上海地区四家医院鲍曼不动杆菌产β-内酰胺酶研究

目的了解上海地区4家医院2010年鲍曼不动杆菌对13种抗菌药物耐药性及β-内酰胺酶基因携带情况,研究该菌的流行型别,为临床合理用药及控制医院感染提供依据。方法收集上海4家医院临床分离的鲍曼不动杆菌共204株。采用琼脂稀释法检测上述细菌对13种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),三维试验检测AmpC酶,乙二胺四乙酸(EDTA)纸片协同试验检测金属酶表型。聚合酶链反应(PCR)检测OXA-23、OXA-24、OXA-51、OXA-58、ampC、IMP-1、IMP-4、VIM-2编码基因。结果 4家医院鲍曼不动杆菌对环丙沙星、哌拉西林-他唑巴坦、头孢西丁、复方磺胺甲口恶唑、头孢哌酮耐药率均较高,达到90%以上;对左氧氟沙星、多黏菌素B耐药率均相对较低。研究发现浦东地区医院对美罗培南、左氧氟沙星、多黏菌素B的耐药率均高于浦西地区医院。AmpC酶表型检测以公利医院表型阳性率最高(84.6%),瑞金医院表型阳性率最低(42.3%);金属酶表型检测,公利医院和仁济医院西院未检测到金属酶表型阳性菌株,另外3家医院中以东方医院检出率最高(27.3%),瑞金医院检出率最低(7.7%)。基因检测,浦东地区医院的OXA-23和ampC阳性率要比浦西地区医院的阳性率高。204株菌株OXA-51均为阳性,均未检测到OXA-24、OXA-58、IMP-1基因。在仁济医院东院和东方医院标本中检测到IMP-4和VIM-2基因,其他医院标本未检测到IMP-4和VIM-2基因。结论本地区分离到的鲍曼不动杆菌均检测出OXA-51,上海地区不同医院之间鲍曼不动杆菌产β-内酰胺酶情况略有不同。

筑巢式RT-PCR检测慢性粒细胞白血病bcr/abl融合基因方法学的构建及临床应用评价

目的:探讨筑巢式RT-PCR检测慢性粒细胞白血病(CML)bcr/abl融合基因方法学的构建,及该方法在CML患者疗后评价效果中的应用价值。方法:利用梯度PCR试验确定巢式RT-PCR方法检测K562细胞株bcr/abl融合基因的最佳条件,最终建立起在实验室条件下检测慢性粒细胞白血病bcr/abl融合基因的方法;通过琼脂糖凝胶电泳检测K562细胞株bcr/abl融合基因的敏感性试验;通过对30位服用格列卫治疗半年的患者进行细胞遗传学检测和筑巢式RT-PCR检测结果的比较来评价两种方法的优缺点。结果:通过试验确定筑巢式RT-PCR方法检测K562细胞株bcr/abl融合基因的最佳条件为:预变性94℃5分钟,变性94℃1分钟,退火56℃1分钟,延伸72℃1分钟,72℃终延伸5分钟,循环次数30个循环;试验结果表明本方法最低敏感度能达到10[-6]个拷贝。结论:筑巢式RT-PCR检测慢性粒细胞白血病bcr/abl融合基因可作为诊断CML的重要指标,筑巢式RT-PCR方法在评价格列卫治疗CML效果具有重要的价值。

用尿道菌定位显色平板鉴定大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的方法评估

目的:在确保鉴定准确的基础上降低细菌鉴定的成本,且简便快捷。方法:用VITEK-2全自动细菌鉴定仪及科玛嘉尿道菌定位显色培养基分别对350株革兰阴性杆菌进行鉴定。结果:用尿道定位培养基加做靛基质、动力等简单生化反应鉴定大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌准确率高。结论:此方法简便经济,值得推广和应用。