血液病儿童输注血制品后病毒感染风险的前瞻性调查

目的 了解血液病儿童输注血制品后的感染情况。方法 用ELISA法检测输血制品前后甲～庚肝的抗原或抗体。结果 63例每人平均接受8.8人次和1250ml的血制品,输前CMV IgG(+)88％,Anti-HBs(+)50％,EBVIgG(+)16％,HEVIgG(+)4.7％,Anti-HBc(+)4.7％,Anti-HBe(+)3.2％,输后总的感染率各自为91.2％,50％,20.7％,4.7％,4.7％,3.2％,前后无统计学差异。输后新出现阳性结果7例,2例CMV IgG,1例HCV IgG,3例EBVIgG,1例HBs-Ag,没有新发现HEV、HGV、CMV IgM、EBV IgM及HBV-Ag阳性。新感染病例与输注量及人次无相关性。结论 提示上海地区血制品相对安全。

泼尼松诱导试验评估儿童急性淋巴细胞白血病预后

目的探讨泼尼松诱导试验评估儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)预后的价值。方法126例ALL初治患儿按ALLXH99治疗方案行泼尼松诱导试验,口服泼尼松(60mg/m2)7d和氨甲蝶蛉加阿糖胞苷鞘内注射1次后外周血涂片计数幼稚淋巴细胞数。若幼稚淋巴细胞数<1000/μL,为泼尼松反应良好;如幼稚淋巴细胞数≥1000/μL,为泼尼松反应不良。生存分析采用KaplanMeier方法;各组生存的比较采用logrank检验;各生物学特征的比较采用χ2检验或Fisher确切概率法(双尾)。结果110例患儿表现为泼尼松反应良好,16例患儿表现为泼尼松反应不良;5年无事件生存率(pEFS)分别为73%±5%与48%±13%,差异有统计学意义(P=0.0021)。结论泼尼松诱导试验简单,易操作,可方便地评估早期治疗反应。

中国急性白血病儿童的细胞色素P450-3A4基因型多态性分析

目的阐明中国急性白血病(AL)和健康儿童中细胞色素P450-3A4(CYP3A4)的基因型分布特点,探讨CYP3A4基因型多态性与儿童白血病的易感性及化疗效应之间可能的相关性。方法应用PCR-RFLP及DNA测序法检测120例AL和85例健康儿童的CYP3A4基因型,分析两组CYP3A4基因型差异。结果85例健康儿童中仅1例为CYP3A4*1B的杂合子基因型,均为野生型,杂合子型的突变频率为1.2%;120例AL儿童中5例(4例ALL和1例AML)表现为杂合子基因型,1例ALL为纯合子基因型,其杂合子基因型突变率为4.2%,纯合子基因型突变率为0.8%。经PCR-RFLP检测并经DNA测序验证,所有受检者的CYP3A4*3基因型均为野生型。结论虽然AL患儿的CYP3A4*1B基因突变率高于健康儿童,但差异无显著性,因此尚不能推论CYP3A4*1B基因型与中国儿童AL发病相关。CYP3A4*3基因在中国健康和AL儿童中是一种罕见的等位基因,其对于CYP3A4酶活性的影响及其在白血病发生中的作用有待进一步探讨。

儿童B系急性淋巴细胞性白血病微小残留病的相关因素及预后分析

目的了解检测儿童B系急性淋巴细胞性白血病(ALL)微小残留病(MRD)在临床上的意义,探讨其相关因素及预后的关系。方法用一种胞浆与胞膜、特异与敏感的标志相结合,CD45/SSC双参数图设门的三色流式细胞术(FCM)对67例儿童B系ALL在诱导治疗结束时(诱导第28～37d)进行MRD监测。结果67例随访病人低危组为18例,中危组为35例,高危组为14例,MRD在3组之间差异有显著性(P<0.005),高危组的MRD(+)率明显较低、中危组高(P<0.005)。MRD与起病时的性别、年龄、白细胞数之间无相关性(P>0.05)。MRD在早期治疗反应上也无明显的统计学差异(P>0.05)。而MRD与复发及中位无事生存期密切相关,MRD(+)组复发率明显较MRD()组高(P<0.05),MRD(+)组中位无事生存期也短于MRD()组(P<0.005)。结论检测MRD有助于了解疗效以及初步判断其预后以便调整治疗策略,是目前随访儿童ALL的有效方法。

t(8;21)与儿童AML-M_2临床表现及预后的相关性探讨(英文)

目的 探讨t(8;2 1)对儿童AML -M2 的疗效和预后的影响。方法 对 14例有t(8;2 1)和 2 1例无t(8;2 1)的M2 患儿的临床特征、疗效、复发率、死亡率及无病生存率进行分析。结果 14例t(8;2 1)和 2 1例无t(8;2 1)的M2 患儿在年龄、白细胞数等临床特征上的差异无统计意义 (P >0 .0 5 )。t(8;2 1)组的完全缓解 (CR)率明显高于无t(8;2 1)组 (92 .9%vs 5 7.1% ) (P <0 .0 5 ) ,而两组的复发率和死亡率差异无显著性 (P >0 .0 5 )。总的无事生存率t(8;2 1)组低于无t(8;2 1)组 (6 9.2 %vs 77.8% ) (P <0 .0 5 )。结论 t(8;2 1)的儿童M2 并不一定具有良好的预后。t(8;2 1)对M2 预后的影响可能存在人种及地区的差异。

高效液相色谱法测定急性白血病儿童细胞色素P450 3A4活性的探讨

目的细胞色素P450 3A4(CYP3A4)参与了许多环境毒物及包括多种常用化疗药物在内的人体中50%以上的药物代谢,多态性研究表明,CYP3A4的活性具有广泛的个体差异,并显示出明显的种族和疾病分布特征.目前国内外尚无进行大样本CYP3A4活性测定方法的报道.本研究旨在建立简便、稳定、可靠的CYP3A4活性的检测方法,探讨健康儿童和急性白血病儿童CYP3A4的活性分布特点,为临床开展相关的药效学研究奠定基础.方法采用高效液相色谱法(HPLC),同时检测85名健康儿童和120名急性白血病儿童的CYP3A4活性.结果以峰面积内标法定量,线性范围0.01～5 mg/L,检测限:氢化考的松(HC)为0.01 mg/L,6β-羟基氢化考的松(6β-OHC)为0.03mg/L.HC的日内、日间误差分别小于2%和5%,6β-OHC的日内、日间误差则分别小于7%和屯10%,绝对回收率为98%～106%.健康儿童的CYP3A4活性范围为2.34～48.88,平均活性为9.76±6.99,急性髓细胞白血病(AML)患儿的CYP3A4活性为13.97±10.84,两组之间无显著性差异(P>0.05).急性淋巴细胞白血病(ALL)儿童的CYP3A4活性范围变化很大,从2.00～585.72不等,平均活性为53.52,明显高于AML组和健康儿童(P1=0.0066,P2=0.0065).结论该方法可简便、快速地测定CYP3A4活性,灵敏度和准确性较高,重复性好.ALL儿童的平均CYP3A4活性明显高于AML组和健康儿童,而后两者之间差异无显著性.

ALK^+非霍奇金淋巴瘤的研究进展

NPM—ALK融合基因的发现使非霍奇金淋巴瘤在分子生物学上有了一类明确的亚型。NPM—ALK融合基因来源于t(2;5),NPM基因位于5q35,而ALK基因位于2p23,两个基因的突变位点几乎不变。通过特异的抗体和PCR等方法可以鉴别出该亚型。近年来,研究发现了不同的ALK融合基因,而在其它疾病中也发现存在该融合基因。NPM—ALK融合基因的确切生物学功能及其作用废物尚未完全明确,通过对其机制的研究,将为该亚型的非霍奇金淋巴瘤的靶向治疗开辟新的途径。

RNAi阻断NPM-ALK基因表达及对大细胞间变性淋巴瘤细胞的影响(英文)

目的应用RNA干扰技术抑制大细胞间变性淋巴瘤细胞系(Karpas299)中NPMALK融合基因表达,观察其对肿瘤细胞生长的影响。方法针对NPMALK融合位点设计两个siRNA序列siRNAI与siRNAII,经PCR反应构建含U6启动子siRNA正义和反义线性表达载体,通过脂质体转染Karpas299细胞,应用实时荧光定量RTPCR、Westernblot检测siRNA片段对NPMALKmRNA和蛋白表达的抑制作用,MTT、Hoechst荧光染色检测siRNA对肿瘤细胞生长的影响。结果siRNAI可导致NPMALKmRNA下降约75%(P<0.05),转染72h后可导致蛋白表达下降;转染siRNAII细胞NPMALKmRNA下降为35%(P<0.05),但蛋白水平无明显改变。转染siRNAI的细胞可抑制Karpas299细胞的增殖和诱导凋亡发生,siRNAII则无明显的抑制增殖和诱导凋亡作用。结论含有针对NPMALK融合位点特异siRNA序列的U6表达载体,可特异地抑制NPMALK基因mRNA和蛋白的表达,并能抑制大细胞间变性淋巴瘤肿瘤细胞株Karpas299细胞的增殖,导致肿瘤细胞凋亡增加,提示NPMALK融合基因的异常表达与大细胞间变性淋巴瘤形成密切相关,为研究NPMALK基因功能和大细胞间变性淋巴瘤基因靶向治疗提供了新策略。

儿童急性淋巴细胞白血病治疗早期白血病细胞及微量残留病监测的预后价值

目的评价诱导治疗第19天及血液学完全缓解(CR)时骨髓存在形态学可辨认的原始、幼稚淋巴细胞数及微量残留病监测在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)治疗中的预后价值。方法以1998年1月1日至2003年5月31日进入ALLXH99方案的193例新诊治ALL患儿为研究对象。联合化疗第19天及诱导缓解治疗结束时行骨髓形态学检查以及血液学CR时用四色多参数流式细胞仪监测微量残留病。结果①诱导治疗第19天骨髓原始、幼稚淋巴细胞≥0.050与<0.050的患儿5年无事件生存(EFS)率分别为(42.59±14.28)%和(74.24±6.67)%,差异有统计学意义(P<0.01);②诱导缓解治疗结束达血液学CR时骨髓存在形态学可识别的原始、幼稚淋巴细胞与此时无形态学可辨认的原始、幼稚淋巴细胞患儿5年EFS率分别为(63.47±9.23)%和(76.41±6.09)%,差异有统计学意义(P<0.05);③诱导缓解治疗结束血液学CR时微量残留白血病细胞≥10-4与<10-4的患儿骨髓原始、幼稚淋巴细胞数比例的差异无统计学意义(P>0.05);诱导缓解治疗结束血液学CR时微量残留白血病细胞≥10-4与<10-4的患儿22个月EFS率分别为(23.81±20.26)%和(94.44±5.40)%,差异有统计学意义(P=0.001)。结论诱导治疗第19天骨髓原始、幼稚细胞数≥0.050在儿童ALL治疗中具有独立的预后价值;

B细胞性非霍奇金淋巴瘤33例诊断治疗回顾分析

目的 认识儿童B细胞性非霍奇金淋巴瘤 (B NHL)临床表现的多样性 ;论证B NHL CCCG 97方案治疗的有效性。方法 对 33例B NHL患儿 ,通过病理活检做形态学及免疫组化分型 ,结合影像学检查、脑脊液检查、体检做分期诊断 ,然后采用B NHL CCCG 97方案进行治疗。结果 30例 (90 9% ,30 / 33)获得完全缓解(CR)。 6个月以上无病生存共 2 3例 ,无病生存 (EFS)率为 6 9 7% (无病生存 6～ 86个月 ,平均 34个月 )。 5例复发 (15 2 % ) :CR后至复发的平均时间为 4 2个月 (1～ 6个月 ) ,其中 3例于复发后死亡。结论 B NHL CCCG 97方案能有效治疗儿童B