单链构象多态性分析检测脂蛋白脂酶基因变异

目的:建立聚合酶链反应-单链构象多态性（PCR-SSCP）技术检测脂蛋白脂酶（LPL）基因Hind Ⅲ多态性、Ser447Ter多态性及-93T/G基因突变的方法。方法:5μl Hind Ⅲ多态性或-93T/G基因突变的PCR产物和5μl甲酰胺变性液混匀变性,室温下用8％的聚丙烯酰胺凝胶电泳后银染。5μl Ser447Ter多态性的PCR产物和2μl甲酰胺变性液混匀变性,25℃左右用8％的聚丙烯酷胺凝胶电泳后银染。结果:PCR-SSCP成功检出LPL的Hind Ⅲ多态性、Ser447Ter多态性及-93T/G基因突变,并检出第9内含子50位一个G碱基缺失和启动子区域-85位一个C-T碱基置换即-85C/T。同时PCR-RFLP验证了200例标本的PCR-SSCP检测结果,两种方法检测已知基因变异时的结果完全一致。结论:PCR-SSCP法既能检测已知的LPL基因变异,也可检出未知的LPL基因变异,是临床实验室开展基因诊断的一种简便、有效的方法。

乳房癌实验室检测指标的进展

乳房癌是最常见的女性肿瘤之一.据统计1980年世界上新发病例数为572,000例,占妇女所有新发癌症的18%.虽然乳房癌在不同地区的国家中发病率有所不同,发达国家较高(如美国每年标化发病率为85/10万),而发展中国家则较低(如上海市肿瘤研究所统计 1989年上海市市区女性乳房癌发病率为34.4/10万,标化发病率为28.1/10万,但是乳房癌的发病率和死亡率在全球有着普遍上升的趋势.控制乳房癌的发生和死亡率,就要靠早期诊断、治疗等措施来配合.目前,诊断乳房癌的方法很多,如组织切片、乳房X光摄影、肿瘤标志物、激素及受体检测等,本文就诊断乳房癌的一些实验室指标进行探讨如下:

乳腺病变细胞核仁组成区嗜银蛋白与血清晨粘蛋白关系的研究

本文对２０例乳腺浸润性导管癌，２５例乳腺纤维腺瘤，３０例乳腺小叶增生的病理组织细胞进行图像分析，主要定量测定核仁组成区嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲｓ）颗粒的数目、面积和核面积；再利用Ｐ５３、Ｃ－Ｎｅｕ单抗进行组织细胞的免疫组化测定，同时用ＥＬＩＳＡ方法测定患者外周血清层粘蛋白（ｌａｍｉｎｉｎ，ＬＮ）。结果发现：在病变细胞内，ＡｇＮＯＲｓ颗粒面积和核面积的比值不但在各病变组与正常乳腺组织有显著性差异（Ｐ＜０．０５），而且与Ｐ５３、Ｃ－Ｎｅｕ之间也有一定相关性，随着肿瘤的恶化和浸润程度的改变，细胞外间质物质之一的层粘蛋白的含量也会有一定范围的变化，提示肿瘤细胞内蛋白异常增殖，ＡｇＮＯＲｓ颗粒变化不但与细胞基因调控失常有关，也直接影响细胞外间质ＬＮ的含量变化，使得血清中ＬＮ含量增高。从而发现细胞内ＡｇＮＯＲｓ颗粒数和血清ＬＮ二者之间存在一定的相关性（ｒ＝０．９２）。这将为乳腺细胞的病变、恶化、浸润的实验诊断提供了一定的依据。