复方骨益补对维甲酸诱导大鼠骨质疏松作用的研究

目的研究蛇床子和菟丝子及其复方制剂骨益补对维甲酸诱导大鼠骨质疏松的作用。方法70mg/kg维甲酸连续灌胃15d,诱导雄性大鼠形成骨质疏松模型,同时灌胃给药5周,以比色法测定其血清钙(sCa)、血清磷(sP)、骨碱性磷酸酶(bALP)和血清抗酒石酸酸性磷酸酶(sTRAP)的活性,竞争放射免疫法测定血清中骨钙素(sBGP)的含量;取干燥股骨及其骨灰测定其灰重系数,溶解后测定骨钙(bCa)和骨磷(bP)含量;双能X线(DEXA)测定股骨及腰椎的骨密度;三点弯曲试验法测定骨生物力学;扫描电镜进行骨小梁形态计量学分析。结果蛇床子和菟丝子以及复方骨益补能降低sTRAP和sBGP水平,增加股骨骨密度及bCa、bP含量,改善股骨抗弯抗拉能力,改善骨小梁形态,显著增加骨小梁平均宽度(MTT)与骨小梁面积百分比(TS%)。结论蛇床子和菟丝子以及复方骨益补对维甲酸诱导大鼠骨质疏松症具有防治作用。

聚苯乙烯肽亲合标签和葡萄球菌蛋白A免疫球蛋白Fc结合区融合蛋白的克隆表达与应用

目的应用生物工程技术克隆、表达聚苯乙烯肽(PS)亲和标签(PStag)和葡萄球菌蛋白A(SPA)免疫球蛋白(IgG)-Fc结合区(ZZ)融合蛋白,在大肠埃希菌BL21中进行高效表达并初步纯化,为优化、提升免疫检测方法奠定基础。方法应用基因合成技术串联SPA-ZZ结构域和PStag基因,构建重组表达质粒pPS-SPA,经酶切和测序确认,将阳性重组质粒转化BL21感受态细菌,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫转印试验(Western blot)鉴定表达和纯化产物;直接酶联免疫吸附试验(ELISA)验证融合表达产物对亲水ELISA板的表面吸附特性和定向结合兔、鼠IgG-Fc区的效果。结果在合成基因的基础上构建的表达载体经序列分析与限制性酶切证实了串联基因的正确克隆,PAGE结果表明可诱导高表达PStag-SPA,纯化产物对亲水ELISA板的吸附能力较高,表达产物对兔与鼠IgG具有定向吸附能力。结论重组表达的PStag-SPA具有对ELISA板的黏着能力和定向结合兔、鼠IgG-Fc的应用潜力,为优化酶免疫检测技术提供了技术支持。

量子点标记快速免疫检测技术的研究

目的自制发光材料量子点,优化量子点与抗体的偶联方案,并对制备的量子点标记抗体进行免疫检测的可行性研究。方法采用高温热分解法制备得到镉硒(CdSe)量子点,用还原型谷胱甘肽(GSH)对量子点表面改性,使用双功能聚乙二醇(PEG)交联量子点表面的GSH,得到表面PEG化的水溶性量子点,该物质稳定性好。用抗乙型肝炎表面抗原(HBsAg)抗体与量子点共价交联,采用斑点免疫反应验证HBsAg检测的可行性。结果成功制备量子点及其抗体标记物,检测HbsAg的敏感性可达1.6 ng/mL水平。结论量子点标记免疫检测呈现技术优势,有广阔的发展与应用前景。

靶向EGFR家族的抗肿瘤药物研究进展

表皮生长因子受体(EGFR,ErbB)家族在肿瘤的发生、发展中具有重要的作用。很多实体肿瘤中存在EGFR家族受体过表达或异常激活。靶向EGFR家族的抗肿瘤药物研发已经成为一个热点领域,并且成功地应用于临床。靶向EGFR家族的抗肿瘤药物可以分为单克隆抗体和小分子酪氨酸激酶抑制剂两大类。单克隆抗体与受体胞外区结合阻止配体-受体的结合或者阻止配体结合引起的受体活化;而小分子酪氨酸激酶抑制剂则结合于胞内激酶区,抑制激酶自磷酸化和下游信号通路激活。