恶性血液病中着丝粒和着丝粒周染色体重排的研究进展

用染色体特异的卫星DNA探针进行染色体荧光原位杂交 (FISH)分析恶性血液病 ,发现着丝粒和着丝粒周染色体的重排并非罕见。分子生物学技术和基因组计划的发展 ,促进了对异染色质分子本质的研究。本文就着丝粒和着丝粒周异染色质的分子结构及其重排机制作一综述。

低剂量氧化砷治疗早幼粒细胞白血病的实验研究

背景与目的:低剂量三氧化二砷(arsenictrioxide,As2O3)是治疗急性早幼粒细胞性白血病(APL)的有效手段之一,它不仅对初发APL病人有效,而且对全反式维甲酸(ATRA)已耐受的复发APL病人可获得完全缓解。然而,目前其诱导APL缓解的机制尚不清楚。为此,本研究试图探讨低剂量As2O3治疗APL的可能机制。方法:以APL细胞株NB4和来源于APL患者骨髓的原代细胞为模型,通过观察细胞形态、对四氮唑蓝的还原能力和细胞表面分化抗原的变化来鉴定细胞分化;并应用免疫荧光和Westernblot分析细胞内PML-RARα融合蛋白的变化。结果:0.25μmol/LAs2O3联合环腺苷酸(cAMP)拟似物8-对氯苯硫基环腺苷酸(8-CPT-cAMP)可诱导NB4细胞和原代细胞分化,而且该效应能被蛋白激酶PKA的抑制剂H89抑制。进一步研究还显示8-CPT-cAMP可以促进As2O3介导的PML-RARα融合蛋白降解。结论:cAMP可增强As2O3对APL细胞的分化诱导效应。

急性早幼粒细胞白血病维甲酸及砷剂治疗期间止、凝血改变的初步研究

目的 观察急性早幼粒细胞白血病 (APL)患者发病时、全反式维甲酸 (ATRA)和三氧化二砷(As2 O3 )治疗期间的止、凝血改变。方法 运用ELISA或发色底物法对 2 3例APL患者血浆一系列止、凝血指标进行动态检测。结果 治疗前血浆血栓调节蛋白 (TM )、血小板α颗粒膜蛋白 (GMP 140 )、可溶性纤维蛋白单体复合物、组织因子途径抑制物、组织纤溶酶原激活物活性 (t PA)和D 二聚体较正常组显著升高 ;纤维蛋白原、蛋白C(PC)抗原、纤溶酶原、α2 抗纤溶酶和纤溶酶原激活抑制物低于正常 ;PC活性 (PC∶A)和蛋白S抗原与正常组无显著差异。TM和GMP 140与患者发病时白细胞计数有关。ATRA及As2 O3 治疗缓解后除PC∶A部分增高外余均恢复至正常范围内。ATRA组TM、PC∶A和t PA有所升高 ,在As2 O3 组未发现上述现象。结论 APL发病过程中存在血管内皮细胞损伤、血小板活化以及凝血、抗凝、纤溶系统的激活 ,ATRA和As2 O3 治疗早期即能明显改善APL的止。

海参糖胺聚糖抗血栓形成机制的研究

目的 :研究海参糖胺聚糖 (hGAG)抗血栓机制。方法 :观察hGAG对内皮细胞的促凝活性、组织因子 (TF)、凝血酶调节蛋白 (TM )和纤溶酶原激活物抑制剂 1(PAI 1)的影响。结果 :细菌脂多糖(LPS)与内皮细胞孵育后 ,不同浓度的hGAG可使细胞促凝活性下降 ,TF抗原及mRNA转录下降 ,TM抗原表达及mRNA转录增强 ;hGAG可使内皮细胞培养上清液中的PAI 1抗原、活性、mRNA转录下降。结论 :hGAG通过下调内皮细胞TF表达 ,促进TM表达 ,降低内皮细胞PAI 1合成、分泌及抑制PAI 1mRNA转录 。

正常孕妇产前和产后抗凝和纤维蛋白溶解变化的研究

本文报道早孕、中孕、晚孕和产后第1～2天、第3～4天、第5天以上的正常孕(产)妇的抗凝和纤维蛋白溶解(纤溶)的研究结果。抗凝系统中ATⅢ_A和ATⅢ_(Ag)减低,产后第1～2天即恢复至正常;PC_A和PC_(Ag)正常或减低,产后第3～4天或第5天以上才恢复至正常;TPS和FPS有不同程度的减低,产后第5天以上仍未恢复至正常。纤溶系统中t-PA和PAI_s增高或正常,产后第5天以上仍未恢复至正常;PLG升高,产后第5天仍未恢复正常;PL减低,产后第1～2天即恢复至正常。FDP_s明显升高,产后第2～4天恢复至正常。

病毒性肝炎患者凝血纤溶系统的研究

目的:研究病毒性肝炎患者凝血纤溶状态的改变,探讨各指标对于肝炎的提示作用。方法:对正常人和各类肝炎患者检测凝血因子、AT、PC、PS等29项指标以反映凝血抗凝系统状态;检测t-PA、PL、PAI、PLG、FDP、α_2PI、DD、PAP等10项指标以反映纤溶系统状态。用SAS软件进行统计分析。结果:除急性肝炎患者因子Ⅱ:C、Ⅸ:C、Ⅹ:C、Ⅻ:C、Fg、PAP:Ag、DD不改变外,其余各类肝炎患者各指标与正常人比较均有显著差异;各指标均与肝炎的严重程度相关;AT/α_2PI比率均<1;α_2PI低于正常人的40％时,病人可出现出血;AT<20％预后不佳;vWWF:Ag/Ⅷ:C比值升高提示患者有并发DIC的可能。结论:肝炎患者抗凝活性下降,存在着纤溶;各指标可用于评价肝脏损伤,防治出血,判断预后。

Fenretinide诱导白血病细胞凋亡的机理研究

Fenretinide(4HPR)是人工合成的全反式维甲酸衍生物,能够通过诱导凋亡抑制多种肿瘤细胞生长和增殖,但是其机理尚不很清楚。本研究考察4HPR对几种白血病细胞的影响,并用U937为对象研究其作用机制。在研究中进行了细胞生长和增殖实验,以膜联蛋白检测细胞凋亡,测定活性氧(ROS)和线粒体跨膜电位(ΔΨm)及用Westernblot检测蛋白表达。研究结果表明,4-HPR能够剂量依赖性地抑制多种白血病细胞株的增殖,进一步发现4HPR能够诱导U937细胞发生凋亡,并且此凋亡可以被维生素C所抑制.此凋亡过程伴有活性氧的升高,线粒体跨膜电位的下降,以及酶原型胱冬酶8(caspase8),3的蛋白水平表达下降。结论:4HPR可能通过升高细胞内ROS的水平,造成线粒体膜损伤,引发由caspase家族成员介导的凋亡,提示4HPR可能是一种线粒体靶向的药物。

PLZF-RARα/RARα-PLZF双阳性转基因小鼠发生白血病模型研究

本研究目的是从生物整体水平上研究PLZFRARα/RARαPLZF双融合基因的表达在急性早幼粒细胞白血病(APL)发病中的作用及发病机制。通过交配建立PLZFRARα/RARαPLZF双阳性转基因小鼠(TM)模型;采用PCR、RTPCR方法检测融合基因的整合和表达;应用血象、骨髓象、病理和流式细胞术等对疾病表型进行检测分析;并观察全反式维甲酸(ATRA)或ATRA与tricostatinA(TSA)联合用药对PLZFRARα/RARαPLZF双阳性转基因小鼠骨髓细胞的作用。结果表明,在近18个月的时间观察到51只PLZFRARα/RARαPLZF双阳性转基因小鼠中有5只小鼠发病,发病率约10%,与我所同期的仅PLZFRARα转基因阳性小鼠11.3%的发病率相似。发病时间均在6月龄以后,与PLZFRARα转基因阳性发病小鼠相比示提前,但疾病表型不同,2只(40%)为急性早幼粒细胞白血病(APL)改变,3只(60%)为慢性粒细胞白血病(CML)改变。ATRA处理组的骨髓细胞形态无改变,而ATRA+TSA组骨髓原始细胞核浆比例降低,染色质固缩,呈现粒细胞分化趋势。结论PLZFRARα/RARαPLZFTM小鼠发病存在异质性,其骨髓细胞对ATRA无反应,而ATRA与TSA联合用药可诱导骨髓原始早幼粒细胞分化。

低分子量肝素的研究进展

低分子量肝素广泛应用于血栓栓塞性疾病的预防及治疗,其有效性和安全性均优于普通肝素。本文就其基础研究、临床应用情况及实验室监测指标等作一综述。

冠心病和缺血性中风高凝状态的研究

本文对346例次各型冠心病(CHD)、177例次缺血性中风(IS)患者及604例次正常人进行了血小板功能和凝血、抗凝的检测。结果发现,各型 CHD 和 IS 时,PAgT、β-TG 和 PF_4、TXB:的血浆水平升高,6-酮-PGF_(1α)则降低;VWF:Ag 和因子Ⅷ:C 水平升高,ATⅢ:A 降低、PLG:Ag升高。表明患者存在高凝状态或血栓形成,此为研究高凝状态提供了客观依据。

AT基因13387-9delG突变引起遗传性抗凝血酶缺陷症的分子病理机制研究

目的 研究AT基因 13387 9delG突变引起AT缺陷症的分子病理机制。方法 用大引物法构建 13387 9delG突变体AT重组表达质粒 (ATM) ,并将其和正常AT重组表达质粒 (ATN)分别用Superfect 试剂转染COS7细胞或CHO细胞 ,进行体外表达试验、脉冲追踪试验以及细胞免疫荧光染色。结果 ATM转染的COS7细胞培养上清液中检测不到AT抗原 ,而在细胞裂解液中 ,其AT抗原仅为转染ATN的 2 7 13%。脉冲追踪试验发现 ,在ATM转染的COS7细胞培养上清液中 ,检测不到3 5S标记的AT蛋白 ,在chase 0min时 ,ATM细胞内3 5S标记的AT蛋白只有ATN的 2 7 8% ;在chase 180min时 ,ATM细胞内3 5S标记的AT蛋白为 0min时的 5 0 %左右。细胞免疫荧光试验的结果表明 ,ATM转染的CHO细胞内荧光强度明显低于ATN转染的CHO细胞。结论 编码的突变AT蛋白分泌障碍和细胞内快速降解 ,是AT基因 13387

遗传性凝血因子Ⅺ缺陷的分子发病机制研究进展

凝血因子Ⅺ(FⅪ)是血浆丝氨酸蛋白酶活化的凝血因子Ⅺ(FⅪa)的酶原,后者在钙离子存在时,可以活化FⅪ,形成活化的凝血因子Ⅺ(FⅪa).FⅪ由肝脏和巨核细胞所产生,人体内除血浆中存在有FⅪ外,血小板中也可能含有一部分FⅪ.

老年冠心病患者止凝血变化的研究

本文检测老年冠心病患者的血浆凝血酶 -抗凝血酶 复合物 (TAT)、血管性血友病因子抗原 (v WF:Ag)、蛋白 C抗原 (PC:Ag)、蛋白 S抗原 (PS:Ag)、P-选择素 (P- Selectin)、组织纤溶酶原激活物活性 (t- PA:A)、纤溶酶原激活剂抑制剂活性 (PAI:A )及 D-二聚体 (D- D) ,并与对照组比较。老年冠心组的 TAT、v WF:Ag、P- Selectin、PS:Ag、t- PA:A、PAI:A、D- D显著升高 (P<0 .0 5 )。其中 ,不稳定型心绞痛的 TAT、t- PA:A、PAI:A、D- D升高更明显 ,并与稳定型心绞痛有显著差异。结果表明 :老年冠心病患者主要表现为凝血系统激活、血管内皮损伤。

遗传性蛋白C缺陷症的研究进展

蛋白C(PC)是生理性抗凝系统PC系统重要的组成部分。遗传性PC缺陷症是由编码PC基因突变引起的常染色体遗传性疾病,其分子发病机制研究近年来有较大的进展,对突变与蛋白结构和功能改变之间的关系有较明确的认识。遗传性PC缺陷可以是仅有PC基因突变也可与其他凝血因子或抗凝因子基因突变共同存在,也是静脉血栓形成的主要危险性遗传因素之一。本文就此进行综述。

获得性血友病的临床研究

获得性血友病是指因体内产生抑制因子Ⅷ作用的特异性自身抗体而引起的出血性疾病。获得性血友病最多见于老年人,其次为产后女性。常表现为严重出血,甚至危及生命。本文着重介绍引起该病的相关疾病谱,自身抗体的性质和作用机制、实验室诊断方法及临床治疗的研究进展。

凝血因子Ⅹ研究进展

凝血因子Ⅹ (FⅩ )处于内源性凝血途径和外源性凝血途径的共同通路 ,在凝血过程中发挥着关键作用。近年来 ,通过对遗传性凝血因子Ⅹ缺陷症的FⅩ基因突变的研究 ,对FⅩ的结构与功能的关系有了深入理解。

氧化砷对K526细胞增殖和凋亡的作用及其机制的初步研究

目的 :研究氧化砷 (As2 O3 )对 K5 6 2细胞增殖和凋亡的作用及其机制。方法 :以细胞形态、细胞生长及活力测定 ,流式细胞仪分析细胞周期相关 DNA含量并以基因组 DNA电泳等方法观察 As2 O3 对 K5 6 2细胞的作用 ,采用 Western印迹和 Northern印迹法就其作用机制进行初步探索。结果 :在 As2 O3 作用下 K5 6 2细胞生长受抑伴随活力下降 ;基因组 DNA电泳出现“梯”状条带 ,流式细胞仪检测出“凋亡峰”。实验进一步表明 As2 O3 可降低该细胞 bcr/abl融合蛋白的含量 ,但不影响 CML 特异性 bcr/abl融合基因的 m RNA水平。结论 :As2 O3 有抑制 K5 6 2细胞增殖和诱导该细胞凋亡的作用。初步研究结果表明 ,As2 O3 导致 bcr/abl融合蛋白含量降低 。