，结石成份为磷酸镁铵（ＭｇＮＨ４ＰＯ４·６Ｈ２Ｏ），矿物学名称为鸟粪石（Ｓｔｒｕｖｉｔｅ）。光镜与电镜观察发现，其中有４例动物的睾丸多数曲细精管管腔内有微结石存在。有微结石处呈现生精细胞与支持细胞脱落或消失，有的曲细精管仅剩下界膜。睾丸间质中未发现结石形成。３０例对照组大鼠睾丸内未检出Ｕ．Ｕ，也未发现膀胱、睾丸内结石形成。提示Ｕ．Ｕ．可导致曲细精管微结石形成并干扰精子发生，因而是造成男性不育的因素之一。

三叉神经痛及其术后复发的病理学基础研究

目的 观察正常对照组和三叉神经痛组及下牙槽神经离断后的颏神经超微结构变化 ,探寻三叉神经痛及其术后复发的形态学基础。方法 对 8例颏神经进行电镜观察 ,其中 2例为正常对照 ,6例为罹患三叉神经痛 (Ⅲ )患者。结果 三叉神经痛患者标本中脱髓鞘变严重 ,无髓鞘神经纤维数量减少 ,下牙槽神经离断后 ,颏神经束中仍可见少量神经纤维呈“簇”状分布。结论 脱髓鞘变及无髓鞘神经纤维的减少可能是三叉神经痛的病理学基础 。

白血病电镜诊断学的建立及应用

电镜诊断学是指对临床某些疑难病例，应用综合电镜技术，列出标本制备常规流程，确定诊断指标及鉴别诊断指标，在超微结构水平上作出明确诊断的一门新兴应用方法学。我们自７０年代初开始，对白血病进行了系列的电镜观察，建立了适用于白血病诊断的综合电镜技术，确定了可靠的诊断指标。经１０００多例次的电镜诊断和临床疗效验证，其确诊率由原来用光镜分类的６０～７０％（按ＦＡＢ分类）提高到９９％以上。该方法学主要内容包括：白血病超微结构形态分类、酶细胞化学诊断、免疫细胞化学分型诊断、电镜标本制作常规流程。

溶酶体在垂体—肾上腺皮质激素分泌调节中的作用

本实验用地塞米松造成大鼠垂体促皮质激素细胞及其靶腺肾上腺皮质束状带细胞分泌抑制,对这两种细胞中的溶酶体及分泌自噬和自体吞噬活动进行了超微结构观察、CMP 酶细胞化学定性和形态计量。实验结果显示,在分泌受抑制状态下,垂体促皮质激素细胞中分泌自噬和自体吞噬作用加强,与此同时,肾上腺皮质细胞中自体吞噬作用也业著加强。这些结果表明,在分泌类固醇激素的细胞中,溶酶体以自体吞噬的方式清除一部分生产激素的细胞器,可能是一种普遍存在的分泌调节机制,正如在分泌蛋白质和肽类激素的细胞中普遍存在着分泌自噬这一调节机制一样。

儿茶酚胺致心肌损伤的实验病理研究

大鼠尾静脉滴去甲肾上腺素（20μg／kg／min）后，分别于即刻、7天、30～90天杀死取材，用病理组织学、肌红蛋白免疫组化染色及透射电镜观察心肌损伤。结果：早期可见心肌多灶性坏死、肌红蛋白缺染、肌原纤维断裂溶解，似冠状动脉无阻塞性心肌梗死；中后期可见心肌灶性萎缩及疤痕形成、成纤维细胞增生活跃、新生胶元原纤维伸入坏死心肌内，类似早期心肌病图象。

肥大心肌细胞溶酶体对线粒体降解作用的细胞化学研究

用细胞化学胞嘧啶单核苷酸酶（ＣＭＰ酶）作为溶酶体标志物，来研究大鼠腹主动脉结扎造成心肌细胞肥大后溶酶体降解线粒体过程。研究结果表明在结扎后２０周线粒体主要降解方式是线粒体直体和溶酶接融合，然后线粒体逐渐降解，而线粒体的自噬小体形成是非常少见的。

肥大心肌细胞自体吞噬泡的细胞化学及形态定量研究

用胞嘧啶单核苷酸酶（ＣＭＰ酶）作为溶酶体标志物和视频图像数字分析仪观察大鼠腹主动脉结扎后４周、１０周的肥大心肌细胞的自体吞噬泡变化。实验发现：①自体吞噬泡内有ＣＭＰ酶反应产物出现；②在１０周组，单位面积（２４．７７μｍ￣２）胞质内ＣＭＰ酶反应产物面积和Ｔ管面积明显大于对照组及４周组；③在１０周组最明显特征是细胞降解产物排到扩张Ｔ管。这些结果说明，细胞成份的自体吞噬降解在心肌肥大过程中起着重要调节作用，扩张的Ｔ管也反映了心肌细胞外吐加快的适应性改变。