中药蟾酥化学成分研究

目的:研究蟾酥中的蟾蜍二烯羟酸内酯类成分。方法:用95%乙醇提取蟾酥,利用硅胶柱、Saphadex LH-20葡聚糖凝胶、HPLC等柱色谱方法进行化合物的分离纯化。根据化合物的理化性质以及MS、NMR等波谱数据进行结构鉴定。结果:从蟾酥95%乙醇提取物中共分离鉴定了12个化合物,分别为:异沙蟾毒精-3-辛二酸单酯(1)、沙蟾毒精-3-辛二酸单酯(2)、华蟾酥毒基(3)、沙蟾毒精(4)、异沙蟾毒精(5)、嚏根草醇(6)、12β-羟基蟾毒灵(7)、脂蟾毒配基(8)、去乙酰华蟾毒它灵(9)、蟾毒它灵(10)、华蟾毒它灵(11)、蟾毒灵(12)。结论:其中,化合物1为新化合物,化合物2为首次从中华大蟾蜍中分离得到。

蟾酥贮藏期间化学成分的变化

目的 研究蟾酥Bufonis Venenum在不同贮藏条件下化学成分的变化规律。方法 对蟾酥药材采用不同贮藏温度进行密封保存,科学规范定时采样24个月,观察其外观;HPLC法测定蟾毒灵、华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量,以各成分的相对峰面积表征其变化规律。结果 随着贮藏时间的延长,-18℃、4℃环境下的蟾酥色泽未见明显变化,质地较硬;而25℃环境下的蟾酥色泽加深,质地变软。-18℃环境下蟾酥中蟾毒灵、华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量基本不变;4℃、25℃环境下华蟾酥毒基含量明显下降,6个月以上蟾酥中3个指标成分含量总和低于2020年版《中国药典》规定的7.0%,主要为华蟾酥毒基转变成去乙酰华蟾酥毒基。结论 中药蟾酥应在冷冻、避光的环境下贮藏。

蟾酥化学成分及药理活性研究进展

蟾酥作为一种重要的传统中药,其化学成分复杂,临床用途较广。通过对蟾酥化学成分的分离和鉴定,已确定其主要的化学成分包括蟾蜍内酯类、吲哚类生物碱、甾醇类等化合物。随着国内外对蟾酥越来越深入的研究,其化学成分的药理活性机制也日益清晰,主要被用于抗肿瘤、强心、抗菌、镇痛等方面,甚至用于局部麻醉,且治疗效果显著。对蟾酥的化学成分、药理作用等方面进行综述,为蟾酥的临床安全合理应用提供参考。

蟾酥干燥炮制前后化学成分和药效学变化考察

目的考察蟾酥Bufonis venenum鲜浆干燥炮制加工(日晒干燥、50℃真空干燥、50℃鼓风干燥、80℃鼓风干燥、冷冻干燥)前后化学成分及药效变化。方法 HPLC法和TLC法研究蟾酥不同干燥方式炮制前后化学成分的变化,MTT法测试不同炮制干燥品抑制5种不同肿瘤细胞株增殖的效果。结果 5种不同加工炮制方法所得蟾酥,性状有较大差异;化学成分的种类及含量没有明显差异;华蟾酥毒基和脂蟾毒配基含量之和都符合《中国药典》2015年版标准,大于6%;50℃和80℃鼓风干燥所得蟾酥具有比其他干燥方法更强的肿瘤细胞抑制效果。结论日晒及50℃鼓风干燥法所得蟾酥符合《中国药典》要求的外观性状。真空干燥和冷冻干燥虽然颜色不符合《中国药典》的规定,但主要有效成分并未发生较大变化。

一株蟾毒灵转化菌株的筛选鉴定与转化条件优化

【背景】微生物转化是对天然产物进行结构修饰的重要手段,具有催化反应快、选择性强、反应条件易控制和污染小等特点。许多微生物能够对蟾毒配基类化合物进行生物转化,在不同位置进行结构修饰,并且产生毒性减弱的活性衍生物。【目的】筛选蟾毒灵生物转化菌株,以期发现活性更好、毒性降低的化合物。【方法】利用蟾毒灵为底物筛选其生物转化菌株,通过HPLC (High performance liquid chromatography)/LC-MS (Liquid chromatograph-mass spectrometer)鉴定转化产物;对可生物转化蟾毒灵的菌株进行菌落形态观察和分子生物学鉴定,并优化发酵条件提高转化率,同时测试该菌株对其他甾体化合物的转化作用。【结果】筛选获得一株蟾毒灵转化菌,经形态学与ITS (Internal transcribed spacer)分析鉴定为Naganishia属菌,转化产物为3-去氢蟾毒灵。该菌株生物转化的培养基最适底物浓度为8 mg/L,最适初始pH值为6.5,最佳接种量为3%,最佳转化时间为96 h,最终转化率为48.3%。该菌株可将雌酮E1转化为雌二醇E2,也可将雌二醇E2逆向转化为E1。【结论】首次发现Naganishia属菌株对甾体类化合物具有转化活性,其产生的弱细胞毒性的转化产物3-去氢蟾毒灵有望成为高效、安全的强心药物。微生物转化法选择性高、反应条件温和、操作简单,为大量制备活性化合物3-去氢蟾毒灵提供了一条简便易行的道路,也为更多甾体化合物结构修饰提供了可能。