泊洛沙姆188、碳酸氢钠和HEPES对CPV ID3细胞株生长的影响

为了研究不同浓度的泊洛沙姆188(Poloxamer 188,P188)、碳酸氢钠(NaHCO_(3))和HEPES对CPV ID3细胞株生长的影响,分别向无血清培养基中添加不同浓度的P188、NaHCO_(3)和HEPES于125 mL摇瓶内悬浮培养稳定表达犬细小病毒单抗的CPV ID3细胞株,培养体积30 mL,培养条件为36.5℃,5%CO_(2),120 rpm,每天取样测量细胞的密度、活率,并于培养结束后检测抗体表达量。结果显示,P188在0~15 g·L^(-1)的添加范围内,P188浓度越高,细胞高密度维持时间越长,抗体表达量越高。NaHCO_(3)在1.5~2.5 g·L^(-1)添加范围内,NaHCO_(3)浓度与细胞生长速率,乳酸积累量成正比,与抗体表达量成反比。HEPES在0~25 mM添加范围内,与抗体表达量成正比,与最高活细胞密度成反比,当HEPES浓度为10 mM时,细胞生长速率最大;当HEPES浓度大于10 mM时,HEPES浓度与细胞生长速率成反比。结论:针对CPV ID3细胞株,在无血清培养基中添加P188可以延长细胞密度维持时间,提高抗体表达量;培养基中的NaHCO_(3)和HEPES的最适浓度分别为2 g·L^(-1)和10 mM。