全反式维甲酸干预大鼠肺动脉高压的实验研究

目的 :探讨全反式维甲酸 (all-transretinoicacid ,atRNA)对主肺动脉段胶原含量和肺动脉高压肺血管重建的干预作用。方法 :所有动物分成三组 :对照组、模型组和atRNA组。利用野百合碱 (monocrotalineMCT)诱导大鼠肺动脉高压模型 ,同时给予atRA治疗。经导管介入测定平均肺动脉压力 ,比色法测定肺动脉段羟脯氨酸含量。结果 :对照组大鼠平均肺动脉压于不同时间差异无显著性 ,而模型组平均肺动脉压于第 2 1天 ,并继续升高至本次实验的第 2 8天。肺动脉段羟脯氨酸含量第 14天异常降低 ,以后随肺压力的升高而升高。atRNA降低第 2 1天和 2 8天肺动脉段羟脯氨酸含量 ,明显降低肺动脉压 ,差异均有显著性。结论 :atRA能抑制细胞外基质中胶原积聚 ,降低平均肺动脉压 。

胎盘肥胖基因表达与胎儿宫内生长发育相关性研究

为探讨胎盘肥胖基因表达水平和胎儿宫内生长发育的关系。采用ＲＴ－ＰＣＲ检测４０例胎盘肥胖基因ｍＲＮＡ相对表达水平，采用放射免疫法检测脐血肥胖基因蛋白（瘦素ｌｅｐｔｉｎ）水平，采用Ｐｏｎｄｅｒａｌ指数」ＰＩ＝１００×体重（ｇ）／身长（ｃｍ）＾３「估测新生儿营养状态。结果：１３例小于胎龄儿（ＳＧＡ）胎盘组织ｌｅｐｔｉｎ－ｍＲＮＡ相对表达水平为０．４４９±０．０２６，显著低于１５例适于胎龄儿（ＡＧＡ）表达水平０．４８７±０．０４２（Ｐ＝０．０４２），１２例大于胎龄儿（ＬＧＡ）胎盘组织ｌｅｐｔｉｎ－ｍＲＮＡ相对表达水平为０．５２５±０．０２６，显著高于适于胎儿龄儿（ＡＧＡ，Ｐ＝０．０３）。胎盘肥胖基因ｍＲＮＡ相对表达水平与新徨儿出生体重（ＢＷ）和Ｐｏｎｄｅｒａｌ指数（ＰＩ）显著相关（ｒ＝０．６０和０．５６，Ｐ〈０．０５）

NMDA受体拮抗剂治疗胆红素脑病的实验研究

新生儿高胆红素血症是新生儿临床常见病症,并发胆红素脑病可致新生儿死亡、幸存者常留下神经系统后遗症,合理科学防治胆红素脑病对于优生优育有重要价值。为探讨NMDA受体拮抗剂对其治疗作用,我们在成功制作胆红素脑病动物模型基础上进行了初步研究。 一、材料与方法 1.实验动物:生后5～7天豚鼠30只,重40～50克,雌雄不拘。

胎盘瘦素表达与胎儿宫内生长发育相关性研究

目的 探讨胎盘肥胖基因及其蛋白表达水平与脐血leptin和胎儿宫内生长发育的关系。方法 在40例产妇分娩时采集胎盘与脐血，采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测胎盘肥胖基因mRNA相对表达水平，采用Western-Blot检测胎盘肥胖基因蛋白(瘦素，leptin)表达水平，采用免疫组化观察胎盘肥胖基因蛋白表达位点，采用放射免疫法(RIA)检测脐血leptin水平，采用Ponderal指数(PI=100×体重(g)／身长(cm)^3)估测新生儿营养状态。结果 胎盘组织肥胖基因呈现高效表达，在胎盘滋养层细胞浆内肥胖基因蛋白呈阳性表达。胎盘肥胖基因及其蛋白表达水平与胎儿宫内生长发育状态相关，13例小于胎龄儿胎盘组织leptin-mRNA及其蛋白表达水平显著低于15例适于胎龄儿(P=0．003和0．008)，12例大于胎龄儿胎盘组织leptin-mRNA及其蛋白表达水平显著高于适于胎龄儿(P=0．04和0．02)。胎盘肥胖基因mRNA及其蛋白表达水平与脐血leptin水平显著相关(r=0．39和0．43，P<0．05)，与新生儿Ponderal指数(PI)显著相关(r=0．66和0．69，P<0．01)。结论 胎盘是脐血lepfin重要来源，胎盘leptin可能对胎儿宫内生长发育有促进作用。

NMDA受体拮抗剂GAPA治疗实验性胆红素脑病的机制研究

目的 探讨NMDA受体拮抗剂GAPA对胆红素脑病治疗作用及其机制。方法 制作胆红素脑病动物模型基础上，在体脑内微透析提取兴奋性氨基酸(EAA)神经递质，HPLC检测天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)，并给予模型动物NMDA受体拮抗剂GAPA干预，电镜检测脑组织超微结构，荧光检测脑组织ATP含量与细胞内Ca^2+。结果 胆红素毒性脑组织ATP含量显著降低，细胞外Gly与细胞内Ca^2+显著增高；GAPA不影响胆红素毒性脑组织ATP含量，但可显著降低细胞内Ca^2+，减轻胆红素毒性脑水肿。结论 NMDA受体过度活化致细胞内Ca^2+超载参与介导胆红素神经毒性，NMDA受体拮抗剂可望成为胆红素神经毒性防治的重要途径。

美金胺、黄芪对新生大鼠脑缺氧缺血再灌注损伤的保护作用

目的 评价美金胺和黄芪对新生大鼠缺氧缺血再灌注损伤的脑保护作用。方法 通过夹闭新生大鼠双侧颈总动脉 1h、缺氧 2h ,建立脑缺氧缺血再灌注损伤模型。将新生大鼠随机分成正常对照组、假手术组、缺氧缺血再灌注组 (HIR组 )、美金胺治疗组、黄芪治疗组、黄芪和美金胺联合治疗组 ,每组 12只 ,于术后 6h或 4 8h处死。取耳间线前 2mm水平做冠状位脑组织切片 ,通过脑组织病理检查及病理评分评估美金胺和黄芪的脑保护效果。结果 缺氧缺血可引起新生大鼠明显的脑病理改变 ,经单独或联合应用黄芪和美金胺后 ,新生大鼠的脑病理改变明显减轻 ,各治疗组病理评分均显著低于缺血再灌注组。结论 美金胺和黄芪对治疗新生儿脑缺氧缺血损伤可能具有一定的潜在意义 ,尤其两药联合治疗新生儿脑缺氧缺血损伤 。

在体微透析检测豚鼠胆红素脑病模型脑组织兴奋性氨基酸神经递质

目的 探讨胆红素脑病动物模型制作及其脑组织中兴奋性氨基酸 (EAA)神经递质变化。方法 豚鼠腹腔内给予胆红素 2 0 0 μg/g后 8h ,电镜观察脑组织形态结构 ,在体脑内微透析提取神经突触间细胞外液 ,HPLC检测分析天冬氨酸 (Asp) ,谷氨酸 (Glu)和甘氨酸 (Gly)。结果 胆红素毒性脑组织神经元及其线粒体肿胀 ,细胞外Gly含量为2 1 .35± 4.87μM ,明显高于对照组1 4 .0 2± 1 .5 6 μM (P <0 .0 1 ) ;胆红素毒性脑组织细胞外Asp ,Glu与对照组比较差异不显著 (P >0 .0 5 )。结论 胆红素毒性脑组织细胞外甘氨酸 (Gly)含量增加 ,可提高NMDA受体对EAA神经递质Asp及Glu敏感性 ,致NMDA受体过度活化。

肺高压肺血管重建大鼠基质金属蛋白酶1基因表达

目的 探讨基质金属蛋白酶 1(MMP 1)基因表达与肺高压形成的关系。方法 利用野百合碱(monocrotalineMCT)诱导的大鼠肺高压动物模型 ,经导管介入测定大鼠肺动脉平均压力 ,逆转录定量聚合酶链反应 (RT PCR)检测不同时间点大鼠肺组织MMP 1mRNA相对表达水平。结果 实验第 3周肺动脉压力已明显升高 ,以第 4周为最高 ,而大鼠肺组织MMP 1mRNA表达水平以实验第 2周最为明显 ,第 3,4周表达水平下调 ,但仍高于第 1周。结论 MMP 1早期基因表达升高参与细胞外基质屏障的降解 ,对肺血管重建可能起了触发作用 ,实验后期表达水平下调可能是导致细胞外基质积聚的重要原因之一。

胆红素诱导原代培养神经细胞内Ca^(2+)含量的变化及MgSO_4的拮抗作用

目的 探讨胆红素诱导原代培养神经细胞内Ca2 + 含量的变化 ,以及MgSO4 的拮抗作用。方法 采用胎鼠大脑皮层细胞作原代神经细胞培养 ,观察 10 0 μmol/L胆红素对不同成熟程度神经细胞内Ca2 + 含量的影响。原代培养神经细胞经Fura- 2 /AM负载 ,荧光图像分析测定细胞内Ca2 + 含量。结果 未成熟神经细胞 (培养2天 )暴露于 10 0 μmol/L胆红素 4h ,细胞内Ca2 + 从 75 .3nmol增加到 32 0 .8nmol;继续暴露 4h ,细胞内Ca2 + 增加到 40 0 .7nmol;去除胆红素暴露 ,细胞内Ca2 + 不能逆转。成熟神经细胞 (培养 8天 )暴露于 10 0 μmol/L胆红素 4h ,细胞内Ca2 + 从 70 .6nmol增加到 15 0 .8nmol;继续暴露 4h ,细胞内Ca2 + 不再增加 ;去除胆红素暴露 ,细胞内Ca2 + 浓度可显著降低。培养液中Mg2 + 加至 2mmol/L可减轻胆红素诱导的神经细胞内Ca2 + 含量变化。结论 胆红素可诱导原代培养的、未成熟的神经细胞Ca2 + 超载 ,MgSO4 可拮抗胆红素诱导的神经细胞Ca2 + 超载。

IGF轴与胎儿生长调节

胰岛素样生长因子 (IGFs)及其受体、结合蛋白、结合蛋白酶构成IGF轴 ,在胎儿生长调节中起关键作用 ;IGF转基因动物生长加速 ,IGF基因敲除动物宫内生长迟缓 ;宫内生长发育迟缓小样儿IGF轴异常 ,重组IGF Ⅰ对其有治疗作用。

胆红素脑病模型豚鼠EAA神经递质的检测

目的 探讨胆红素神经毒性脑组织兴奋性氨基酸（ＥＡＡ） 神经递质变化。方法 制作胆红素脑病动物模型基础上在体脑内微透析，提取神经突触间细胞外液，ＨＰＬＣ 检测分析天门冬氨酸（Ａｓｐ）、谷氨酸（Ｇｌｕ） 、甘氨酸（Ｇｌｙ） 。结果 胆红素毒性脑组织细胞外Ｇｌｙ 较对照组明显升高，而Ａｓｐ 、Ｇｌｕ 与对照组差异不显著。结论 胆红素神经毒性ＮＭＤＡ受体活性变化机制涉及Ｇｌｙ 细胞外堆积，提高ＮＭＤＡ受体对ＮＡＡ 神经递质Ａｓｐ、Ｇｌｕ敏感性。

新生大鼠在1-氨基-3,5-二甲基金刚烷盐酸急性毒理实验中的病理学变化

目的从病理学角度探讨1-氨基-3,5-二甲基金刚烷(美金胺)对新生大鼠各主要脏器可能造成的毒性影响。方法新生大鼠68只随机分为7组,分别腹腔注射不同剂量的美金胺和注射用水,对所有死亡新生大鼠及时尸解,存活新生大鼠在给药7 d后断头处死,取肝、肾、脑、心、肺、脾进行病理检查,评估不同剂量的美金胺对重要脏器的可能毒性改变。结果1.用药组死亡新生大鼠脑、肝的脏体较正常7日龄新生大鼠相应脏器的脏体比显著增高,脾脏较正常7日龄新生大鼠相应脏器的脏体比显著减低。2.镜下病理检查结果显示,脑组织有神经元变性,肝组织有淤血和细胞变性,余脏器病变不明显。3.新生大鼠的病理变化程度及死亡率与美金胺的剂量呈正相关。结论美金胺对新生大鼠的脑和肝脏影响较大。

CK19 mRNA测定在乳腺癌腋淋巴结微转移诊断中的应用

研究敏感的方法检测乳腺癌腋窝淋巴结微转移。方法:对15例乳腺癌者的61个腋淋巴结和5个正常对照淋巴结同时进行HE染色组织学检查和CKl9逆转录-聚合酶链式反应(CK19RT-PCR)检测。结果:15例乳腺癌组织均有CK19mRNA表达,而5个正常淋巴结中均末见表达。61个腋窝淋巴结中7个组织学检查证实转移,其CK19mRNA亦表达阳性。组织学检测无转移的54个淋巴结中有12个CK19RT-PCR表达阳性,42个阴性;提示该12个淋巴结存在微转移只能用CK19RT-PCR方法检测出。经统计学分析,CK19RT-PCR与组织学检查二者有显著差异(X^2检验,P<0.01)。结论:CK19表达于恶性乳腺细胞,正常淋巴细胞无表达,CK19能作为组织特异基因进行RT-PCR扩增以检测乳腺癌腋淋巴结微转移。CK19 RT-PCR方法比组织学方法更敏感,特别对在筛选组织学检查淋巴结阴性而具有高度复发危险性的病人将有实用价值。

大剂量阿糖胞苷在急非淋白血病患儿体内的药物动力学

目的 :了解大剂量阿糖胞苷化疗后 ,患者的药物动力学参数及不良反应。方法 :采用 HPL C法测定患者阿糖胞苷血浓。结果 :用二室动力学模型拟合 ,其分布相半衰期为 (0 .30± 0 .0 5 ) h,消除相半衰期为 (0 .6 4± 0 .11) h。结论 :首次用药与末次用药的药物动力学参数无显著性差异 ,表明阿糖胞苷在儿童体内无蓄积。

胎盘瘦素表达与胎儿宫内生长发育的相关性研究

目的 探讨胎盘肥胖基因及其蛋白———瘦素 (leptin)表达水平与脐血瘦素和胎儿宫内生长发育的关系。方法 40例产妇分娩时采集胎盘与脐血 ,其中 2 6例来自上海新华医院 ,14例来自南京江北人民医院。采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测胎盘瘦素mRNA相对表达水平 ,采用Westernblot检测胎盘瘦素表达水平 ,采用免疫组织化学观察胎盘瘦素表达位点 ,采用放射免疫法(RIA)检测脐血瘦素水平 ,采用Ponderal指数 [PI=10 0×体重 (g) /身长 (cm) 3]估测新生儿营养状态。结果 RT PCR显示胎盘组织瘦素mRNA呈现高效表达 ,免疫组化显示胎盘滋养层细胞胞质内瘦素阳性表达。均数差别t检验显示 13例小于胎龄儿 (SGA)胎盘组织瘦素mRNA与 β actin mRNA表达水平之比为 0 6 1± 0 15 ,低于 15例适于胎龄儿 (AGA) 0 83± 0 2 0 (P =0 0 0 3 4) ,12例大于胎龄儿 (LGA)胎盘组织瘦素mRNA与 β actin mRNA表达水平之比为 1 0 0± 0 2 3,高于AGA(P =0 0 43)。 13例SGA胎盘组织瘦素含量 (ng/mg)为 0 2 6± 0 0 5 ,低于 15例AGA (0 340± 0 0 86 ) (P =0 0 0 76 ) ,12例LGA胎盘组织瘦素含量为 0 43± 0 10 ,高于AGA(P =0 0 2 1)。胎盘肥胖基因mRNA及其瘦素表达水平与脐血瘦素水平显著相关 (r =0 39和 0 43,P

脐血瘦素水平与胎儿宫内生长发育相关性研究

目的 探讨脐血瘦素来源及其在胎儿宫内发育成熟中作用。 方法 采用放免检测孕母外周静脉血与新生儿脐血瘦素水平 ,采用 Ponderal指数 [PI=10 0×体重 (g) /身长 (cm) 3]估测新生儿营养状态 ,采用 weststrate公式 [F% =0 .8848× SFT4+ 0 .0 2 2 ]估测新生儿体脂含量。 结果 6 5例新生儿脐血瘦素水平 (x± s)为 (11± 4) ng/ ml,30例孕母外周血瘦素水平为 (2 0± 7) ng/ ml;脐血瘦素水平与孕母外周血瘦素水平无显著相关 (r=0 .11,P>0 .0 5 ) ,与胎盘重量、新生儿体脂含量 (% )显著相关 (分别为 0 .71、0 .2 8,P<0 .0 5 )。大于胎龄儿 (L GA)脐血瘦素水平显著高于适于胎龄儿 (P=0 .0 14) ;小于胎龄儿 (SGA)脐血瘦素水平显著低于适于胎龄儿 (P=0 .0 0 72 ) ;脐血瘦素水平与新生儿Ponderal指数 (PI)显著相关 (r=0 .6 2 4,P<0 .0 1)。 结论 脐血瘦素反映胎儿宫内生长状况 ;胎盘可能是脐血瘦素重要来源 。

吸入一氧化氮对持续肺动脉高压新生儿患者血小板聚集功能的影响

目的:探讨一氧化氮(NO)吸入治疗新生儿持续肺动脉高压(PPHN)过程中血小板聚集功能的变化。方法:采用比浊法,测定新生儿持续肺动脉高压患儿吸入NO后6小时血小板在肾上腺素、胶原及二磷酸腺苷(ADP)诱导下的聚集率。结果:三种诱导剂诱导血小板聚集的能力均明显受到抑制,与对照组相比,差异显著。结论:PPHN吸入NO后,血小板聚集功能明显受到抑制,存在加重临床出血的可能性。