面对疾病,医者要保持勤奋和谦虚——访上海市第十人民医院眼科主任汪朝阳

汪朝阳上海市第十人民医院眼科主任,主任医师、医学博士、博士后,博士研究生导师。中华眼科学会眼外伤学组委员,中国医师协会眼科学分会青年委员,上海市医学会眼科学会玻璃体视网膜学组副组长。目前主持国家自然科学基金3项,上海市启明星、上海市浦江人才计划等科研课题11项,以第一或通信作者共发表SCI收录论文20余篇。

老年人群中视听障碍对主观幸福感的影响:抑郁倾向的中介作用

目的探讨视听障碍(audio-visual impairments)对主观幸福感(subjective well-being,SWB)的影响,以及抑郁倾向是否中介了视听障碍与主观幸福感之间的关联。方法中国健康与退休纵向调查(The China Health and Retirement Longitudinal Survey,CHARLS)对45岁及以上的中老年人进行问卷调查,在全国30个省级行政单位中采用多阶段抽样,分别在县(区)-村(居)-家户-个人层面上进行抽样,并在县(区)-村(居)两级抽样中,采用按人口规模成比例的概率(proportional probability sampling,PPS)抽样,最终纳入了28个省份150个县(区)的450个村/社区。本研究基于2018年的CHARLS数据展开研究,纳入标准为:(1)年龄≥60岁;(2)有完整的自我报告的视力和听力状况;(3)至少含有生活满意度、主观期望寿命、自评健康状况3项主观幸福感指标中的一个。CHARLS使用Likert五分量表测定老年人的主观幸福感,使用10项流调中心抑郁自评量表(the Center for Epidemiology Studies Depression Scale-10,CESD-10)测定老年人的抑郁倾向。本研究采用多元回归分析视听障碍与抑郁倾向、主观幸福感之间的关联,并通过中介模型分析抑郁倾向的中介作用。双侧P值<0.05被认为有统计学意义。结果最终纳入符合标准的研究对象7620人。其中有视听障碍的患者抑郁倾向水平明显更高,主观幸福感的三项指标均较低(P值均小于0.05)。视觉障碍、听觉障碍和视听双重障碍与更高的抑郁倾向水平和更低的自评健康、主观期望寿命有关;视觉障碍和视听双重障碍与较低的生活满意度有关。抑郁倾向在视听双重障碍与生活满意度间及视觉障碍、听觉障碍、视听双重障碍与自评健康和主观期望寿命间起部分中介作用。结论在中国老年人群中,视听障碍与较低的主观幸福感状态有关,抑郁倾向在其中起着中介作用。

不同光谱组成的人工照明对视网膜色素上皮细胞的影响

目的探讨不同光谱组成的人工照明对视网膜色素上皮(RPE)细胞的影响。方法将体外培养的ARPE⁃19细胞随机分组:无光照对照组、非全光谱照明组(细分为300 lx、600 lx两个亚组)、全光谱照明组(细分为100 lx、300 lx、600 lx、900 lx四个亚组),无光照对照组细胞避光培养,其他组细胞采用相应光谱和光照强度干预。将分组光照24 h、48 h、72 h后的ARPE⁃19细胞置于倒置荧光显微镜下观察细胞形态变化;CCK⁃8法检测细胞活力;线粒体膜电位法检测线粒体功能。结果光学显微镜下可见,光照72 h后,各组细胞密度明显增大,细胞大小不一,细胞多边形不典型;全光谱照明组细胞较非全光谱照明组细胞形态规整,异形细胞数少。光照24 h后,与无光照对照组相比,非全光谱照明300 lx组,全光谱照明300 lx、600 lx、900 lx组细胞活力均降低(均为P<0.05)。全光谱照明900 lx组细胞活力高于非全光谱照明300 lx组(P<0.05)。光照48 h后,各组细胞活力较光照24 h时提高;全光谱照明100 lx、300 lx组细胞活力低于非全光谱照明600 lx组(均为P<0.05)。光照72 h后,非全光谱照明300 lx、600 lx组,全光谱照明100 lx、300 lx组细胞活力低于无光照对照组(均为P<0.05);全光谱照明300 lx、600 lx、900 lx组细胞活力高于非全光谱照明300 lx、600 lx组(均为P<0.05)。光照24 h后,非全光谱照明600 lx组ARPE⁃19细胞线粒体膜电位相对荧光强度低于无光照对照组(P<0.05);全光谱照明100 lx、600 lx、900 lx组ARPE⁃19细胞线粒体膜电位相对荧光强度高于非全光谱照明600 lx组(均为P<0.05)。光照48 h后,除全光谱照明100 lx组外,其余各光照组ARPE⁃19细胞线粒体膜电位相对荧光强度均低于对照组(均为P<0.05);全光谱照明100 lx、600 lx、900 lx组ARPE⁃19细胞线粒体膜电位相对荧光强度高于非全光谱照明300 lx组(均为P<0.05)。光照72 h后,非全光谱照明300 lx、600 lx组,全光谱照明300 lx组ARPE⁃19细胞线粒体膜电位相对荧光强度均低于对照组(均为P<0.05);全光谱照明600 lx组ARPE⁃19细胞线粒体膜电位相对荧光强度高于非全光谱照明300 lx组(P<0.05);全光谱照明100 lx、600 lx、900 lx组ARPE⁃19细胞线粒体膜电位相对荧光强度高于非全光谱照明600 lx组(均为P<0.05)。结论全光谱照明相对于非全光谱照明对ARPE⁃19细胞损伤更小。

视网膜神经节细胞氧化应激损伤的药物治疗研究进展

氧化应激是机体内氧自由基的产生与清除的稳态失衡,导致细胞和组织的氧化损伤。氧化应激损伤在青光眼、缺血性视神经病变等眼科疾病中发挥着重要的作用,活性氧可以通过氧化应激损伤导致视网膜神经节细胞(RGCs)凋亡、坏死,进而引起不可逆的视功能损害。因此,抗氧化药物在治疗RGCs氧化损伤等致盲眼病中显示出潜在的优势。本文综述了RGCs氧化应激损伤的机制,归纳了化学合成药物和天然药物防治RGCs氧化损伤的研究进展,以期为RGCs氧化损伤相关疾病的治疗提供更好的参考。

超敏C反应蛋白及血同型半胱氨酸与2型糖尿病视网膜病变的关系

目的探讨2型糖尿病患者血同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)、超敏C反应蛋白(high sensitive C-reactive protein,hsCRP)水平同糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)之间的关系。方法将212例2型糖尿病患者分为3组:无糖尿病视网膜病变组(NDR)102例,背景型糖尿病视网膜病变组(BDR)66例,增生性糖尿病视网膜病变组(PDR)44例;分别测定各组间的Hcy和hsCRP水平,并对血脂、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素敏感指数(ISI)、病程(HI)、体质量指数(BMI)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素敏感指数(ISI)等参数进行测定,比较各组参数的差异及DR和Hcy、hsCRP的相关性。结果 BDR组、PDR组hsCRP和Hcy显著高于NDR组(均为P<0.01),PDR组hsCRP、Hcy也高于BDR组(均为P<0.05),DR同hsCRP、Hcy、HI、TC(r值分别为0.615、0.556、0.356、0.252,P值分别为<0.01、<0.01、<0.05、<0.05)呈正相关,PDR组hsCRP与TG、FINS、HI(r值分别为0.552、0.452、0.382,P值分别为<0.01、<0.01、<0.05)呈正相关,与ISI呈负相关(r=-0.512,P<0.01);PDR组Hcy与TG、TC、FBG、BMI(r值分别为0.752、0.652、0.512、0.432,均为P<0.01)呈正相关,与ISI呈负相关(r=-0.312,P<0.01);PDR组Hcy水平与hsCRP呈正相关(r=0.344,P<0.05)。结论 2型糖尿病伴DR者Hcy和hsCRP水平升高,PDR患者Hcy和hsCRP较BDR患者升高。Hcy和hsCRP可能是DR的危险因素,高Hcy可能使CRP水平升高进而引起DR。

白内障术后感染性眼内炎药物治疗进展

白内障术后感染性眼内炎是一种极具破坏性的并发症,对于可疑眼内炎或诊断明确的患者都应给予及时的治疗,包括药物治疗和手术治疗。药物治疗在眼内炎的治疗中起到了相当重要的作用。笔者对白内障术后感染性眼内炎的发病率、发病因素及致病菌进行分析,详细阐述了该疾病的药物治疗的进展,包括抗菌药物(抗生素及抗真菌药物)、激素及散瞳药物等的应用和给药途径的选择。

雷帕霉素眼膏的制备及其含量测定

目的探讨雷帕霉素(RAPA)眼膏制备方法并评价其性能。方法制备RAPA眼膏,评价眼膏性质,稳定性,刺激性,鉴别眼膏中有无RAPA存在,测定眼膏载药率。结果本实验可以制备出性质稳定,无刺激性,白色RAPA眼膏,pH7.0,高效液相色谱法(HPLC)可检测出RAPA眼膏色谱图主峰保留时间与对照品色谱图主峰保留时间一致,理论载药率及实际载药率为:5.14%、2.57146±0.62351%。结论 RAPA在眼膏基质中能完全溶解分布。本实验制得RAPA眼膏质地均一,性质稳定,使用安全,无刺激性,对眼表结构无损伤。

盐酸利多卡因眼用凝胶眼表麻醉的有效性及安全性评估——多中心随机双盲临床试验

目的评价质量分数3.5%盐酸利多卡因眼用凝胶眼部表面麻醉的有效性和安全性。方法采用多中心、随机双盲、安慰剂对照临床试验,于2018年8月至2019年4月在中国10个医院眼科按照统一的纳入和排除标准纳入一侧眼拟行眼科手术受试者220例220眼。采用随机数字表法将受试者随机平均分为对照组和试验组,所有受试者术眼对侧眼作为受试眼。试验组在受试眼6:00位角膜缘后约5 mm处点入2滴3.5%盐酸利多卡因眼用凝胶,对照组以同样方法点入空白凝胶。用药后在规定时间内用0.3 mm无齿显微镊夹持结膜进行疼痛测试,受试者依据自身感觉报告“疼痛”或“不疼痛”。主要有效性指标为用药5 min内获得眼表麻醉效果的眼数和百分比;次要有效性指标包括麻醉起效时间、眼表麻醉持续时间;药物安全性评价包括眼局部和全身不良反应发生率。结果试验组受试眼用药5 min内获得眼表麻醉效果者104眼,占94.55%,对照组5 min内获得眼表麻醉效果者29眼,占26.36%,试验组麻醉有效比例明显高于对照组,差异有统计学意义(χ^(2)=106.948,P<0.001);试验组受试眼中位麻醉起效时间为40.0(20.0,61.0)s,短于对照组的300.0(224.0,300.0)s,差异有统计学意义(Z=-15.17,P<0.001);试验组有效麻醉的104眼中麻醉维持时间平均为860.5(577.5,1180.0)s,对照组有效麻醉的29眼中麻醉维持时间平均为676.0(280.0,1401.0)s,差异无统计学意义(Z=0.898,P>0.05);2个组间不良反应发生率分别为5.45%(6/110)和4.55%(5/110),差异无统计学意义(P=1.000)。结论3.5%盐酸利多卡因眼用凝胶用于眼部表面麻醉时起效快,作用时间长,不良反应发生率低,是眼科手术中一种安全有效、使用方便的麻醉用药选择。

MMP-2和TIMP-2在激光诱导形觉剥夺的高度近视豚鼠脉络膜新生血管中的表达变化

目的构建高度近视豚鼠脉络膜血管新生(choroidal neovascularization,CNV)模型,探讨基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitor-2 of metalloproteinase,TIMP-2)在高度近视CNV形成中的作用。方法 72只2周龄三色豚鼠随机分为实验组(n=36)和对照组(n=36),实验组右眼行6周形觉剥夺诱导高度近视。两组各选取30只豚鼠右眼行532 nm激光光凝视网膜诱导CNV。于激光前和光凝后7、14、21、28、35天进行免疫组化观察光凝区域MMP-2和TIMP-2的表达,real-time PCR检测视网膜色素上皮层(retinal pigment epithelium,RPE)-脉络膜-巩膜复合物中的MMP-2和TIMP-2mRNA表达对MMP-2和TIMP-2免疫组化阳性表达的积分光密度值(integral optical desnsity,IDO)及mRNA相对表达水平进行统计学分析。结果激光光凝后实验组和对照组MMP-2和TIMP-2表达均明显上调,MMP-2于光凝后21天、TIMP-2于光凝后28天时表达高峰。激光前及光凝后各观察时间点,实验组MMP-2阳性表达和mRNA相对表达量均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);而激光前实验组TIMP-2表达较对照组明显减少(P<0.05),光凝后各时间点两组TIMP-2表达差异无统计学意义。结论MMP-2和TIMP-2与高度近视CNV形成密切相关,MMP-2与TIMP-2表达平衡紊乱可能参与高度近视CNV的发生发展。

脉络膜新生血管动物模型的研究进展

脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)是许多脉络膜视网膜疾病,如渗出性年龄相关性黄斑变性、高度近视性黄斑变性等发生发展中的重要病理机制。CNV动物模型的建立是研究这些疾病确切发病机理的重要前提。作者主要通过激光光凝术和视网膜下注射诱导两种方法对近年来CNV动物模型制作进展作一综述。

角膜移植术后眼压升高的临床分析

目的探讨角膜移植术后眼压升高的发病因素及防治措施。方法采用logistic回归分析法对307例(318只眼)角膜移植术后患者的资料进行回顾性分析,探讨其中60例(62只眼)(包括一过性眼压升高15只眼,继发性青光眼47只眼)术后眼压升高与疾病种类的关系,同时观察术后眼压升高的时间特点,并根据不同原因分别行药物或(和)手术治疗。结果无晶状体眼、术前青光眼、炎症期角膜溃疡、大泡性角膜病变眼角膜移植术后眼压升高发生率较高。治疗包括药物及手术疗法。62例眼中8例最终丧失视力,余54例均能较好的控制眼压。结论充分重视角膜移植术后高眼压,对高危病例的及时合理处置,能降低继发性青光眼的发生率。

槲皮素对转化生长因子β1介导的视网膜色素上皮细胞上皮-间质转化过程的影响

目的探讨槲皮素对转化生长因子β1(TGF-β1)介导的视网膜色素上皮(RPE)细胞增殖、迁移、I型胶原蛋白含量、上皮-间质转化相关标志物表达以及Smad信号通路的影响。方法取人RPE细胞系(ARPE^(-1)9细胞)进行培养,依据干预药物浓度筛选结果设置4个组对照组、10.0 mg·L^(-1)TGF-β1组、10.0 mg·L^(-1)TGF-β1+25μmol·L^(-1)槲皮素组、10.0 mg·L^(-1)TGF-β1+50μmol·L^(-1)槲皮素组,ARPE^(-1)9细胞在4种不同的条件下培养24 h和48 h。采用CCK-8法测定各组细胞活性,Transwell实验检测细胞迁移情况,ELISA检测细胞中I型胶原蛋白含量,Western blot检测各组细胞上皮-间质转化标志物表达情况及Smad2/3磷酸化情况。结果处理细胞24 h或48 h,10.0 mg·L^(-1)TGF-β1组细胞存活率均高于其他各组(均为P<0.05);10.0 mg·L^(-1)TGF-β1+25μmol·L^(-1)槲皮素组细胞存活率高于10.0 mg·L^(-1)TGF-β1+50μmol·L^(-1)槲皮素组(P<0.05)。处理细胞24 h或48 h,10.0 mg·L^(-1)TGF-β1组细胞迁移数均多于其他各组(均为P<0.05);10.0 mg·L^(-1)TGF-β1+25μmol·L^(-1)槲皮素组细胞迁移数多于10.0 mg·L^(-1)TGF-β1+50μmol·L^(-1)槲皮素组(P<0.05)。10 mg·L^(-1)TGF-β1处理细胞48 h后,培养基上清液I型胶原蛋白含量升高(P<0.05),而加入不同浓度槲皮素均能够有效抑制I型胶原蛋白含量的升高(均为P<0.05)。槲皮素以浓度依赖的方式显著降低了TGF-β1所引起的N-钙黏合素和α平滑肌肌动蛋白的表达增高作用;槲皮素可以使紧密连接蛋白ZO^(-1)和E-钙黏合素的表达增高。10 mg·L^(-1)TGF-β1处理细胞48 h后,Smad2/3磷酸化显著增加,而槲皮素可以抑制Smad2/3磷酸化。结论槲皮素能够显著抑制TGF-β1介导的RPE细胞增殖、迁移和胶原分泌,通过调节Smad2/3磷酸化来抑制TGF-β1介导的RPE细胞的上皮-间质转化过程。

正电子发射断层扫描术在兔眼神经受体成像的应用

目的采用正电子发射断层扫描术(positron emission tomography,PET)对家兔眼内的神经受体进行定量检测及成像。方法选择家兔16只随机分为4组(n=4),用PET来检测4种不同的神经受体:标记化合物[11C]raclopride测定多巴胺D2受体;[11C]CFT测定多巴胺载体;[18F]MPPF用于测定5-羟色胺受体;[11C]SA4503测定σ1受体。对每一组家兔在完成基线测定后,不改变体位,进行第2次测定。每组中的2只家兔在测定前注射拮抗剂进行预处理测定;另2只家兔在测定过程中注射拮抗剂进行置换测定。并且在PET测定后15min进行体外放射自显影术,比较二者的测定值。结果PET的基础测定中眼球组织和脑组织都成像,但眼球组织的放射能较脑组织中明显低下。除[18F]MPPF,预处理测定显示眼前段的摄取减少25%～28%。但是置换测定中,只有[11C]SA4503摄取减少了20%,[11C]raclopride有16%被阻断,[11C]CFT则没有明显变化。PET成像后的放射自显影术可以看出家兔眼内的神经受体主要聚集于视网膜和虹膜睫状体,且放射自显影术成像比PET成像信号清晰。结论在兔眼中PET中神经受体的结合率没有特异性。

Ranibizumab抑制碱烧伤诱导小鼠角膜新生血管作用观察

目的观察雷尼单抗(Ranibizumab)抑制碱烧伤诱导小鼠角膜新生血管(Cor NV)的作用。方法取清洁级BALB/c小鼠36只,将加有Na OH溶液(1 mol/L)的直径2 mm圆形滤纸片轻贴角膜中央烧灼30 s,制备角膜碱烧伤Cor NV模型:右眼接受碱烧伤处理,左眼不予处理。后随机将小鼠分为两组,于碱烧伤后2 d、8 d时右眼分别行球结膜下注射0.9%生理盐水(阴性对照组,18只小鼠)、10 mg/ml Ranibizumab(Ranibizumab治疗组,18只小鼠)。碱烧伤后4 d、7d、14 d时行眼前节照相大体观察Cor NV生长变化并计算Cor NV面积;分别于碱烧伤后7 d、14 d时行苏木素-伊红(HE)染色观察角膜组织病理结构及Cor NV变化;免疫组织化学(IHC)染色检测角膜HIF-1α、VEGF-A蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测角膜HIF-1αm RNA、VEGF-A m RNA表达。结果眼前节照相、HE染色结果显示:碱烧伤后7 d、14 d时Ranibizumab治疗组较阴性对照组角膜新生血管减少,细小稀疏,Cor NV面积明显减小,差异均有统计学意义(P<0.05)。PCR结果显示:Ranibizumab治疗组中角膜VEGF-A m RNA相对表达于7 d、14 d时均较阴性对照组降低,7 d时HIF-1αm RNA相对表达降低;差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫组化结果显示:Ranibizumab治疗组VEGF-A蛋白表达于7 d、14 d时较阴性对照组均降低,差异均有统计学意义(P<0.05);HIF-1α表达未明显改变。结论 Lucentis通过下调VEGF对碱烧伤诱导小鼠角膜Cor NV具有一定抑制作用。

角膜塑形镜治疗我国青少年低中度近视患者短期效果评价

目的：探讨角膜塑形镜（OK镜）对我国青少年低中度近视控制的有效性。方法：将青少年低中度近视患者271例271眼分为OK镜治疗组（141眼）和单光眼镜治疗组（130眼）。OK镜治疗组平均年龄9.43±1.10岁,等效球镜度数为-2.74±1.15D;戴镜后1、7、30、90d,12mo随访。单光眼镜治疗组平均年龄9.37±1.00岁,等效球镜-2.88±1.39D,戴镜后每6mo随访一次。观察比较OK镜组和单光眼镜治疗组眼轴增长情况。将OK镜组和单光眼镜治疗组分成小年龄组和大年龄组,进一步观察各年龄组儿童的近视发展情况。对相关数据进行配对t检验、独立样本t检验、卡方检验及Spearman相关分析。结果：OK镜组配戴角膜塑形镜1a后,眼轴的增长值为0.27±0.17mm,与戴镜前的眼轴长度有明显统计学差异（P〈0.01）;单光眼镜组1a后的眼轴增长值为0.38±0.13mm（P〈0.01）。两组眼轴增长有统计学差异,且OK镜组儿童眼轴增长比单光眼镜组慢28.9%（P〈0.01,独立样本t检验）。近视初始年龄与1a眼轴增长之间呈负相关（OK镜组：rs=-0.309,P〈0.01;单光眼镜组：rs=-0.472,P〈0.01）。小年龄儿童（7.0~9.4岁）中,眼轴增长较快（每年〉0.36mm）者在OK镜组占38%,而单光眼镜治疗组则增加到76.5%;而眼轴增长较快的大龄儿童（9.4~12.0岁）在OK镜组和单光眼镜治疗组所占比例分别为24.3%和12.9%。当等效球镜（spherical equivalent refractive errors,SER）介于5.00~6.00D时,OK镜组的眼轴增长比单光眼镜组慢57.1%。结论：OK镜对控制青少年低中度近视儿童近视发展有很好的效果,儿童的近视发展随着年龄的增加逐渐减慢,而OK镜对控制小年龄儿和较高度近视发展的效果更好。

烧灼睑板腺开口并摘除第三眼睑制作兔睑板腺功能障碍性干眼模型的评价

目的建立稳定的兔睑板腺功能障碍(MGD)性干眼模型。方法新西兰大白兔10只,采用灼烧睑板腺开口并摘除第三眼睑的方法制作兔MGD性干眼模型,造模后定期行SchirmerⅠ试验、眼表荧光素染色、结膜印迹细胞学检查和角膜结膜病理切片检查。取左眼造模为模型组,右眼为对照组。结果术后第1天裂隙灯下可见模型组兔眼睑板腺开口全部封闭。术后模型组SchirmerⅠ试验结果与对照组间及不同时间点间比较差异均无统计学意义(F=0.009,P=0.927;F=0.667,P=0.652);模型组术后第4天眼表荧光素染色评分开始升高(P<0.05),并随着时间推移呈稳步上升趋势,至术后32 d,模型组眼表均可见明显的片状荧光素着色;术后2周结膜印迹细胞学检查可见模型组结膜杯状细胞密度较对照组明显下降(P<0.05),并随着时间的推移呈持续下降趋势;术后第40天角膜结膜病理标本检查见结膜下炎性细胞浸润,角膜上皮完整性破坏。结论烧灼家兔睑板腺开口并摘除第三眼睑可建立稳定的兔MGD性干眼模型。

口服酪氨酸激酶抑制剂CM082对实验大鼠脉络膜新生血管的影响

目的建立脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)大鼠模型,观察药物酪氨酸激酶抑制剂CM082对CNV的影响。方法采用532 nm倍频激光视网膜光凝法制备棕色挪威(brown norway,BN)大鼠CNV模型。将50只光凝造模后大鼠随机分为对照组(n=25)、实验组(n=25)。造模7 d后给予实验组口服给药CM082 30 mg·kg-1·d-1,对照组造模后给予药物溶媒5 m L·kg-1·d-1。分别于造模后7 d及给药后7 d、14 d行眼底荧光血管造影(fundus fluorescein angiography,FFA)、组织病理学和视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)-脉络膜-巩膜铺片进行评估。结果 FFA结果显示,实验组给药后7 d、14 d光凝斑部位荧光渗漏强度(0.43±0.17、0.55±0.15)显著低于对照组(0.74±0.19、0.80±0.13),差异有统计学意义(P<0.05)。苏木精-伊红染色的CNV病理组织学显示,实验组中病变范围较小。免疫组织化学检查表明,CM082的治疗可以明显抑制p-VEGFR-2的表达。RPE-脉络膜-巩膜铺片显示,给药后7 d、14 d,实验组中CNV损伤区域为(4.26±0.93)×104μm2、(3.58±0.72)×104μm2,明显小于对照组(12.90±6.40)×104μm2、(17.81±5.34)×104μm2,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CM082口服给药30 mg·kg-1·d-1能有效抑制激光诱导的BN大鼠CNV病变。

缓激肽对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导视网膜色素上皮细胞发生上皮间充质转化的影响

目的制作增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)的上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transformation,EMT)细胞模型,研究缓激肽(bradykinin,BK)对视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞发生EMT的影响,并探讨BK对PVR的影响机制。方法体外培养人RPE细胞株ARPE-19细胞,采用不同浓度转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)分别作用于ARPE-19细胞24 h、48 h,于倒置显微镜下观察细胞形态变化;采用CCK-8检测细胞增殖情况,确定TGF-β1浓度及作用时间;利用Western blot和细胞免疫荧光检测EMT标志蛋白E-钙黏素、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和波形蛋白(Viminten)表达情况;细胞划痕实验、Transwell实验检测细胞迁移能力。同时采用Western blot检测TGF/Smad通路下游pSmad3和Smad7的表达。结果TGF-β1刺激ARPE-19细胞后可以成功诱导EMT体外细胞模型。当TGF-β1浓度为10μg·L^(-1)、作用时间为48 h时,细胞增殖最明显。BK在TGF-β1诱导的EMT中可以降低α-SMA、Viminten的表达,升高E-钙黏素的表达并且降低细胞迁移能力。这些影响能被BK-2受体拮抗剂HOE-140逆转。TGF-β1诱导ARPE-19细胞发生EMT时,pSmad3表达量升高;TGF-β1刺激前给予BK刺激,pSmad3表达量减少;加入BK前预敷HOE-140,然后给予TGF-β1刺激,BK作用减弱,pSmad3表达量升高。Smad7表达趋势与pSmad3表达趋势相反。结论10μg·L-1 TGF-β1可导致ARPE49细胞发生EMT。BK通过TGF-/Smad信号通路上调Smad7的表达、下调pSmad3的表达,从而逆转TGF-β1诱导的EMT。提示BK可能是一种新的、有效的治疗PVR的方法。

频域眼前节光学相干断层扫描仪(AS-OCT)对激光周边虹膜切开术后患者前房角结构定量检测

目的利用频域眼前节光学相干断层扫描仪(anterior segment optical coherence tomography,AS-OCT)检测原发性闭角型青光眼及原发性房角关闭眼激光周边虹膜切开术后的房角参数,并探讨测量参数的选择及在青光眼患者筛查与随访中的临床意义。方法选取原发性闭角型青光眼及原发性房角关闭患者共40例(55眼),其中原发性急性闭角型青光眼缓解期8例11眼,原发性急性闭角型青光眼临床前期20例(20眼),原发性房角关闭12例(24眼)。应用频域AS-OCT量化评价激光周边虹膜切开术后房角结构,测量上方、下方、鼻侧、颞侧前房角(anterior chamber angle,ACA)、小梁虹膜夹角(trabecular-iris angle,TIA)、房角开放距离(angle open distance,AOD)、小梁虹膜空间面积(trabecular iris space area,TISA),对检查结果进行分析。结果选取角膜内侧距巩膜突500μm和750μm的点,分别测量上方、下方、鼻侧、颞侧四个方位的AOD、TIA、ACA、TISA,归为500系列和750系列。500系列及750系列TIA、ACA、AOD测量值均值均为颞侧最大,鼻侧最小;TISA测量均值下方最大、上方最小。Pearson相关性分析显示TIA500和ACA500(r=0.799、P=0.00)、TIA750和ACA750(r=0.799、P=0.00)、TIA500和TISA500(r=0.919、P=0.00)、TIA750和TISA750(r=0.920、P=0.00)均具有正相关关系。以TIA500为自变量x,TISA500为因变量y,得回归方程y=-0.300+0.005x(F=1195,P=0.00),即TISA500与TIA500呈线性正相关关系。以TIA750为自变量x,TISA750为因变量y,得回归方程y=-0.440+0.009x(F=854,P=0.00),即TISA750与TIA750呈线性正相关关系。750系列参数的变异系数在四个方位均小于500系列。结论频域AS-OCT可用于原发性闭角型青光眼及原发性房角关闭患者术后的疗效评价与随访。在房角狭窄时,750系列参数变异系数更小,更具有临床应用价值。