普拉克索片在健康人体的药动学研究及安全性评价

目的研究健康受试者口服0.125mg和0.25mg普拉克索片的药动学过程,并评价该制剂的安全性,为注册治疗不宁腿综合征(restless leg syndrome,RLS)提供药动学依据。方法采用随机、开放、双向交叉试验设计,12名健康受试者(男女各半)分两个阶段分别进行单次口服普拉克索片0.125mg和0.25mg的药动学试验,两次给药间隔13天,每次给药前及给药后采集血样,采用液相色谱-串联质谱联用法(LC-MS/MS)测定健康受试者给药后血浆中普拉克索的浓度。采用WinNonlin(R)6.0版软件计算普拉克索片的药动学参数(AUC0-t、AUC0-∞﹑ρmax﹑tmax﹑t1/2﹑CL/F等)。整个试验过程进行全面安全性评估。结果单次口服普拉克索片0.125mg和0.25mg后,ρmax分别为(237±83)μg/L和(493±155)μg/L,tmax分别为(1.71±1.64)h和(1.21±1.01)h,t1/2分别为(6.12±2.21)h和(7.27±2.17)h,AUC0-∞分别为(1 791±765)μg·h·L-1和(4 419±1 932)μg·h·L-1,不同性别的药动学参数差异无统计学意义(P>0.05).试验过程无严重不良事件发生。结论单次口服0.125mg或0.25mg普拉克索吸收很快,吸收程度随剂量增加而增加,药动学过程不受性别影响.本研究制剂安全性较好,可按试验剂量给药治疗RLS。

健康受试者口服复方替米沙坦片后氢氯噻嗪的药物动力学

目的:建立口服复方替米沙坦片后氢氯噻嗪血药浓度的液相色谱-质谱(LC-MS/MS)测定法,进行人体药动学研究。方法:20例健康受试者随机分成两组,分别口服低剂量(1片)和高剂量(2片)受试制剂复方替米沙坦片(每片含替米沙坦40 mg,氢氯噻嗪12.5 mg),应用LC-MS/MS法测定样品中氢氯噻嗪的血药浓度。结果:口服低剂量和高剂量受试制剂(分别含氢氯噻嗪12.5 mg和25 mg)后,估算的氢氯噻嗪的药动学参数C_(max)分别为(78±15)μg·L^(-1),(150±50)μg·L^(-1);t_(max)分别为(1.9±0.7)h,(2.4±0.9)h;AUC_(0-1)分别为(591±163)μg·h·L^(-1),(1026±306)μg·h·L^(-1);AUC_(0-∞)分别为(601±157)μg·h·L^(-1),(1039±303)μg·h·L^(-1);t_(1/2)分别为(7.1±±1.5)h,(9.3±2.9)h;CLz/F分别为(22.1±5.6)L·h^(-1),(25.8±6.6)L·h^(-1);Vz/F分别为(226±77)L,(341±130)L;MRT分别为(8.4±1.3)h,(8.7±1.9)h。结论:本方法结果准确,灵敏度高,氢氯噻嗪进入人体分布后,其主要药动学参数与文献报道单方氢氯噻嗪数据一致。

盐酸美金刚片的人体生物等效性研究

目的:评价盐酸美金刚片受试制剂和参比制剂在体内的生物等效性。方法:24例男性健康志愿者随机分为两组,采用随机、开放、双周期、两制剂交叉试验设计,分别空腹单次口服盐酸美金刚片10 mg的受试制剂或参比制剂,经28 d洗脱期后,两组志愿者交叉服药。收集给药前和给药后不同时间的血液,采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定血浆美金刚浓度,采用非房室模型法计算药动学参数t_(max)、c_(max)、AUC_(0~t)、AUC_(0~∞)、MRT和t_(1/2)。结果:盐酸美金刚片受试制剂和参比制剂的t_(max)分别为(8.29±4.7)和(9.04±4.2)h;c_(max)分别为(13.3±1.82)和(12.1±1.66)ng/ml;AUC_(0~∞)分别为(1140±200)和(1080±224)ng·h·ml^(-1);t_(1/2)分别为(60.2±11.4)和(59.1±12.6)h。受试制剂的相对生物利用度为(107.1±12.6)%。受试制剂与参比制剂AUC_(0~t)和c_(max)几何均值比的90%可信区间均落在80%~125%。结论:盐酸美金刚片受试制剂和参比制剂具有生物等效性。

两种盐酸特拉唑嗪片的人体生物等效性研究

目的：评价单剂量口服国产和进口盐酸特拉唑嗪片的人体生物等效性。方法采用单中心、随机、开放、双周期交叉试验设计，21名受试者在不同周期分别空腹口服国产和进口盐酸特拉唑嗪片2mg，于给药前0h及给药后60h内不同时间点采集静脉血4 ml ，采用液-质联用（LC-MS／MS）法测定受试者血浆中特拉唑嗪的浓度。结果国产和进口盐酸特拉唑嗪片的 t1／2分别为（13.2±2.39）和（12.5±1.93） h；tmax分别为（1.01±0.83）和（1.08±0.69） h；Cmax分别为（40.1±10.6）和（37.3±9.57） ng／ml；AUC0-∞分别为（428±82.1）和（426±85.2） ng · h／ml。国产盐酸特拉唑嗪片的相对生物利用度为（101.2±14.7）％。国产与进口盐酸特拉唑嗪片 AUC0-t和Cmax几何均值比的90％置信区间（CI）均落在80％～125％之间。结论国产和进口盐酸特拉唑嗪片具有生物等效性。

米索前列醇片人体药动学及生物利用度研究

目的:建立人血浆中米索前列醇浓度的液相色谱-质谱-质谱联用测定方法,研究健康受试者口服米索前列醇片受试制剂和参比制剂的药动学及相对生物利用度和生物等效性。方法:20名健康女性受试者随机分为2组,先后单剂量、交叉口服受试制剂和参比制剂0.6mg后,采用液相色谱-质谱-质谱联用测定方法测定血药浓度。结果:受试制剂、参比制剂的主要动力学参数为:tmax分别为(28.5±12.8)min和(31.9±11.9)min,Cmax分别为(981±737)ng.L-1和(857±600)ng.L-1,t1/2分别为(1.18±0.31)h和(1.12±0.33)h;AUC0-t分别为(1 054±802)ng.h.L-1和(930±575)ng.h.L-1,AUC0-∞分别为(1086±815)ng.h.L-1和(961±589)ng.h.L-1。结论:经方差分析、双单侧t检验及90%置信区间法统计表明两制剂具有生物等效性。

进口去羟肌苷肠溶胶囊在中国健康男青年体内药物动力学研究

目的:探讨进口去羟肌苷肠溶胶囊在中国健康男青年体内的药物动力学。方法:18例健康志愿者分别单剂量口服250mg去羟肌苷肠溶胶囊后按试验方案采血,用液相色谱-串联质谱法测定血药浓度,DAS2.0程序计算药物动力学参数。结果:健康受试者单剂量给药250mg后去羟肌苷的体内过程符合二室模型,主要药物动力学参数分别为tmax(1.7±1.0)h,Cmax(604.6±415.1)μg/L,AUC0-t(1381.8±670.0)μg.h/L,AUC0-∞(1408.3±672.7)μg.h/L,t1/2(1.7±0.3)h,Vd(629.4±622.7)L,CL(252.6±206.9)L/h。结论:进口去羟肌苷肠溶胶囊吸收较片、分散片和散剂为慢,但主要药物动力学参数与其他剂型相近。

国产去羟肌苷肠溶胶囊在中国健康男青年体内药物动力学研究

目的:研究国产去羟肌苷肠溶胶囊在中国健康男青年体内的药物动力学。方法:17名健康志愿者分别单剂量口服200mg去羟肌苷肠溶胶囊后按试验方案采血,用液相色谱-串联质谱法测定血药浓度,DAS2.0程序计算药物动力学参数。结果:健康受试者单剂量给药200mg后去羟肌苷的体内过程符合二室模型,主要药物动力学参数分别为tmax(2.4±0.8)h,cmax(432.0±278.6)μg/L,AUC0-t(1188.8±577.5)μg.h/L,AUC0-∞(1221.6±587.2)μg.h/L,t1/2(1.7±0.3)h,Vd(547.0±373.4)L,CL(218.3±139.1)L/h。结论:国产去羟肌苷肠溶胶囊吸收较片、分散片和散剂为慢,但主要药物动力学参数与其他剂型相近。

国产与进口复方甘草酸苷片在健康人体的生物等效性

目的建立快速、灵敏的液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定人血浆中甘草次酸(治疗慢性肝病药物)的浓度,评价国产与进口复方甘草酸苷片在健康人体的生物等效性。方法 22名中国健康男性志愿者随机分为试验组和对照组,采用双交叉设计和单剂量口服方式,以LC-MS/MS法测定血浆中甘草次酸浓度,经DAS2.0统计软件计算主要药代动力学参数。结果线性范围0.50～800.00ng·mL-1,最低定量浓度为0.50ng·mL-1,日内精密度(RSD)<10.60%,日间精密度(RSD)<8.80%。受试制剂或参比制剂的主要药动学参数:t1/2分别为(13.1±8.5)和(10.3±5.6)h;tmax分别为(13.5±6.0)和(16.7±7.2)h;Cmax分别为(288.0±249.0)和(287.0±160.0)ng·mL-1。试验制剂相对生物利用度为(117.4±79.8)%。结论试验制剂与参比制剂具有人体生物等效性。

应用液相色谱-质谱联用技术检测血浆样品中丹参酚酸类成分的浓度

目的：研究丹参酚酸中丹参素（tanshinol，TSN）、原儿茶醛（protocatechualdehyde，PCA）、丹酚酸A（salvianolic acid A，SAA）、丹酚酸B（salvianolic acid B，SAB）及丹酚酸D（salvianolic acid D，SAD）的电喷雾串联质谱（ESI-MS／MS）检测特性，为开展复方丹参滴丸药代研究，建立灵敏可靠的定量分析血浆样品中丹参酚酸浓度的方法。方法：研究丹参酚酸的电离模式及效率、二级质谱的碎片离子及打碎效率；建立有效可靠的从血浆样品中提取被测丹参酚酸物质的前处理方法；优化色谱条件、减少分析干扰、促进质谱检测；围绕准确性、精密度和提取回收率等进行方法学验证。结果：电喷雾（ESI）负离子模式能有效实现丹参酚酸被测化合物的电离。以下离子对m／z197→135、137→108、493→295、717→519、417→197分别为被测化合物偈N、PCA、SAA、SAB、SAD提供最佳的选择离子对监测（SRM）检测条件。为取得可靠的分析结果，建立了两个分析方法：其一用于测定血浆样品中的TSN；其二用于测定血浆样品中的PCA、SAA、SAB和SAD。两个分析方法均以HCI酸化血样后用乙酸乙酯提取的方法处理血浆样品，其中，TSN的提取回收率在57．7％～61．6％之间；PCA、SAA、SAB和SAD的提取回收率在38．0％～58．9％之间。偈N的线性范围为2．7～2000．0ng／mL，相关系数r为0．999，最低检测限（LLOQ）为2．7ng／mL；PCA、SAA、SAB及SAD的线性范围为1．4～1000．0ng／mL或4．1～1000．0ng/mL，相关系数r〉0．99，LLOQ分别为1．4ng／mL（PCA）和4．1ng/mL（SAA、SAB和SAD）。两个分析方法的日内准确性和精密度分别为90％～112％和2．5％～14．5％；日间准确性和精密度分别为91％～110％和0．7％～9．8％。结论：成功建立了能够灵敏可靠地测定血浆样品中5种丹参酚酸化合物浓度的分析方法，此方法可用于复方丹参滴丸的药代动力学研究。

布洛芬缓释混悬液空腹和餐后给药的人体生物等效性研究

目的：研究健康受试者空腹和餐后两种状态下单剂量口服布洛芬缓释混悬液受试制剂与参比制剂的生物等效性。方法：本研究包括两个随机、开放、双周期、单剂量给药试验,各入组24名健康受试者,分别空腹和餐后单剂量交叉口服600 mg（20 ml）布洛芬混悬液受试制剂与参比制剂,采用液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）法测定给药后血浆中布洛芬的浓度。结果：空腹给药条件下受试制剂与参比制剂的主要药动学参数中t1/2分别为（4.27±1.42）和（3.87±1.03）h;tmax分别为（3.42±0.72）和（3.29±0.93）h;cmax分别为（27.4±4.33）和（28.2±4.65）μg/ml;AUC0-t分别为（167±30.1）和（172±28.8）μg·h/ml;受试制剂的相对生物利用度为（97.4±9.7）%。餐后给药条件下受试制剂与参比制剂的主要药动学参数中t1/2分别为（2.53±0.46）和（2.64±0.53）h;tmax分别为（3.63±0.99）和（3.44±1.15）h;cmax分别为（25.0±4.12）和（27.0±4.60）μg/ml;AUC0-t分别为（172±33.4）和（184±30.2）μg·h/ml;受试制剂的相对生物利用度为（93.1±5.7）%。两种给药条件下的受试制剂与参比制剂AUC0-t和cmax几何均值比的90%置信区间（CI）均落在80%~125%之间。结论：布洛芬缓释混悬液受试制剂与参比制剂在空腹和餐后两种状态下均具有生物等效性。

抗体偶联药物研发中的生物分析

抗体偶联药物(antibody-drug conjugates,ADCs)是一类单克隆抗体通过一段连接臂共价偶联细胞毒性小分子化合物而成的复合物,可以提高抗肿瘤药物的靶向性并减少毒副作用。ADCs结构具有异质性并且其药物-抗体比值(drug-to-antibody ratio,DAR)在体内呈动态变化,其生物分析面临着巨大的挑战,常用的定量分析包括酶联免疫吸附反应(ELISA)和液相色谱-质谱分析(LC-MS)。ADCs同其他生物制品一样,在体内可能会产生抗药抗体(anti-therapeutic antibody,ATA),影响其药效、药动学及安全性,因此有必要评价其免疫原性。本文综述了在ADC研发过程中常见的基于ELISA和LC-MS方法的待测物分析,包括DAR分布、总抗体、结合型抗体、结合型药物、游离药物以及ATA分析,可为我国的ADCs研发提供参考。

药物生物分析

近年来生物分析技术发展非常迅速,在效率更高、通量更大、结果更准确、检测灵敏度更好方面的长足发展,使其应用已经覆盖从早期药物发现、临床前研究、临床试验到上市后评价。当前国内外生物技术药物的研发成为热点,各种组学分析技术成为药物生物标志物和作用机制研究有力手段,生物分析技术发展面临着更大的挑战与机遇。一方面生物分析和药物代谢的研究与应用已密不可分,生物分析技术与方法在药物体外和体内代谢特点和过程研究中发挥着重要作用,色谱质谱联用分析技术对于小分子药物的代谢研究已经不可或缺,并且在生物大分子类药物的结构表征与代谢研究中也展现出广泛的应用前景。

LC-MS/MS法测定人血浆中硫酸氨基葡萄糖的浓度及其人体生物等效性

目的研究2种硫酸氨基葡萄糖胶囊在健康受试者体内的药动学和生物等效性。方法22名男性健康受试者,单剂量随机交叉口服不同厂家硫酸氨基葡萄糖胶囊500 mg后,采用LC-MS/MS法测定血药浓度,用DAS 2.0统计软件计算药动学参数和相对生物利用度。结果受试者口服受试制剂和参比制剂后的ρ_(max)分别为(5ρ2.0±193.0)、(453.0±174.0)μg·L^(-1),t_(max)分别为(2.9±1.5)、(2.5±1.3)h,t_(1/2)分别为(1.3±0.4)、(1.2±0.4)h,AUC_(O→t)分别为(1 997.0±652.0)、(1 948.0±715.0)μg·h·L^(-1),AUC+(O→∞)分别为(2 027.0±657.0)、(1 972.0±716.0)μg·h·L^(-1);受试制剂的相对生物利用度为(106.7±27.8)%。结论2种制剂具有生物等效性。