RNA干扰技术在肿瘤研究中的应用

RNA干扰 (RNAi)是近几年发展起来的一种阻抑基因表达的新方法 ,它通过双链RNA的介导 ,特异性地阻断或降低相应基因的表达。目前 ,随着RNAi分子机制研究的不断深入 ,作为研究功能基因组有力工具的RNAi技术 ,有可能选择性地抑制人类疾病相关基因的表达 ,从而为肿瘤等人类疾病基因治疗带来新的希望。

凝血酶敏感蛋白2在肿瘤中的研究进展

凝血酶敏感蛋白2(TSP-2)是凝血酶敏感蛋白家族中的一员,是有效的内源性肿瘤微血管生成抑制剂。在体外试验、动物实验及临床肿瘤的研究中,发现TSP-2的表达与肿瘤微血管生成、肿瘤细胞的黏附和侵袭都有密切的关系。现综述TSP-2在肿瘤研究和治疗中的新进展。

RNAi在胃癌研究中的应用

转录后基因沉默,也称为RNA干扰,是近年来出现的一种新技术,由于它能特异而有效地阻断靶基因的表达,目前被广泛地应用于各种肿瘤的研究,在胃癌方面,针对幽门螺旋杆菌感染与胃癌发病的相互关系、胃癌化疗的多药耐药问题、胃癌相关基因功能以及胃癌的治疗等方面都有许多积极的研究探索。虽然这一技术应用于临床尚不成熟,但它在胃癌的治疗方面仍然具有诱人的应用前景。

错配修复基因hMSH2在乳腺癌中的表达及意义

错配修复基因是限制其他生长调控基因突变的一类高度保守的基因[1],hMSH2是其中的一种,它与细菌中MutS基因同源,位于染色体人类2p22-21,其mRNA长7.3kb,含16个外显子,编码100kDa的蛋白质[2].

毛细管电泳联合激光诱导荧光技术检测结直肠癌hMLH1基因突变

目的 建立毛细管电泳 (CE)联合激光诱导荧光检测 (LIF)技术 ,分析单链构象多态性 (SSCP) ,检测人结直肠癌hMLH1基因点突变的方法。方法 PCR扩增 4 2例散发性结直肠癌患者与 2 0例健康志愿者外周血基因组DNAhMLH1基因 12外显子 ,采用CE LIF进行SSCP分析 ,对异常片段进行测序鉴定 ;研究不同筛分介质 (线性聚丙烯酰胺LPA)浓度、分离温度与分离电压对CE行为的影响。结果 4 2例患者中有 4例 (9.5 2 % )突变 ,CE测序证实为T115 1A的杂合子点突变 ;2 0例健康志愿者未发现突变。较高浓度的LPA(4 %～ 6 % ) ,2 0℃分离温度与 9kV分离电压有助于单链DNA峰分离。结论 调整适宜的LPA浓度、分离温度与分离电压可提高CE分析SSCP的效率 ,应用CE LIF技术SSCP分析检测hMLH1基因点突变快速、高效、重复性好 。

内镜超声检查对胃癌术前评估淋巴结状况的价值

目的 :探讨内镜超声检查 (EUS)对胃癌淋巴结状况术前评估的价值。方法 :对 12 4例经胃镜活检证实的胃癌病人术前行内镜超声检查 ,并与手术病理对照。结果 :EUS对胃癌淋巴结状况的判断准确度、淋巴结转移的敏感度和特异度分别为 82 .1%、76 .3%和 89.4 %。EUS对胃癌N分期的准确度 6 5 .1% ,其中N0 89.4 %、N1 6 4 .3%、N2 2 9.0 % ,且其对T1 T2 和T3 T4 期胃癌N分期的准确度分别为 82 .4 %和 4 9.1% ,具有统计学意义 (χ2 =10 .0 8,P <0 .0 0 1)。EUS对胃周转移淋巴结的检出率为 2 6 .4 % ,且转移淋巴结直径越大 ,其检出率也越高。同时 ,EUS对各组淋巴结转移的敏感度为37.8% ,其中对第 3组的敏感度达 71.1% ,与总体敏感度相比具统计学意义 (χ2 =16 .6 7,P <0 .0 0 1)。结论 :内镜超声检查对胃癌术前评估淋巴结状况具较高的临床应用价值。

肿瘤干细胞与实体肿瘤

人急性粒细胞性白血病干细胞(LSC)的分离、鉴定及功能研究认为肿瘤起源于干细胞,是一种干细胞疾病.虽然有证据表明,实体肿瘤也存在类似的肿瘤干细胞,但基于条件限制长久以来没有得到分离鉴定.最近具有自我更新和分化能力以及特异表面标志的乳腺癌、脑肿瘤干细胞相继被分离鉴定,提出实体肿瘤是干细胞疾病的理念,认为肿瘤是功能异质性的,只有小部分肿瘤干细胞才有成瘤及维持恶性显型的作用,因此肿瘤的治疗关键应是针对肿瘤干细胞的治疗,这对传统的肿瘤治疗方式提出了巨大的挑战.作为新课题,实体肿瘤干细胞的起源、研究方法、研究内容及进一步研究方向尚需探讨,但是肿瘤干细胞研究对实体肿瘤发生发展机制的阐明、治疗新靶点的发现等将产生深远影响.

加热抗原修复对胃癌组织中内源性生物素样分子活性的影响

目的 :探讨加热抗原修复对甲醛固定石蜡包埋胃癌组织中内源性生物素样分子活性的影响。方法 :采用煮沸法、免疫组织化学 SP染色法及抗生物素蛋白 -生物素依次处理法 ,对 10例甲醛固定石蜡包埋胃癌标本内的内源性生物素样分子的活性进行检测。结果 :1经甲醛固定和石蜡包埋的胃癌组织中内源性生物素样分子被灭活 ;2加热抗原修复显著增强内源性生物素样分子的活性 ,同时 ,内源性生物素样分子仅见于癌细胞胞浆中而未见于间质细胞 ;3抗生物素蛋白 -生物素依次处理法可封闭内源性生物素样分子。结论 :加热抗原修复可显著增强甲醛固定石蜡包埋胃癌组织中内源性生物素样分子的活性 ,而为避免其对正常免疫组织化学染色的影响 ,可采用抗生物素蛋白 -生物素依次处理法或运用非生物素检测系统。

Dukes A、B期大肠癌淋巴结微转移的检测及其对预后的影响

目的:探讨Dukes A、B期大肠癌淋巴结微转移的检测和淋巴结微转移对预后的影响。方法:于前瞻性研究31例行根治性手术的Dukes A、B期大肠癌病人,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测所清除的398枚淋巴结中细胞角蛋白(cytokeratin,CK)20 mRNA的表达以检出微转移;经5年以上的随访,探讨淋巴结微转移对预后的影响和术后复发的可能原因。结果:在31例Dukes A、B期大肠癌病人的398枚淋巴结中,有15例(48.39%)共46枚(11.56%)淋巴结检出微转移。单因素分析提示微转移的淋巴结数量、位置及肿瘤生长方式与术后复发有关;Logistic多元回归模型提示,3枚以上淋巴结发生微转移与复发紧密联系。结论:CK20 RT-PCR是检测Dukes A、B期大肠癌淋巴结微转移灵敏而特异的方法。3枚以上淋巴结发现微转移是预示复发的独立因素。

胃癌神经旁浸润的临床意义

目的 :探讨胃癌神经旁浸润 (perineural invasion,PNI)的临床意义。方法 :对 132例行胃癌根治术病例的胃癌组织的石蜡标本行苏木素 -伊红 (HE)染色。当肿瘤细胞浸润神经束或神经束膜时 ,判断为 PNI阳性 ,并进一步分析PNI与胃癌临床病理特征的关系。结果 :PNI在 5 1.5 %的病例中呈阳性。PNI与 L auren分类 (P<0 .0 1)、肿瘤大小 (P<0 .0 1)、浸润深度 (P<0 .0 0 1)、淋巴结转移 (P<0 .0 0 1)、淋巴管浸润 (P<0 .0 0 1)和 TNM分期 (P<0 .0 0 1)密切相关。但PNI与患者年龄、性别、肿瘤位置和血管浸润均无关。结论 :胃癌神经旁浸润与肿瘤的进展密切相关 ,其可能有助于判断胃癌患者的预后 。

Kallikrein 10基因及类固醇激素与恶性肿瘤

Kallikrein 10(KLK10)是新近发现的Kallikrein家族成员之一,编码一分泌性丝氨酸蛋白酶(hK10)。KLK10在乳腺癌、前列腺癌与睾丸癌表达下调或完全缺失,而在卵巢癌中呈异常高表达。最近研究发现,KLK10与KLK6、KLK8在胃癌、结直肠癌组织中呈平行高表达,且受类固醇激素调控。提示KLK10可能作为类固醇激素下游靶点,参与肿瘤发生发展。

胰腺癌微血管的生成机制及其抑制剂的作用

肿瘤微血管生成在胰腺癌的发生转移过程中起重要作用 ,血管内皮生长因子、表皮生长因子、碱性纤维母细胞生长因子等血管生长因子和基质金属蛋白酶反映肿瘤微血管的生长 。

术前评估胃癌淋巴结状况的方法及其临床意义

胃癌诊治的难点在于区域淋巴结状况的准确评估及其合理性的手术清扫,这直接影响胃癌的预后。目前,术前评估胃癌淋巴结状况的方法虽多,但均未令人满意,本文就其评估方法的新进展及其临床意义作一综述。

RNA干扰技术在胃癌中的应用

RNA干扰(RNAi)是近几年发展起来的一种阻抑基因表达的新方法,它是一个自然存在的以双链RNA为中介降解具有相同序列RNA的机制。目前,随着其分子机制研究的不断深入,RNAi技术已广泛应用于许多研究领域,尤其是在肿瘤方面,取得了一些突破性进展,为今后肿瘤基因治疗开辟了一条新的途径。

内镜超声检查和多层螺旋CT对胃癌术前T、N分期的比较研究

目的探讨内镜超声(endoscopicultrasonography,EUS)与多层螺旋CT(multi slicespiralCT,MSCT)在胃癌术前T、N分期中的临床应用价值。方法2000年10月至2002年5月,对89例活检证实的胃癌病人术前分别行内镜超声和多层螺旋CT检查,并与手术病理结果对照。结果EUS对胃癌术前T分期的准确率为75.6%,其中T176.5%,T268.8%,T384.4%,T464.7%;MSCT分别79.3%,58.8%,62.5%,90.6%和94.1%。两者差异无统计学意义(P>0.05)。EUS对胃癌术前N分期的准确率为57.5%,其中N095.8%,N145.8%,N232.0%;MSCT分别78.1%,70.8%,75.0%和88.0%。EUS和MSCT对胃癌淋巴结转移的敏感性分别为61.2%和91.8%。EUS对N0分期的准确率显著高于MSCT(P<0.05),MSCT对N和N2分期的准确率及淋巴结转移的敏感性均显著高于EUS(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。结论内镜超声检查与多层螺旋CT对胃癌术前TN分期均有较高的准确性。

内镜超声检查在早期胃癌术前分期的应用

目的 探讨内镜超声检查 (EUS)在早期胃癌术前分期中的临床应用价值。方法 对14 9例经胃镜活检证实的胃癌患者 (其中早期胃癌 33例 )术前行内镜超声检查 ,并与术后病理检查结果对照。结果 EUS对胃癌T分期的准确率为 80 .3% ,其中T1期为 81.8% ,T2期为 70 .4 % ,T3期为88.9% ,T4期为 71.4 %。EUS鉴别早期和进展期胃癌的准确率达 95 .1% ,而鉴别胃黏膜和黏膜下癌的准确率仅为 6 3.6 %。EUS对黏膜和黏膜下癌的判断准确率分别为 5 2 .9%和 75 .0 % ,而阳性预测值分别达 90 .0 %和 70 .6 %。EUS对隆起型和平坦型早期胃癌浸润深度的判断准确率均为 10 0 % ,对凹陷型的准确率仅 5 8.6 % ;对分化型和未分化型早期胃癌浸润深度的判断准确率分别为 71.4 %和5 7.9% ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。EUS对早期胃癌浸润深度的判断准确率随着肿瘤直径的增大而降低 ,对早期胃癌淋巴结状况的判断准确率为 90 .9% ,对淋巴结转移的敏感性和特异性分别为 6 6 .7%和 96 .3%。结论 内镜超声检查对早期胃癌术前分期具有较高的临床应用价值。

再手术治疗局部复发性直肠癌78例临床分析

目的 探讨局部复发性直肠癌再手术的适应证及影响再手术的因素。方法 上海第二医科大学附属瑞金医院外科 1993年 10月至 2003年 10月收治的 78例复发性直肠癌再手术前均行放疗,对其疗效进行回顾性分析。结果 78例中,根治性切除 32例,姑息性切除 46例,根治切除率为 41 .03%。手术死亡 2例,手术死亡率为 2 .56%。根治性手术组和姑息性手术组中位生存期分别为 35 .8个月和 12. 4个月。结论 再手术结合术前放疗是局部复发性直肠癌的首选治疗方法。

尿核苷检测在结直肠癌诊断与手术治疗监测中的应用

目的探讨尿核苷检测对结直肠癌的诊断价值及在手术治疗监测中的应用。方法采用反相高效液相色谱法检测经结肠镜与活检病理证实的52例结直肠癌患者术前1天与术后第8天尿中14种正常与修饰核苷水平,同时以62例健康人作为对照组,并与传统肿瘤标记物癌胚抗原(CEA),CA199,CA125,甲胎蛋白(AFP)相比较,探讨尿核苷与结直肠癌临床病理特征的关系。结果结直肠癌组14种核苷中假尿嘧啶核苷(Pseu),腺嘌呤核苷(A),胞嘧啶核苷(C),1甲基腺苷(m1A),1甲基次黄嘌呤核苷(m1I),3甲基尿苷+5甲基尿苷(mU),2,2二甲基鸟苷(m22G),次黄嘌呤核苷(I),1甲基鸟苷(m1G),N4乙酰胞苷(ac4C),6甲基腺苷(m6A)等11种核苷水平显著升高,与正常对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05);通过主成分分析,76.9%(40/52)的结直肠癌患者被正确识别,敏感性与传统标记物CEA(38.5%),CA199(40.4%),CA125(15.4%),AFP(17.3%)相比差异有统计学意义(均P<0.01);Pseu与m1G的受试者操作特征曲线下面积分别达到0.896与0.816;对8种核苷(Pseu,m1A,m1I,m22G,I,m1G,ac4C,m6A)进行逐步判别分析,发现Pseu、m1G在判别分析中有统计学意义,建立判别函数Y正常人=-3.009+0.0272×Pseu+4.918×m1G,Y结直肠癌=-8.057+0.0667×Pseu+8.258×m1G;40例结直肠癌患者的Pseu,C,U(尿嘧啶核苷)