胃和结肠癌组织中u－PA受体表达的病理意义

用尿型纤溶酶原活化素（ｕ－ＰＡ）单抗（ＭｏＡｂ），以抗配体抗体ＬｓＡＢ免疫组化法，检测了３５例胃癌和１９例结肠癌组织中尿型纤溶酶原活化素受体（ｕ－ＰＡＲ）。结果表明，胃和结肠癌组织中ｕ－ＰＡＲ阳性表达率分别为２８．５７％和３６．８４％，两者间无明显差异（Ｐ＞０．０５）。浸润型肿瘤组织的ｕ－ＰＭ阳性表达率显著高于膨胀型（Ｐ＜０．０５），且ｕ－ＰＡＲ阳性表达多见于癌组织中散在的肿瘤细胞表面，成团或巢状生长的肿瘤细胞表面表达则较少。同时检测同一组织标本癌基因蛋白Ｃ－ｅｒｂＢ－２，经图像分析ｕ－ＰＡＲ和Ｃ－ｅｒｂＢ－２表达间具有显著相关性（ｒ＝０．８０２８，Ｐ＜０．０５）。提示ｕ－ＰＡＲ阳性表达与肿瘤细胞浸润能力增强有关。

β-血小板球蛋白对小牛主动脉内皮细胞的LDL受体活性的抑制作用的初步研究

本文首次报告了β-血小板球蛋白(β-TG)能明显抑制小牛主动脉内皮细胞的LDL受体活性,但不影响该受体的生成。初步分析提示β-TG的这种抑制作用可能不完全是由于β-TG和^(125)I-LDL之间存在的竞争性抑制作用所致。此外,对于β-TG的这种抑制作用在动脉粥样硬化形成中的意义进行了讨论。

三种凝血指标在妊娠期及妊高征的变化

测定VWF:Ag,Fn及AT-Ⅲ在不同孕期及妊高征妇女血清中变化,共95例,正常对照120例。各组测定结果与对照组相比,早孕期VWF:Ag,Fn,AT-Ⅲ与非孕妇女相比无显著变化;VWF:Ag自中孕开始升高,晚孕及妊高征更显著;Fn自晚孕开始升高,妊高征更明显;AT-Ⅲ变化则不恒定。

恶性肿瘤患者红细胞膜带3蛋白表达及其对K562细胞生长的影响

背景与目的:带3蛋白介导Cl-/H CO3-的跨膜交换,从而调节细胞内pH值。有学者证实,Cl-/H CO3-交换的异常可引起细胞内pH值明显改变,使细胞发生增殖或凋亡。本研究旨在探讨红细胞膜带3蛋白的表达及其对K562细胞生长的影响。方法:以SPQ为荧光探针测定8例恶性肿瘤患者红细胞膜带3蛋白的阴离子转运活性,W estern blot检测带3蛋白表达。转染带3蛋白膜段结构域cDNA至K562细胞,观察带3蛋白膜段结构域表达后对K562细胞阴离子转运活性及细胞增殖的影响。结果:7例恶性肿瘤患者红细胞膜带3蛋白的离子转运活性明显增强,5例蛋白质表达增强。同时发现带3蛋白膜段结构域表达于K562细胞膜后,对K562细胞生长有一定促进作用。结论:带3蛋白在部分恶性肿瘤患者红细胞膜表达增强,可作为恶性肿瘤的一种潜在标志物。

蒲黄、蒲黄制剂对高胆固醇血症和巨噬细胞功能影响的研究

比较三种蒲黄制剂防治大白鼠高胆固醉血症的作用,结果蒲黄花粉的作用最为明显;蒲黄对高脂引起的肝脏损害无保护作用;食饵性高胆固醇血症的家兔,停饲高脂饲料后,血胆固醇下降缓慢,而加用蒲黄,则血脂迅速下降,蒲黄的这一作用可能与增强单核-巨噬细胞功能有关。

山茛菪碱对高脂饲猪冠状动脉内皮细胞的影响

采用高脂饲喂中国实验用小型猪模型，观察乙酰胆碱（Ach）拮抗剂山茛菪碱（654－2）对培养冠状动脉内皮细胞（EC）代谢、增生、血小板生长因子（PDGF）基因表达的影响，探讨ACh在冠状动脉粥样硬化发病机制中的作用。结果发现：1．654－2可明显减缓EC的生长、传代；2．654－2使EC的PDGF－A、B链基因表达降低；3.654－2增加EC的NO和还原型谷胱甘肽GSH水平、减少过氧化脂质（LPO）产生。

放疗对恶性肿瘤患者红细胞膜带3蛋白表达和功能的影响

[目的]研究放疗对恶性肿瘤患者红细胞膜带3蛋白的表达和功能的影响。[方法]随机抽取8例恶性肿瘤患者并取其治疗前后的红细胞,应用Clˉ荧光探针6-甲基-3-磺丙基-1-喹啉-水化合物(SPQ)检测其治疗前后红细胞膜带3蛋白的阴离子转运活性,并通过Westernblot检定治疗前后带3蛋白表达量的变化。[结果]8例恶性肿瘤患者放疗后红细胞膜带3蛋白的离子转运活性均明显减弱,其中6例患者红细胞膜带3蛋白表达减少。[结论]带3蛋白的表达和功能与肿瘤细胞的增殖和凋亡相关。

t－pA ELISA测定方法的建立和应用

本文建立了测定血浆组织型纤溶酶原活化素（ｔ－ＰＡ）抗原的ＥＬＩＳＡ法，分析以该法测定ｔ－ＰＡ的最小可测浓度、回收率、稳定性和特异性，还与市售同类试剂盒同时测定的３５份血浆ｔ－ＰＡ浓度作比较。结果：测定１１１名中青年正常人的血浆ｔ－ＰＡ，均值为４．０８±２．５９μｇ／Ｌ，１３名高龄正常人平均为１７．６３±８．１５μｇ／Ｌ，明显增高（Ｐ＜０．００１）。正常人一日内血浆ｔ－ＰＡ以上午８时较高，下午４时较低；静脉阻断试验后ｔ－ＰＡ水平可明显增高（Ｐ＜０．００１）。另外，测定了９３名包括肾疾患、高血压、冠心病、急性心肌梗塞和脑梗塞以及深静脉血栓形成患者的血浆ｔ－ＰＡ，对测定结果作了分析和讨论。

血浆制备法对βTG、PF4测定的影响

减少采血和制备血浆过程中血小板活化程度是准确测定体内βTG和PF4血浆水平的二个关键环节。与传统的双注射器法采血,以4℃3000r/min离心30分钟制备血浆的方法作比较,本研究证明以负压抗凝管取血,4℃1500r/min、15分钟或3000r/min、30分钟作两次分级离心所制备的血浆其残留的血小板数明显减少,βTG和PF4值也显著减低。另外,抽血时阻断静脉时间宜短,取血后及时使血液与抗凝剂混和并尽快使全血冷却、离心制备血浆,都是应被重视的环节。

粘附蛋白与内皮细胞

RGD是粘附蛋白与细胞接合的活性部分之一。血小板精白蛋Ⅱb/Ⅲa是识别RGD的受体家族,可以与RGD结合。纤维蛋白(原)能特异地刺激内皮细胞合成和分泌PGI2及t-PA。

人、牛内皮细胞组织型纤溶酶原激活物活性的比较

体外培养人脐静脉及胎牛主动脉内皮细胞,分别从其条件培养液中提取t-PA。实验主要分三步:1)胎牛内皮细胞t-PA的纯化;2)兔抗牛内皮细胞t-PA抗血清的制备及纯化其1gG组分;3)免疫亲和层析、纯化人脐静脉及胎牛主动脉内皮细胞t-PA。结果表明,用微量法免疫动物制备的兔抗牛内皮细胞t-PA抗血清具有较高的滴度与特异性。将该抗血清1gG与人、牛内皮细胞CM交联免疫亲和层析,可获得电泳纯的t-PA,其分子量为65000及67000道尔顿。两者活性比较,胎牛主动脉内皮细胞t-PA活性比人脐静脉内皮细胞t-PA明显增高。

尿激酶单克隆抗体制备、性质和应用

用高分子量尿激酶(HMW UK)免疫BALB/C小鼠,获得21株UK单抗(MoAb)分泌细胞株,并用部分株的培养上清液、腹水或纯化的抗体研究UK MoAb的性质,包括免疫球蛋白分类和亚类、抗体滴度及抗原表位等。有三株MoAb能抑制UK的纤溶活性。通过研究不同MoAb同时与UK抗原作用时其反应强度变化的特点。并确定MoAb在UK的重链或轻链的表位以后,选用部分MoAb建立UK ELISA和UK蛋白质印迹与酶联免疫染色分析法,用以分析比较两种不同UK注射剂和UK尿抽提物的UK抗原含量、比活性,以及UK分子量分布的状况。

中药蒲黄防治动脉粥样硬化机制的研究

中药蒲黄系香蒲科植物水浊的花粉。《本草纲目》记载:“蒲黄手足厥阴血分药也,故能治血止痛,生则能行,熟则能止,与五灵脂同用,能治一切心腹诸痛”。祖国医学描述的“胸脾”、“真心痛”,其证候与冠心病心绞痛相似。据临床报道,由蒲黄和五灵脂为主组成的。失笑散”加味对冠心病有一定疗效,此外,又发现单味蒲黄对降低血清胆固醇和血小板粘附率也有较好的作用,为探索活血化瘀药物,一蒲黄防治动脉粥样硬化(AS)

长期低温下βTG和PF4ELISA试剂盒性能的再分析

长期低温下βＴＧ和ＰＦ４ＥＬＩＳＡ试剂盒性能的再分析上海第二医科大学病理生理教研室上海血液学研究所（２０００２５）张启良β血小板球蛋白（βＴＧ）和血小板第４因子（ＰＦ４）血浆浓度的测定迄今仍是估计体内血小板活化程度较敏感的指标。我们建立的βＴＧ和ＰＦ...

视神经母细胞瘤蛋白与血液系统肿瘤

视网膜母细胞瘤蛋白(pRb)以其磷酸化和去磷酸化形式决定着转录因子E2F的活性,在细胞周期调控中处于中心环节,从而控制着细胞的生长和分化。并且Rb基因作为第一个被克隆成功的抑癌基因,在包括血液系统肿瘤在内的多种肿瘤中发现有pRb表达的异常。这种异常表达对血液系统恶性肿瘤的发生发展以及决定其对化疗药物的敏感性等方面具有重要意义。

尿激酶前体的纯化及其性质的研究

尿激酶前体是与尿激酶具有共同抗原性的一种新的纤溶酶原激活物。我们从人胎肾细胞条件培养液中提纯该物质。首先用抗UKIgG-Sepharose亲和层析得到尿激酶抗原相关蛋白,然后利用苯甲脒-Sepharose柱去除尿激酶获纯化的尿激酶前体。纯化倍数达930倍,得率为18％,所得尿激酶前体为单肽链结构蛋白质,分子量55kD,比活(11389IU/mg)低于尿激酶,二异丙基氟磷酸酯(DFP)不能抑制其活性。体外_^(125)I-血凝块溶解试验表明尿激酶前体可特异地诱导血凝块溶解,对血浆纤溶系统无明显激活作用,血凝块溶解的时间曲线呈特征性“S”型。所得尿激酶前体是一种新的有别于尿激酶的纤溶酶原激活物。

测定胃肠道恶性肿瘤和肺癌组织中u-PA的意义

本文建立了测定微量尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)抗原的ELISA法,检测35例胃肠道恶性肿瘤如胃、食道、结肠、直肠癌以及肺癌患者的癌组织与癌邻近组织的u-PA含量,结果各种癌组织的u-PA明显增高(P<0.05～0.01)。同时测定组织纤溶酶原激活物(t-PA)抗原,仅胃癌组织有明显增高(P<0.01),纤溶酶原激活物(PA)的活性增高见于胃、结肠和直肠癌组织(P<0.05～0.001)。提示这些恶性肿瘤细胞产生或分泌PA抗原特别是u-PA增多,使局部纤溶活性增强,是促进癌细胞增殖和转移的机制之一。

血管壁细胞的纤溶功能和活血化淤中药防治动脉粥样硬化的作用

众所周知,动脉粥样硬化(动粥)的发病机理与动脉内皮细胞(EC)损伤、血栓形成和脂质浸润关系密切,其中内皮细胞损伤和/或功能紊乱是始动因子,单核一巨噬细胞粘附、血小板功能改变(粘附、聚集、释放增强)和平滑肌细胞(SMC)增殖等为动脉粥样硬化发病的重要环节,从中可知血管壁细胞生物学行为即内皮细胞和平滑肌细胞的功能变化与“动粥”发病的关系更为密切。

钙通道阻滞剂对巨噬细胞源性生长因子刺激平滑肌细胞增生的抑制作用

培养的家兔腹腔巨噬细胞分泌巨噬细胞源生长因子(macrophage-derived growth factor,MDGF),可刺激平滑肌细胞(smooth muscle cells,SMC)增生,经用钙通道阻滞剂作用于被MDGF刺激的SMC,则其增生反应即被明显抑制(P<0.05)。

酸性复灌液对心脏再灌注损伤时心肌RAS的影响

目的 探讨酸性复灌液对心肌局部肾素－血管紧张素系统（ＲＡＳ）的影响以及早期暂时性酸性液再灌对缺血－再灌注损伤保护的可能机制。方法 采用离体大鼠等容收缩心脏灌流模型，随机分为３组：１．正常对照组（Ｃ）；２．再灌对照组（Ｉ／Ｒ）；３．酸性液复灌组（Ａ）。用生理记录仪连续记录左室收缩末压（ＬＶＰＳＰ）、左室舒张末压（ＬＶＰＤＰ）、心室内压最大变化速率（±ｄｐ／ｄｔ ｍａｘ）、心率（ＨＲ）等；同时用生化和放免法测定不同时间点冠脉流出液中乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）释放量、心肌组织中肾素血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）活性、血管紧张素Ｉ（Ａｕｇ Ｉ）和血管紧张素 Ⅱ（Ａｕｇ Ⅱ）含量等指标。 结果 １．与Ｉ／Ｒ相比。 Ａ组ＡＣＥ活性和Ａｕｇ Ⅱ／Ａｕｇ Ⅰ转换率明显下降；２．Ａ组再灌初期未见心脏挛缩发生，心功能恢复率上升，最大ＬＶＰＤＰ降低，± ｄｐ／ｄｔ ｍａｘ升高。结论 心肌局部ＲＡＳ可能参与心肌缺血再灌注损伤的发生；早期应用暂时性偏酸液再灌对恢复心功能、防止心律失常的发生是有益的。