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KDR基因重组的T7噬菌体疫苗构建及其对小鼠Lewis肺癌抑制作用的研究 被引量:2
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作者 孙红梅 唐亮 +6 位作者 刘岽 李晓慧 周彩存 谈立松 王丽萍 张培德 张尚权 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期970-974,共5页
目的:构建KDR基因重组的T7噬菌体疫苗以及探讨其对小鼠Lewis肺癌的抗肿瘤作用。方法:克隆KDR的膜外Ⅱ区基因,构建KDR基因重组T7噬菌体疫苗,免疫小鼠,免疫四次后接种Lewis肺癌,观察肿瘤的生长情况,14 d后脱颈椎杀死小鼠,眼球取血、取... 目的:构建KDR基因重组的T7噬菌体疫苗以及探讨其对小鼠Lewis肺癌的抗肿瘤作用。方法:克隆KDR的膜外Ⅱ区基因,构建KDR基因重组T7噬菌体疫苗,免疫小鼠,免疫四次后接种Lewis肺癌,观察肿瘤的生长情况,14 d后脱颈椎杀死小鼠,眼球取血、取出瘤体称重,计算抑瘤率,观察抗肿瘤效果。ELISA检测小鼠血清抗KDR抗体滴度。结果:实验组抑制程度明显,肿瘤生长速度最慢,肿瘤重量与生理盐水组和空白噬菌体组相比有统计学差异(P<0.05),抑瘤率可达57.0%,远大于空白噬菌体组(16.0%)。小鼠血清稀释至1∶500,小鼠特异性抗人源KDR抗体仍呈阳性。结论:KDR基因重组的T7噬菌体疫苗对小鼠Lewis肺癌具有明显的抗肿瘤作用,用人源KDR作为免疫原免疫小鼠通过免疫交叉反应可以打破对自身抗原的免疫耐受,产生特异性的免疫反应。 展开更多
关键词 肺肿瘤 血管内皮生长因子受体-2 噬菌体T7 癌症疫苗
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托瑞米芬联合顺铂对p53缺失型肺癌细胞株H1299生长抑制作用的研究 被引量:1
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作者 孟芹 丁兆军 +2 位作者 迟玉华 周彩存 粟波 《中国医药》 2012年第8期947-949,共3页
目的探讨托瑞米芬联合顺铂对人肺癌细胞株H1299细胞生长抑制作用及其机制,了解P糖蛋白在H1299细胞中的表达情况。方法本研究设空白组、对照组(单细胞悬液100ul)、实验组(单细胞悬液100ul+不同药物及浓度),实验组又分为托瑞米芬... 目的探讨托瑞米芬联合顺铂对人肺癌细胞株H1299细胞生长抑制作用及其机制,了解P糖蛋白在H1299细胞中的表达情况。方法本研究设空白组、对照组(单细胞悬液100ul)、实验组(单细胞悬液100ul+不同药物及浓度),实验组又分为托瑞米芬、顺铂和该2种药物联合组。用四甲基偶氮唑兰比色法检测托瑞米芬及与顺铂联用后H1299细胞的细胞增殖抑制率,分析其细胞周期的变化,检测P糖蛋白在H1299中的表达。结果托瑞米芬的浓度为20和40umol/L时的细胞增殖抑制率分别为(0.307±0.011)%和(0.634±0.007)%,与对照组(0.068±0.031)%比较,组间差异均有统计学意义(P〈0.01)。低剂量的托瑞米芬(5、10umol/L)联合不同浓度顺铂后的细胞增殖抑制率均高于单用顺铂组,并呈现浓度依赖性,组间比较差异有统计学意义(P〈0.05)。托瑞米芬与顺铂联用促进H1299细胞凋亡,呈现浓度依赖性。托瑞米芬与顺铂联用后,与单用顺铂组相比,H1299细胞周期发生明显变化,G0/G1期比例增加,S期细胞比例下降,检测出44.9%的H1299细胞有P糖蛋白的存在。结论低浓度的托瑞米芬(5、10umol/L)与顺铂联用对H1299细胞有明显的协同抗肿瘤效应,其机制可能与抑制细胞增殖、改变细胞周期分布、促进细胞凋亡有关,且这种作用不依赖于p53基因和雌激素受体。 展开更多
关键词 非小细胞肺 肿瘤细胞 培养的 化学疗法 肿瘤 P53 H1299细胞
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异种EGFR胞外区重组DNA疫苗与蛋白质疫苗抗小鼠Lewis肺癌的作用研究 被引量:2
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作者 吴永 张培德 +2 位作者 唐亮 谈立松 张尚权 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期195-200,共6页
目的:构建异种表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)胞外区重组DNA和蛋白质疫苗,观察其对小鼠Lewis肺癌的抗肿瘤作用。方法:克隆鸡源性EGFR胞外Ⅱ-Ⅲ区与IgG-Fc融合基因,构建重组DNA疫苗质粒pVAX1-cEGFR-Fc和原核... 目的:构建异种表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)胞外区重组DNA和蛋白质疫苗,观察其对小鼠Lewis肺癌的抗肿瘤作用。方法:克隆鸡源性EGFR胞外Ⅱ-Ⅲ区与IgG-Fc融合基因,构建重组DNA疫苗质粒pVAX1-cEGFR-Fc和原核表达质粒pET28a(+)-S-cEGFR-Fc,后者转化大肠杆菌,将诱导表达的重组蛋白作为蛋白质疫苗。免疫小鼠4次后接种Lewis肺癌细胞,19d后处死小鼠,剥离肿瘤称重并计算抑瘤率,检测小鼠血清中抗EGFR抗体效价,并检测特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxicity T lymphocyte,CTL)活性。结果:成功构建异种EGFR胞外区重组DNA和蛋白质疫苗。DNA疫苗组、蛋白质疫苗组和联合免疫组的抑瘤率分别为37%、49%和63%。3组小鼠均检测出抗EGFR抗体和CTL反应。结论:重组疫苗能打破机体对自身EGFR分子的免疫耐受,诱导特异性免疫反应,对小鼠Lewis肺癌有明显的抑制作用。2种疫苗的联合应用可进一步加强抑瘤作用。 展开更多
关键词 Lewis肺 受体 表皮生长因子 癌症疫苗 免疫疗法 主动
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EGFR基因重组T7噬菌体疫苗抗Lewis肺癌的实验研究 被引量:3
4
作者 曾宪卓 刘岽 +7 位作者 唐亮 周彩存 谈立松 蔡新华 李晓文 周军年 张培德 张尚权 《实验生物学报》 CSCD 北大核心 2005年第6期481-489,共9页
本研究中制备了表达表皮生长因子受体(EGFR)部分肽段的基因重组T7噬菌体疫苗,并开展了诱导小鼠产生内源性抗EGFR抗体的实验性抗肿瘤作用研究。由T7噬菌体展示系统将7个经筛选的异种属(人源、鸡源)EGFR膜外区片段展示在其壳体次要头蛋白(... 本研究中制备了表达表皮生长因子受体(EGFR)部分肽段的基因重组T7噬菌体疫苗,并开展了诱导小鼠产生内源性抗EGFR抗体的实验性抗肿瘤作用研究。由T7噬菌体展示系统将7个经筛选的异种属(人源、鸡源)EGFR膜外区片段展示在其壳体次要头蛋白(P10B)上,用所制备的基因重组噬茵体疫苗免疫小鼠,免疫4W后皮下接种Lewis肺癌细胞,10d后分离瘤体并称重,观察各实验组的抗肿瘤效果。Western Blot检测重组的融合壳蛋白均有EGFR抗原性:高表达EGFR的A431 细胞与免疫3W的小鼠抗血清结合并被荧光二抗标记,流式细胞仪检测法确认有抗EGFR抗体产生;各实验组肿瘤均重统计结果显示,P-CL1-670组、P-cp1-130组、P-cp2-136组、P-cp3-145组、 P-cp4-142组与空白噬菌体组差异性显著。说明表达EGFR的基因重组噬菌体疫苗诱导产生的内源性抗体.在一定程度上抑制了EGFR阳性肿瘤的生长.为诱导型内源性抗EGFR抗体的肿瘤靶向治疗研究开辟了新的途径。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 噬菌体疫苗 肿瘤治疗
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ERCC1、RRM1和BRCA1在非小细胞肺癌中的表达及预后意义 被引量:57
5
作者 陈芹 周彩存 张颉 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期719-722,共4页
目的:探讨DNA修复基因家族成员ERCC1、RRM1和BRCA1在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及预后意义。方法:应用实时荧光定量PCR技术对32例肺癌及16例癌旁组织中ERCC1、RRM1和BRCA1基因的mRNA进行定量检测。用非参数检验、相关分析、Kap lan-M ... 目的:探讨DNA修复基因家族成员ERCC1、RRM1和BRCA1在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及预后意义。方法:应用实时荧光定量PCR技术对32例肺癌及16例癌旁组织中ERCC1、RRM1和BRCA1基因的mRNA进行定量检测。用非参数检验、相关分析、Kap lan-M e ier生存曲线和COX多因素回归分析进行统计分析。结果:NSCLC中ERCC1、RRM1和BRCA1在癌组织内表达量显著高于癌旁组织,且在癌内表达具有正相关性;RRM1在肺鳞癌中高于腺癌,但在不同分期中表达无差异;ERCC1和BRCA1在不同病理类型和分期中表达均无差异;RRM1和BRCA1高表达组的生存期明显长于低表达组;COX多因素回归分析示RRM1表达是影响本组患者预后的独立因素。结论:NSCLC中,ERCC1、RRM1和BRCA1在肺癌组织中的表达显著高于癌旁组织,RRM1和BRCA1高表达组的生存期长于低表达组。RRM1和BRCA1可作为判断预后的一种指标。 展开更多
关键词 非小细胞肺 DNA修复酶类 基因表达 预后 ERCC1 基因 RRM1 BRCA1
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不同部位皮下注射DNA疫苗对小鼠体液免疫的影响 被引量:4
6
作者 王和勇 向阳 +1 位作者 唐亮 孙敏 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期89-94,共6页
主要探讨在小鼠不同部位皮下注射DNA疫苗对体液免疫应答的影响,为DNA疫苗在体内获得高滴度抗体提供优化条件.用RT-PCR从人肺癌细胞株A459中克隆VEGF片段,并插入pVAX1质粒构建pVAX1-VEGF真核表达质粒;在耳廓、胸部、腹部、尾跟部、背部... 主要探讨在小鼠不同部位皮下注射DNA疫苗对体液免疫应答的影响,为DNA疫苗在体内获得高滴度抗体提供优化条件.用RT-PCR从人肺癌细胞株A459中克隆VEGF片段,并插入pVAX1质粒构建pVAX1-VEGF真核表达质粒;在耳廓、胸部、腹部、尾跟部、背部及足垫的皮下注射1μg/μL pVAX1-VEGF疫苗DNA 100μL,ELISA法检测血清中VEGF抗原表达及其IgG抗体分布,测定血清中IgG2a和IgG1两亚型水平.实验结果发现:耳廓、胸部、腹部免疫产生的VEGF抗原较快,其中耳廓免疫产生的体液免疫最快最强,与胸部、腹部、背部、尾根及足垫免疫产生的体液免疫反应相比,具有统计学意义,同时pVAX1-VEGF疫苗组与pVAX1对照组的体液免疫差异显著,但pVAX1-VEGF疫苗组主要产生IgG2a型抗体.上述结果表明:所构建人VEGF的DNA疫苗能在小鼠体内有效表达,不同部位皮下免疫后均能产生抗VEGF的IgG抗体,以IgG2a抗体为主;但就抗原表达、抗体及IgG2a而言,以耳廓皮下接种最佳. 展开更多
关键词 皮下注射 DNA疫苗 体液免疫
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异种血管内皮生长因子基因重组T7噬菌体疫苗对小鼠Lewis肺癌的抑制作用 被引量:5
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作者 李晓慧 唐亮 +6 位作者 刘岽 孙红梅 周彩存 谈立松 王丽萍 张培德 张尚权 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1221-1226,共6页
背景与目的:肿瘤的生长、转移和新生血管生成有密切关系,血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)是已知作用最强、最专一的促血管生成因子。本实验采用噬菌体展示技术,构建人血管内皮生长因子重组T7噬菌体疫苗,并检验... 背景与目的:肿瘤的生长、转移和新生血管生成有密切关系,血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)是已知作用最强、最专一的促血管生成因子。本实验采用噬菌体展示技术,构建人血管内皮生长因子重组T7噬菌体疫苗,并检验疫苗对小鼠Lewis肺癌的抑制作用。方法:用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)从人肺癌组织克隆出人VEGF165基因,将人VEGF165基因与T7Select10-3b噬菌体基因重组,构建T7Select10-3b_VEGF噬菌体疫苗,制备噬菌体效价达到1×1013pfu/ml。将C57BL/6J小鼠随机分为3组,T7-VEGF疫苗组10只、空白噬菌体组(T7)10只、生理盐水组(NS)10只。将各组样品与等体积弗氏佐剂混合,各组小鼠每只每周分别免疫1×1012pfu/200!l重组噬菌体疫苗、空白噬菌体、生理盐水,共免疫4周。接种Lewis肺癌细胞,观察肿瘤的生长情况和小鼠状态.接种肿瘤14天后,处死小鼠,剥离肿瘤称重,检测小鼠血清中特异性抗VEGF抗体滴度、肿瘤微血管密度(microvesseldensity,MVD)。结果:T7-VEGF疫苗组,T7组、生理盐水组肿瘤均重分别为:(0.543±0.259)g、(0.982±0.359)g、(1.169±0.460)g。疫苗组肿瘤重量明显小于生理盐水组(P<0.01)。疫苗组血清产生抗VEGF抗体滴度为1∶1000。疫苗组、空白噬菌体组、生理盐水组MVD分别为:8.5±0.8,16.4±1.3,18.5±1.6。疫苗组MVD明显小于生理盐水组。结论:异种血管内皮生长因子基因重组T7噬菌体疫苗可干扰机体对自身VEGF的免疫耐受,可产生较高水平的特异性抗VEGF抗体,并具有抑制小鼠Lewis肿瘤生长的效应。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 噬菌体疫苗 肿瘤/免疫治疗 小鼠
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异种VEGF融合蛋白疫苗对小鼠Lewis肺癌的抑制作用 被引量:2
8
作者 刘倩 唐亮 +5 位作者 李英辉 周彩存 谈立松 赵玉军 张培德 张尚权 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期422-424,共3页
目的:利用原核表达系统,构建异源血管内皮生长因子融合蛋白疫苗,研究该融合蛋白疫苗对小鼠Lewis肺癌肿瘤模型的抗血管生成主动免疫治疗效果。方法:将鸡VEGF基因克隆入pGEX-4T-2原核表达载体,经IPTG诱导融合蛋白表达,Ni-NTA纯化,透析复性... 目的:利用原核表达系统,构建异源血管内皮生长因子融合蛋白疫苗,研究该融合蛋白疫苗对小鼠Lewis肺癌肿瘤模型的抗血管生成主动免疫治疗效果。方法:将鸡VEGF基因克隆入pGEX-4T-2原核表达载体,经IPTG诱导融合蛋白表达,Ni-NTA纯化,透析复性,构建GST-cVEGF融合蛋白疫苗。将C57BL16J小鼠随机分为3组,GST-cVEGF疫苗组10只、cVEGF疫苗组10只、生理盐水组(NS)10只。将各组样品与等体积弗氏佐剂混合,各组小鼠每只分别0、2、3周免疫100μgGST-cVEGF融合蛋白疫苗、单纯cVEGF蛋白疫苗、生理盐水。接种Lewis肺癌细胞,观察肿瘤的生长情况和小鼠状态。接种肿瘤18d后,处死小鼠,剥离肿瘤称重。检测小鼠血清中特异性抗VEGF抗体滴度。结果:GST-cVEGF疫苗组、cVEGF组、生理盐水组肿瘤均重分别为(1·55±0·534)g、(1·93±0·607)g、(2·87±0·642)g。GST-cVEGF疫苗组肿瘤重量明显小于生理盐水组(P<0·01)。疫苗组血清产生抗VEGF抗体滴度为1∶2000。结论:异种血管内皮生长因子基因重组融合蛋白疫苗可干扰机体对自身VEGF的免疫耐受,可产生较高水平的特异性抗VEGF抗体,并具有抑制小鼠Lewis肿瘤生长的效应。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 融合蛋白疫苗 肿瘤/免疫治疗 小鼠
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表皮生长因子受体为靶向重组T7噬菌体抗肿瘤疫苗的构建及免疫活性 被引量:2
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作者 蔡新华 曾宪卓 +4 位作者 张尚权 谈立松 唐亮 刘岽 周彩存 《细胞生物学杂志》 CSCD 2006年第2期217-222,共6页
利用RT-PCR技术从人A431细胞中克隆表皮生长因子受体(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)基因N端序列,经测序鉴定正确。将膜外序列不同功能及模拟抗原呈递较佳的亚克隆DNA片段插入T7噬菌体表达载体,从而构建了重组T7噬菌体抗肿瘤疫苗... 利用RT-PCR技术从人A431细胞中克隆表皮生长因子受体(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)基因N端序列,经测序鉴定正确。将膜外序列不同功能及模拟抗原呈递较佳的亚克隆DNA片段插入T7噬菌体表达载体,从而构建了重组T7噬菌体抗肿瘤疫苗并用于动物免疫注射,用斑点印迹(dotblot)和MTT法分别检测到特异性抗体和细胞毒性T淋巴细胞反应。结果显示,以噬菌体颗粒为载体的疫苗可以诱导体液免疫反应和细胞免疫反应。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 噬菌体展示技术 抗肿瘤疫苗 抗体 细胞毒性T淋巴细胞反应
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液态活检的研究进展 被引量:1
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作者 李雪飞 赵超 周彩存 《中国医学前沿杂志(电子版)》 2018年第7期1-7,共7页
由于转移性肿瘤内在的分子异质性以及肿瘤基因组的动态进化能力,使得通过活检等手段获取的肿瘤组织无法捕获肿瘤基因组的全部特征,一种新的诊断概念——"液态活检"在过去几年受到广泛关注。液态活检已然改变了肿瘤学的临床实... 由于转移性肿瘤内在的分子异质性以及肿瘤基因组的动态进化能力,使得通过活检等手段获取的肿瘤组织无法捕获肿瘤基因组的全部特征,一种新的诊断概念——"液态活检"在过去几年受到广泛关注。液态活检已然改变了肿瘤学的临床实践,通常用于指导靶向用药、监测疾病进展以及追踪药物耐药。目前正在评估基于血液分子谱检测在肿瘤早期诊断以及监测微小残留病灶中的应用价值。本文将着重关注肺癌液态活检的最新进展,从液态活检的样本类型、常用检测方法以及临床应用等方面进行阐述。 展开更多
关键词 肺癌 液态活检 基因突变
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环氧合酶-2mRNA在非小细胞肺癌组织中表达的临床意义
11
作者 高志强 唐亮 +1 位作者 粟波 周彩存 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期180-182,共3页
目的 探讨环氧合酶- 2(COX- 2)mRNA在非小细胞肺癌组织中表达的临床意义。方法 提取48 例非小细胞肺癌肿瘤组织及相应癌旁组织中的RNA,应用逆转录聚合酶链反应(RT -PCR)技术检测其中COX -2mRNA的表达。结果 COX -2mRNA在48例肿瘤组... 目的 探讨环氧合酶- 2(COX- 2)mRNA在非小细胞肺癌组织中表达的临床意义。方法 提取48 例非小细胞肺癌肿瘤组织及相应癌旁组织中的RNA,应用逆转录聚合酶链反应(RT -PCR)技术检测其中COX -2mRNA的表达。结果 COX -2mRNA在48例肿瘤组织中的表达率为75%,明显高于相应癌旁组织中的表达率6%;肺腺癌的COX -2 mRNA表达率为94%,高于肺鳞癌的表达率60%(P<0.05)。COX- 2 mRNA的表达率与患者性别、年龄、组织学分化程度、原发肿瘤及淋巴结转移等因素无明显相关,而与pTNM分期关系密切(P<0.05)。COX -2 mRNA的表达强度与患者性别、年龄、病理分型及组织学分化程度等无明显相关,而与原发肿瘤、淋巴结转移及pTNM分期的关系密切(P<0.05)。结论 非小细胞肺癌组织中COX -2 mRNA的表达在非小细胞肺癌的浸润、转移和发展中具有重要意义。 展开更多
关键词 非小细胞肺 环氧合酶-2 基因表达 逆转录聚合酶链反应
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重组EGFR噬菌体疫苗抗肿瘤效果的研究(英文)
12
作者 刘岽 唐亮 +1 位作者 周彩存 谈立松 《The Chinese-German Journal of Clinical Oncology》 CAS 2006年第3期189-193,共5页
目的构建重组EGFR噬菌体疫苗并且观察其抗肿瘤效果。方法将鸡源EGFR膜外部分的5个基因片段插入到T7噬菌体展示系统中,EGFR蛋白以融合蛋白的形式展示在噬菌体的外壳蛋白10B上,从而构建成噬菌体疫苗。Western blot方法检测噬菌体壳蛋白上... 目的构建重组EGFR噬菌体疫苗并且观察其抗肿瘤效果。方法将鸡源EGFR膜外部分的5个基因片段插入到T7噬菌体展示系统中,EGFR蛋白以融合蛋白的形式展示在噬菌体的外壳蛋白10B上,从而构建成噬菌体疫苗。Western blot方法检测噬菌体壳蛋白上是否有EGFR表达。利用ELISA方法检测免疫小鼠血清中抗EGFR抗体。分离免疫小鼠脾细胞,检测淋巴细胞对靶细胞A431的细胞毒作用。C57小鼠经过4次免疫,接种Lewis肺癌,记录肿瘤的生长情况,评价疫苗的抗肿瘤效果。结果本实验成功构建5种鸡源EGFR噬菌体疫苗。Western blot。显示噬菌体壳蛋白上有EGFR表达。免疫后的小鼠血清中检测到抗EGFR抗体。体外分离脾细胞证明免疫后的小鼠脾细胞对EGFR受体高表达的A431细胞具有杀伤作用。靶细胞和效应细胞的比例在1:10时,最大杀伤率可达(45.74±7.21)%(P<0.001)。肿瘤生长曲线显示免疫后的C57小鼠Lewis肺癌生长受到明显的抑制。结论利用噬菌体展示技术构建的噬菌体疫苗是一种有效的抗肿瘤方法。 展开更多
关键词 免疫治疗 重组因子 噬菌体 疫苗 肿瘤
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表皮生长因子受体靶向重组T7噬菌体抗肿瘤疫苗的免疫活性
13
作者 蔡新华 张钦宪 +2 位作者 唐亮 刘岽 谈立松 《新乡医学院学报》 CAS 2005年第3期188-191,194,共5页
目的探讨表皮因子受体为靶向,重组T7噬菌体疫苗在体诱导的免疫活性。方法用构建的重组T7噬菌体疫苗免疫动物,Dot-Blot和流式细胞仪检测产生的特异性抗体,MTT法检测产生的特异性杀伤肿瘤细胞活性。结果实验组动物均产生特异性抗体,与A43... 目的探讨表皮因子受体为靶向,重组T7噬菌体疫苗在体诱导的免疫活性。方法用构建的重组T7噬菌体疫苗免疫动物,Dot-Blot和流式细胞仪检测产生的特异性抗体,MTT法检测产生的特异性杀伤肿瘤细胞活性。结果实验组动物均产生特异性抗体,与A431细胞结合的阳性细胞率分别为37.6%、47.6%和35.1%;T7415-1b-90和T7415-1b-132实验组均诱导产生对A431细胞的特异性杀伤作用,检测的ODE+T与对照组相比具有显著性差异(P<0.01);T710-3b-638实验组对肿瘤细胞无杀伤作用。结论异源EGFR分子构建的重组T7噬菌体疫苗可以诱导机体产生体液免疫反应和细胞免疫反应。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 抗肿瘤疫苗 抗体 特异性细胞毒性反应
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核苷转运蛋白基因ENT3单核苷酸多态性与肺癌易感性的关系
14
作者 李雪飞 张颉 +1 位作者 张增利 周彩存 《中国肺癌杂志》 CAS 2010年第5期458-463,共6页
背景与目的核苷转运蛋白介导的核苷跨膜转运在调节细胞功能中发挥重要作用,可能是某些肿瘤的候选易感基因。本研究旨在探讨核苷转运蛋白基因ENT3单核苷酸多态性与肺癌易感性的关系。方法采用病例对照研究,收集2008年5月-2009年5月于上... 背景与目的核苷转运蛋白介导的核苷跨膜转运在调节细胞功能中发挥重要作用,可能是某些肿瘤的候选易感基因。本研究旨在探讨核苷转运蛋白基因ENT3单核苷酸多态性与肺癌易感性的关系。方法采用病例对照研究,收集2008年5月-2009年5月于上海市肺科医院就诊的原发性肺癌患者351例和同期住院的非肿瘤患者207例,应用AllGloTM探针结合实时荧光PCR方法分析肺癌组和对照组ENT3基因rs10999776多态位点的基因型分布情况,比较不同基因型与肺癌易感性的关系以及不同基因型联合吸烟对肺癌易感性的影响。肺癌组与对照组基因型和等位基因分布比较用χ2检验,以调整比值比及95%CI表示相对危险度,所有统计检验均为双侧概率检验,所有资料均用SPSS软件进行统计。结果肺癌患者rs10999776多态位点的CC、TC、TT基因型和C、T等位基因频率分布与对照组比较无统计学差异(P>0.05)。与非吸烟的野生型纯合子个体比较,携带突变等位基因T(TC+TT)的吸烟个体罹患肺癌的风险性明显增加,且吸烟≥30包/年者风险性更高,调整OR值分别为2.848(95%CI:1.536-4.879,P=0.005)、3.076(95%CI:2.308-6.741,P=0.001)。而对肺癌不同组织类型的分析发现,三种基因型的吸烟个体罹患肺鳞癌的风险性均增加,且携带突变等位基因T的个体风险性更高,调整OR值为6.066(95%CI:2.884-12.758,P<0.001)。而rs10999776(C>T)多态性联合吸烟对肺腺癌则无显著影响。结论核苷转运蛋白基因ENT3rs10999776多态性可能与肺鳞癌的发病风险相关,且与吸烟环境暴露存在一定的相互作用。 展开更多
关键词 核苷转运蛋白 单核苷酸多态性 探针 肺肿瘤 遗传易感性
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T7噬菌体表达巨细胞病毒PP65蛋白抗原的初步研究
15
作者 谈意隽 周彩存 +5 位作者 唐亮 刘岽 曾宪卓 孙宏彬 张钥 季育华 《临床输血与检验》 CAS 2006年第1期1-4,共4页
目的利用噬菌体展示技术构建巨细胞病毒基质蛋白PP65的抗原,初步评价其抗原性。方法PP65的基因片段经酶切后,与T7噬菌体的基因组相应酶切位点结合,借助包装蛋白组装成为完整的噬菌体。PP65目的蛋白以融合蛋白的形式表达在T7噬菌体的头... 目的利用噬菌体展示技术构建巨细胞病毒基质蛋白PP65的抗原,初步评价其抗原性。方法PP65的基因片段经酶切后,与T7噬菌体的基因组相应酶切位点结合,借助包装蛋白组装成为完整的噬菌体。PP65目的蛋白以融合蛋白的形式表达在T7噬菌体的头蛋白部位,每个噬菌体颗粒表面可表达5~15个拷贝。噬菌体可以在宿主细胞中快速繁殖,并且能够迅速裂解宿主细胞,使目的蛋白的富集达到很高的效率。人巨细胞病毒基质蛋白PP65可以激发机体强烈的免疫反应,运用T7噬菌体载体展示系统表达PP65的部分肽段,扩增噬菌体,以SDS-PAGE电泳和western-blot鉴定所表达的抗原特性。结果获得了重组T7-PP65噬菌体,通过鉴定,噬菌体表达在其头蛋白上的PP65抗原可以被天然PP65的单克隆抗体所识别。结论噬菌体展示技术可以有效地进行病毒蛋白抗原的表达,为抗原筛选和疫苗的研制提供科学依据。将PP65表达在T7噬菌体表面,可以研究其免疫原性及评估其作为疫苗的可能性。 展开更多
关键词 噬菌体展示 巨细胞病毒 PP65 抗原表位
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血管内皮生长因子基因重组T7噬菌体肿瘤疫苗的免疫活性
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作者 李晓慧 李燕 +5 位作者 唐亮 刘岽 孙红梅 王丽萍 周彩存 谈立松 《现代肿瘤医学》 CAS 2006年第6期641-643,共3页
目的:采用噬菌体展示技术,构建人血管内皮生长因子重组T7噬菌体疫苗,并检验疫苗诱导小鼠产生特异性抗体的免疫活性。方法:将人VEGF165基因与T7Select10-3b噬菌体基因重组,构建T7Select10-3b-VEGF噬菌体疫苗。将疫苗免疫C57BL/6J小鼠。免... 目的:采用噬菌体展示技术,构建人血管内皮生长因子重组T7噬菌体疫苗,并检验疫苗诱导小鼠产生特异性抗体的免疫活性。方法:将人VEGF165基因与T7Select10-3b噬菌体基因重组,构建T7Select10-3b-VEGF噬菌体疫苗。将疫苗免疫C57BL/6J小鼠。免疫4周后,用ELISA法检测免疫小鼠血清中特异性抗VEGF抗体滴度。结果:疫苗组血清产生较高水平抗VEGF抗体。结论:异种血管内皮生长因子基因重组T7噬菌体疫苗可打破机体对自身VEGF的免疫耐受,诱导产生较高水平的特异性抗VEGF抗体。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 噬菌体疫苗 肿瘤疫苗 抗体
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不同转移部位对广泛期小细胞肺癌患者治疗预后的影响 被引量:5
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作者 刘倩 乔梦 +6 位作者 毛士琦 杨硕 刘弋维 赵超 李雪飞 任胜祥 周彩存 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期45-51,共7页
背景与目的:小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)是肺癌中恶性程度最高的病理学类型,易发生远处转移,转移部位及肿瘤负荷对患者的预后有一定预测作用。比较不同远处转移部位及转移器官个数对广泛期SCLC患者预后的影响,以期为临床... 背景与目的:小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)是肺癌中恶性程度最高的病理学类型,易发生远处转移,转移部位及肿瘤负荷对患者的预后有一定预测作用。比较不同远处转移部位及转移器官个数对广泛期SCLC患者预后的影响,以期为临床决策提供参考。方法:收集2014年5月—2019年2月在同济大学附属上海市肺科医院就诊的广泛期SCLC患者的临床资料,回顾性分析其远处转移部位及转移器官个数与患者总生存期(overall survival,OS)及疗效的关系。结果:206例广泛期SCLC患者中,大部分(69.0%)患者在诊断初期就已发生远处转移,转移器官个数越多,中位OS越短(P=0.0079),中位无进展生存期(progression-free survival,PFS)也越短(P=0.0270)。脑转移、骨转移、对侧肺转移、肝转移及其他器官转移组中位OS分别为14.83、11.70、14.47、11.10及12.47个月(P=0.0311)。脑转移、骨转移、对侧肺转移、肝转移及其他器官转移组中位PFS分别为5.07、4.07、7.10、3.87及4.80个月(P=0.0336)。结论:广泛期SCLC患者远处转移提示预后差,转移器官个数越多,OS及PFS越差。在不同器官转移中,肝转移及骨转移患者OS及PFS较差,提示预后不良。 展开更多
关键词 广泛期小细胞肺癌 器官转移 生存时间
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异种表皮生长因子受体胞外段的表达及其抗肿瘤效果研究 被引量:1
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作者 李英辉 唐亮 +2 位作者 刘倩 陈德坤 谈立松 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1051-1054,共4页
目的:构建异种EGFR蛋白疫苗并研究其抗肿瘤效果。方法:用PCR方法获得鸡EGFR胞外片段,与pGEX-4T-2载体连接,并在E.coli BL21(DE3)中表达鸡的EGFR胞外片段与GST的融合蛋白,融合蛋白经Ni2+亲和层析柱纯化、复性后,免疫小鼠,免疫3次后,接种... 目的:构建异种EGFR蛋白疫苗并研究其抗肿瘤效果。方法:用PCR方法获得鸡EGFR胞外片段,与pGEX-4T-2载体连接,并在E.coli BL21(DE3)中表达鸡的EGFR胞外片段与GST的融合蛋白,融合蛋白经Ni2+亲和层析柱纯化、复性后,免疫小鼠,免疫3次后,接种小鼠Lewis细胞,观测肿瘤生长情况,ELISA检测小鼠血清中抗EGFR蛋白的抗体效价。结果:成功构建了EGFR胞外段基因的原核表达载体;SDS-PAGE显示成功表达了目的融合蛋白;融合蛋白免疫小鼠后,ELISA法检测到特异性抗EGFR抗体;实验组与对照组肿瘤体积的比较结果显示,融合蛋白疫苗能够在一定程度上抑制肿瘤的生长。结论:异种EGFR蛋白能够克服免疫耐受问题,诱导机体产生抗体,有一定的抗肿瘤效果,为后续的肿瘤疫苗研究打下了基础。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 胞外段 原核表达 抗肿瘤
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CYFRA21-1在肺癌诊断、疗效监测及预后观察的临床意义 被引量:22
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作者 潘惠忠 黄蓓琦 粟波 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1998年第1期47-49,共3页
目的:研究CYFRA21-1在肺癌诊断、疗效监测和预后观察的临床意义及应用价值。方法:选自本院的327例肺癌,297例肺部良性疾病的住院和门诊病人应用放射免疫分析法(IRMA)检测了CYFRA211的血清水平。结果... 目的:研究CYFRA21-1在肺癌诊断、疗效监测和预后观察的临床意义及应用价值。方法:选自本院的327例肺癌,297例肺部良性疾病的住院和门诊病人应用放射免疫分析法(IRMA)检测了CYFRA211的血清水平。结果:肺癌组水平169±84ng/ml,非肿瘤组水平19±16ng/ml,(P<0001)差异显著。肺癌阳性率624%,良性疾病阳性率5%。测定灵敏度为624%特异性为945%,准确率779%。肺癌病人随病期的增加,血清CYFRA211含量也随之上升(P<002)。对8例肺癌手术病人和10例化疗病人含量变化分析,在手术3周~5周后,血清含量由术前的64±31ng/ml,降到18±06ng/ml,10例化疗病人,其中8例血清含量均有降低,临床证实均有良好的治疗效果,另2例临床证实治疗无效,血清CYFRA211水平相应增高。结论:血清CYFRA21-1的水平与肿瘤病人的临床表现有直接的相关性。 展开更多
关键词 肺肿瘤 CYFRA21-1 角蛋白(CK)
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肺癌肿瘤标志物CYFRA21-1的临床应用及其评价 被引量:7
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作者 潘惠忠 黄蓓琦 粟波 《放射免疫学杂志》 CAS 1997年第6期327-329,共3页
应用免疫放射分析法(IRMA)检测327例肺癌,297例肺部良性疾病患者CYFRA21-1的血清水平,肺癌组水平16.9±8.4ng/ml,非肿瘤组水平1.9±1.6ng/ml(p<0.001)。肺癌阳性率62.4%,良性疾患阳性率5%。测定灵敏度为62.4%,特异性为94.... 应用免疫放射分析法(IRMA)检测327例肺癌,297例肺部良性疾病患者CYFRA21-1的血清水平,肺癌组水平16.9±8.4ng/ml,非肿瘤组水平1.9±1.6ng/ml(p<0.001)。肺癌阳性率62.4%,良性疾患阳性率5%。测定灵敏度为62.4%,特异性为94.5%,准确率77.9%,结果均好于CEA、NSE、CA-242。肺癌病人随病期的增加,血清CYFRA21-1含量也随之上升(P<0.02)。对8例肺癌手术病人和10例化疗病人含量变化分析,在手术3~5周后,血清含量由术前的6.4±3.1ng/ml,降到1.8±0.6ng/ml,10例化疗病人,其中8例血清含量均有降低,由17.4±9ng/ml降至4.9±2.0ng/ml,临床证实均有良好的治疗效果,另2例临床证实治疗无效,血清CYFRA21-1水平相应增高。 展开更多
关键词 CYFRA21-1 角蛋白 肺肿瘤 肿瘤标志物
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