屈洛昔芬逆转人乳腺癌耐药细胞株MCF7/ADR多药耐药性的研究

目的:研究屈洛昔芬(DRO)对乳腺癌耐药细胞株(MCF7/ADR)多药耐药性(MDR)的影响。方法:应用MTT、半定量RT-PCR和免疫细胞化学染色,研究DRO对MCF7/ADR药物敏感性、耐药相关基因MDR1、谷胱甘肽S转移酶Pi(GST-π)、拓扑异构酶Ⅱα(TopoⅡα)和多药耐药相关蛋白(MRP)表达的影响。流式细胞技术观察细胞内药物积累。结果:在20、10和5μmol/L浓度时DRO对MCF7/ADR耐药性的逆转倍数分别为16、8和3倍,逆转强度与同类化合物三苯氧胺相当。DRO处理后,MDR1和GSTπ基因表达水平明显降低。DRO使ADR在细胞内的积累分别增加到2.5(20μmol/L)、2.0(10μmol/L)和1.5(5μmol/L)倍。结论:DRO具有较强的逆转MCF7/ADR耐药性的作用,其逆转机制是多途径的。

奥曲肽辅助肝动脉结扎治疗大鼠肝内移植瘤的初步观察

目的 观察奥曲肽辅助肝动脉结扎 (HAL)治疗大鼠肝内移植瘤的效果。方法 采用大鼠肝内移植Walker 2 5 6肿瘤模型 ,分为对照组、HAL组、HAL +奥曲肽治疗组。观察治疗后肿瘤体积改变与肿瘤生长抑制率 ,Hoechst 33342标记法检测肿瘤组织血供 (标记细胞数代表血供情况 ) ,检测ALT、AST观察HAL、奥曲肽对肝功能的影响。结果 对照组、HAL组、HAL +奥曲肽治疗组肿瘤体积分别为 (0 .10 3± 0 .0 4 3)cm3 、(0 .0 30± 0 .0 18)cm3 、(0 .0 16± 0 .0 0 5 )cm3 ,后 2组肿瘤体积明显小于对照组 (P <0 .0 1) ,肿瘤抑制率分别为70 .8%、84 .5 %。HAL +奥曲肽治疗组肿瘤体积明显小于HAL组 (P <0 .0 5 )。对照组、HAL组、HAL +奥曲肽组Hoechst 33342标记细胞数分别为 36 9.7± 30 .2、344 .1± 2 6 .0、32 3.2± 4 0 .4 ,HAL +奥曲肽组标记细胞数明显少于对照组 ,提示其血供明显减少。HAL及奥曲肽对肝功能无明显影响。结论 奥曲肽能明显提高肝动脉结扎治疗大鼠肝内移植瘤的效果 ,减少动脉阻断后的肿瘤血供可能为主要机制之一。

肝动脉化疗栓塞结合外放射治疗大肝癌的预后因素分析

目的观察肝动脉化疗栓塞(transcatheter arterial chemoembolization,TACE)结合外放射治疗大肝癌的远期效果并分析预后因素.方法以TACE结合外放射治疗107例大肝癌患者(肝肿瘤最大径5～18 cm).观察近期效果与生存率,并用Cox比例风险模型分析预后因素.结果48.6%的病例获得肿瘤缓解,1、3、5年累积生存率分别为59.4%、28.4%、15.8%.肿瘤数目、放疗剂量为独立的预后因素.单发肿瘤者的累积生存率(1、3、5年分别为75.8%、43.9%、26.8%)明显高于肝内肿瘤多发者(1、3年分别为313%、5.0%,P=0.000 5).放疗剂量40Gy以上者的生存率(1、3、5年分别为95.8%、74.7%、37.4%)明显高于剂量20～40Gy者(分别为60.9%、20.7%、10.3%)与剂量低于20Gy者(分别为26.7%、7 1%、7.1%=0.000 1).结论TACE结合外放射为治疗不能切除大肝癌的有效方法.肿瘤数目为影响预后的最重要的临床因素.在肝脏可耐受的范围内给予最高剂量的放疗是提高疗效的关键.

诺美孕酮逆转乳腺癌耐药细胞株多药耐药性的研究

目的 研究诺美孕酮 (NOM)对乳腺癌耐药细胞株 (MCF7/ADR)多药耐药性 (MDR)的影响 ,探讨其调节机制。方法 应用MTT法 ,研究NOM对MCF7/ADR药物敏感性的影响。采用半定量逆转录聚合酶联反应 (RT PCR)和免疫细胞化学染色 ,分析耐药基因MDR1、谷胱甘肽S转移酶Pi(GSTπ)、拓扑异构酶Ⅱα(TopoⅡα)和多药耐药相关蛋白 (MRP)表达的变化。通过流式细胞技术观察NOM对MCF7/ADR细胞内药物积累和细胞周期的影响。结果 NOM对MCF7/ADR的MDR具有明显的逆转作用 ,在 2 0 ,10和 5 μmol/L浓度时的逆转倍数分别为 2 1,12和 8倍 ,逆转强度明显高于前身化合物甲地孕酮 ,而与维拉帕米相当。 5 μmol/LNOM处理MCF7/ADR后 ,MDR1的mRNA表达水平明显降低 ,呈现时间依赖性变化 ;P糖蛋白 (P gp)和GSTπ蛋白的变化符合相应mRNA表达的变化 ;MRP和TopoⅡα基因表达未见明显变化。用NOM 2 0 ,10和 5 μmol/L分别处理 2h后 ,ADR在细胞内的积累分别增加到 2 .7倍、2 .3倍和 1.5倍。同时 ,NOM可明显加强ADR对MCF7/ADR细胞在G2 M期的阻滞作用。结论 NOM具有较强的逆转MCF7/ADR细胞MDR的作用 ,其逆转机制为多种途径 ,包括时间依赖性下调MDRI和GSTπ基因的表达 ,增加细胞内药物积累 ,加强ADR对MCF7/ADR在G2

肝动脉阻断对大鼠肝癌血供与VEGF、MMP表达的影响

目的 观察肝动脉阻断对大鼠移植性肝癌的血液灌流与血管内皮生长因子 (VEGF)、基质金属蛋白酶 1(MMP 1)表达的影响 ,初步探索肝动脉栓塞促进肝癌转移的机制。方法 采用大鼠肝内移植Walker 2 5 6肿瘤模型 ,以肝动脉结扎 (HAL)的方法阻断肝动脉血供 ,模拟肝动脉栓塞治疗。分为对照组、剖腹对照组、HAL组。Hoechst33342标记法检测瘤组织血液灌流 (标记细胞数代表血供情况 ) ,酶联免疫吸附试验 (ELISA)测定血清VEGF水平 ,原位杂交法检测瘤组织VEGF、MMP 1表达。结果 HAL后 2d瘤组织血供明显下降 (对照组每高倍视野Hoechst33342标记细胞数 383 6± 19 2 ,HAL组 32 9 1± 2 9 3 ,P <0 0 1)。血清VEGF水平明显升高 (对照组 5 4 9± 19 3pg ml,HAL组 92 5± 43 9pg ml,P <0 0 5 )。瘤组织VEGF、MMP 1mRNA表达水平较对照组、剖腹对照组明显升高 (P <0 0 5 )。瘤组织血供与血清VEGF水平、瘤组织VEGF表达负相关。结论 肝动脉阻断使癌组织血供减少 ,转移相关基因VEGF、MMP 1表达升高。血供减少、缺氧加重可能为其诱导VEGF表达的主要机制。