常规实验室指标在结直肠良性息肉与恶性肿瘤鉴别诊断中的应用

目的 探索常规实验室检查项目在结直肠单纯息肉与已发生癌变息肉的鉴别诊断中的意义。方法选取2015年1月至2017年12月就诊于上海长海医院的结直肠单纯息肉患者91例,初次发现息肉时已发生上皮内瘤变患者122例,初次发现息肉时已经癌变的患者94例,初步筛选在3组之间有差异的指标,并进一步选定中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、清蛋白与球蛋白比值(A/G)、尿酸用于后续构建联合诊断模型;通过logistic回归模型拟合3个指标并生成联合诊断因子(union),用ROC曲线比较union与3个指标单独在单纯性息肉与已发生癌变息肉的鉴别诊断中的效能;随机选取2018年不在本次实验统计范围内的患者,将其个体数据代入回归模型进行验证。结果 已发生癌变息肉组NLR水平高于单纯息肉组,A/G与尿酸的水平显著低于单纯息肉组,差异有统计学意义(P<0.05)。息肉伴上皮内瘤变组A/G显著低于单纯息肉组,差异有统计学意义(P<0.05),NLR和尿酸水平在息肉伴上皮内瘤变组与单纯息肉组之间差异无统计学意义(P>0.05)。联合诊断因子曲线下面积为0.802,高于NLR、A/G、尿酸各自的曲线下面积(0.719,0.622,0.677),最佳临界值为0.597时,灵敏度为55.6%,特异度为92.8%,诊断准确性为74.2%。将2018年患者数据代入模型验证,该模型诊断结果与病理结果一致。结论 用logistic回归模型联合检测NLR、A/G、尿酸可以用于结直肠未癌变的息肉与早期结直肠癌的鉴别诊断,对临床中结直肠癌的早期发现有重要提示作用,A/G在息肉发生上皮内瘤变时即可有提示作用。

实时逆转录-聚合酶链反应绝对定量实验优化的研究

目的 探讨优化实验反应条件 ,使实时逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)绝对定量能获得准确可靠的结果。方法 建立质粒标准品作为外参照 ;以管家基因GAPDH作为内参照 ,并对Mg2 + 、引物与探针比例、Buffer等进行优化。结果 优化条件后 ,RT PCR反应的扩增效率接近了理论最佳值 ,并可使靶基因与管家基因扩增效率保持一致 ,保证了方法的稳定性和可靠性。结论 为了获得可靠、重复性好的实时RT PCR绝对定量结果 ,应对实验方法进行优化。

淋巴结K19 mRNA检测在诊断乳腺癌微转移灶中的应用

探讨 K19m RNA表达与乳腺癌病人淋巴结微转移的关系。应用 RT- PCR方法检测 2 0例乳腺癌组织及其 6 8枚腋下淋巴结和 4份正常乳腺组织、4枚正常淋巴结、5枚良性肿瘤患者腋下淋巴结中 K19m RNA,并与传统病理学检查淋巴结癌转移对照。结果显示 :正常乳腺组织及乳腺癌细胞 K19m RNA检测均为阳性 ,对照正常淋巴结、良性肿瘤患者淋巴结 RT- PCR结果阴性 ;组织病理学检查存在转移的 8枚淋巴结其 K19m RNA检测亦阳性 ,组织病理学检测无转移的 6 0枚淋巴结中有 7枚 K19m RNA RT- PCR检测阳性。因此 ,RT- PCR检测 K19m RNA可更敏感地检出淋巴结中的微转移灶 ,对乳腺癌转移的诊断有一定的实用价值。

成肌细胞自体移植及其功能的实验研究

目的 :观察成肌细胞自体移植后在宿主体内生长、增殖情况及对实验动物心功能的影响。方法 :将 30只SD大鼠随机分为移植组 (n =2 0 )及对照组 (n =10 ) ,另选 6只进行皮下自体移植 ,液氮冷冻大鼠左心室游离壁 ,建立心肌梗死模型。将体外培养的成年大鼠成肌细胞自体移植到相应大鼠的皮下及心肌疤痕中 ,观察细胞的生长、增殖情况 ,结合心脏重量指数及血流动力学等参数评价细胞移植后对心功能的影响。结果 :6只进行皮下自体移植的大鼠中 ,有 2只在移植部位形成排列紊乱的肌纤维结构。 2 0只行成肌细胞心肌内自体移植的大鼠中 ,有 6只myogenin染色阳性 ,证明成肌细胞可在宿主皮下及心肌疤痕中存活。与移植失败者及对照组相比 ,移植成功者左心室重量、左心室重量 /体重、心脏重量 /体重及左心室舒张末期压力均降低 ,有统计学差异 (P <0 0 5～ 0 0 1)。压力变化率最大值 (dp/dtmax)升高 ,有统计学差异 (P <0 0 5 )。结论 :成肌细胞自体移植后可在宿主体内生长、增殖 。

中性粒细胞与淋巴细胞比值对初发溃疡性结肠炎鉴别诊断及其严重程度判断的临床意义

目的评估中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)对溃疡性结肠炎诊断的临床意义。方法选取2009年6月~2016年6月就诊于上海长海医院的192例患者,其中溃疡性结肠炎患者97例,肠易激综合征患者95例。通过研究血常规中中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR),分析两组疾病NLR差异,并评价NLR对溃疡性结肠炎诊断的敏感度及特异度;通过改良的Mayo评分系统评估溃疡性结肠炎疾病严重程度,并分别分析NLR在溃疡性结肠炎不同严重程度及不同病变部位之间的差异。结果与肠易激综合征组相比,溃疡性结肠炎患者NLR显著增高,差异具有统计学意义(t=2.327,P<0.021);诊断溃疡性结肠炎敏感度和特异度分别为69.1%和75.8%;NLR在溃疡性结肠炎严重程度之间差异有统计学意义(F=8.221,P=0.001);NLR在不同病变部位之间差异无统计学意义(F=0.737,P=0.483)。结论 NLR在溃疡性结肠炎与肠易激综合征鉴别诊断中具有一定价值和临床意义,并且可以判断溃疡性结肠炎的严重程度。

中性粒细胞淋巴细胞比值与血小板淋巴细胞比值在初发溃疡性结肠炎诊断中的临床应用价值

目的 探讨中性粒细胞淋巴细胞比值(NLR)及血小板淋巴细胞比值(PLR)单独试验与联合试验对初发溃疡性结肠炎的临床诊断价值。方法 选取2009年6月至2017年10月溃疡性结肠炎患者95例(溃疡性结肠炎组)及体检健康者100例(对照组)作为研究对象。通过血常规分析仪检测计算NLR及PLR,并比较NLR、PLR单独及联合试验对溃疡性结肠炎诊断价值。结果 溃疡性结肠炎组NLR、PLR[(3.13±1.92)、(160.45±76.44)]与对照组[(1.90±1.44)、(123.73±60.47)]比较明显增高,差异有统计学意义( P <0.05)。NLR、PLR单独及联合检测(NLR/PLR、NLR+PLR的灵敏度分别为75.8%、71.6%、84.2%、58.9%;特异度分别为74.0%、55.0%、50.0%、81.0%;诊断符合率分别为74.9%、63.1%、66.7%、70.3%。结论 NLR与PLR联合诊断试验可以提高溃疡性结肠炎诊断的灵敏度和特异度,对溃疡性结肠炎的鉴别诊断具有临床应用价值。

希森美康XN血液分析仪淋巴细胞结构参数在IM与B-CLPD鉴别诊断中的临床意义

目的研究希森美康XN血液分析仪淋巴细胞结构参数在传染性单核细胞增多症(IM)与B细胞慢性淋巴增殖性疾病(B-CLPD)鉴别诊断中的临床意义。方法回顾性分析2017年12月至2019年3月于上海长海医院门诊就诊的淋巴细胞增多患者(343例)希森美康XN血液分析仪淋巴细胞结构参数结果,并依据诊断分为IM组(111例),B-CLPD组(87例)与非肿瘤性增殖组(145例),通过受试者工作曲线(ROC曲线)与Logistic回归分析对淋巴细胞结构参数在IM组与B-CLPD组鉴别诊断中的价值进行评估。结果通过Logistic回归生成联合诊断因子pre1,当pre1临界值为0.5945时,pre1鉴别诊断IM与B-CLPD的灵敏度为91.9%,特异度为96.6%。结论希森美康XN血液分析仪淋巴细胞结构参数在鉴别诊断IM与B-CLPD中有较高的价值。

胸液涂片双染色镜检对快速诊断脓胸的应用——附3例病例报告

1资料与方法 1.1一般资料 患者1,男,16岁,两个月前出现胸闷、胸痛、偶伴咳嗽、发热等症状,治疗数天无好转。既往有前纵膈肿块病史。影像学检查：左侧有大量胸腔积液;血液学检查：白细胞24.45×10^9/L,中性粒细胞79.1%,红细胞4.12×10^12/L,血红蛋白76g/L,血小板507×10^9/L,C反应蛋白（CRP）139.7mg/L,糖类抗原125（CA125）105.7 U/mL。

肝脏疾病的红细胞免疫学研究

免疫不平衡是肝病发病机制中最重要的环节之一.人们已认识到弄清免疫发病机制的重要性.因为肝病患者都存在细胞免疫功能低下和体液免疫功能和细胞因子紊乱与亢进[1-6],但由于我们对机体的免疫防御系统缺乏整体深入的认识,因此对肝病发病机制的研究还是不深刻的.现代免疫学在不断发展,现已认识到天然免疫(即非特异性免疫)在机体防御反应中位于首当其中,并认为天然免疫对特异性免疫应答中关于抗原选择与应答类型有指导作用[7],而肝脏巨噬细胞网状内皮系统是天然免疫反应发生的重要区域之一,枯否细胞(巨噬细胞)功能严重损害导致内毒素清除严重障碍,损伤肝细胞,促使肝炎慢性化,而补体C3主要在肝细胞内合成,肝细胞受损必然影响天然免疫反应[8,9].因此肝病的发生与天然免疫反应的异常(即免疫不平衡)应是密切相关的.

淋病奈瑟菌隐蔽性质粒的克隆及PCR的建立与应用

用分子生物学方法自淋病奈瑟菌标准分离株中克隆了４．２ｋｂ的隐蔽性质粒，并根据该质粒ＤＮＡ序列，设计引物，建立淋病奈瑟菌ＰＣＲ检测方法。该方法标本处理简单、反应程序优化，可在２．５小时内完成一次检测。对２１株淋病奈瑟菌标本进行检测，结果全为阳性；而对２２株其它菌株检测均为阴性，证实了该法的特异性。与涂片、培养法比较，ＰＣＲ阳性率最高。结合临床检测了７０６例性病患者，总阳性率为２８．６％（２０２／７０６）。实验表明该ＰＣＲ方法简便快速、敏感特异，对淋病的流行病学调查和早期防治有重要意义。所克隆的含有４．２ｋｂ隐蔽性质粒ＤＮＡ还可用作制备探针和ＰＣＲ阳性对照。

多巴胺和多巴酚丁胺对临床部分生化检测项目的干扰

目的评估多巴胺和多巴酚丁胺对基于过氧化物和过氧化物酶反应原理的6个生化检测项目[肌酐(Cr)、尿酸(UA)、葡萄糖(Glu)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、糖化血清蛋白(GSP)]的影响。方法配制含有100.00、50.002、5.00、12.506、.253、.131、.57μg/mL不同药物(多巴胺、多巴酚丁胺)浓度的血清,采用日立7600全自动生化仪(简称日立7600)测定血清Cr、UA、Glu、TC、TG、GSP浓度;采用强生VITROSR○5.1 FS干式生化仪(简称强生VITROS)检测Cr、UA和Glu浓度。计算不同血药浓度对各个项目干扰的程度。结果随着药物浓度逐渐增加,6个检测项目的检测结果均逐渐下降。血药浓度≤1.57μg/mL时对除GSP外的5个日立7600检测项目的负干扰<10%;血药浓度≥50μg/mL时对强生VITROS的Cr、UA测定结果的负干扰>10%。各个浓度的药物对强生VITROS检测Glu没有明显影响(<10%)。结论高浓度的多巴胺和多巴酚丁胺(≥1.57μg/mL)对日立7600的检测Cr、UA、Glu、TC、TG和GSP呈明显负干扰。强生VITROS抗多巴胺和多巴酚丁胺的干扰能力明显强于日立7600上的相应检测项目。

辐射小鼠血细胞ATM、CDKN1A、DDB2和GADD45A基因表达分析

观察小鼠全身γ射线辐照不同剂量、照射后不同时间,外周血细胞DNA损伤修复相关蛋白基因表达变化,筛选具有指示生物受照剂量潜力的指标。BALB/c小鼠,以0.8和1.6 Gy/min两种剂量率,分别进行0、2、4、6和8 Gy不同剂量照射。照射后4、8、12、24和48 h眼眶取血,AxyPrep试剂盒抽提全血细胞总mRNA,实时定量聚合酶链反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)方法分析DNA损伤修复相关蛋白基因ATM(Ataxia telangiectasia mutated)、CDKN1A(Cyclin-dependent kinase inhibitor 1A)、DDB2(Damage-specific DNA-binding protein 2)和GADD45A(Growth arrest and DNA damage-inducible,alpha)转录水平。GraphPad Prism 5.0 software package(GraphPad Software,USA)进行数据统计分析。结果表明,与未照射对照组比,在2—8 Gy剂量范围,0.8 Gy/min剂量率照射条件下,照射后所有观察时间点,基因ATM、CDKN1A、DDB2和GADD45A表达均发生显著性变化,变化程度与受照剂量和照射后时间存在效应关系。相同照射剂量条件下剂量率增高,基因表达变化的幅度更明显。依据上述基因随照射后不同时间表达改变的信息,有可能在一定辐照剂量范围内,用DNA损伤修复蛋白基因表达指标估计生物体受照剂量大小。

NLR与缺血性脑卒中患者预后关系研究

目的 探讨缺血性脑卒中患者中性粒细胞与淋巴细胞比例（NLR）与脑卒中的发生及预后的相关性。方法 选取2012年1月-2014年8月在长海医院住院就诊并首次确诊为缺血性脑卒中的患者208例,通过出院mRS评分标准将其分为：0-2分组179例,3-6分组29例。测定患者血清中血常规、尿酸、凝血等指标,研究这些指标与卒中预后的相关性。结果 mRS分型中NLR在3-6分组（3.69±3.02）中明显高于0-2分组（2.42±1.21）,差异均有统计学意义（P=0.037）; 不同脑卒中分型OCSP分型之间NLR存在差异（P=0.02）,而TOAST各分型之间NLR的值无差异（P=0.489）; NLR与mRS分型之间存在正相关,差异具有统计学意义（P〈0.01）; ROC曲线：NLR曲线下面积最大为0.690,cut-off值为2.384,灵敏度76%,特异度57%。结论 NLR可以区分OCSP分型中后循环性梗死与其他梗死类型,是一种缺血性脑卒中预后的预测因子。

洗必泰-碘对抗微生物作用的评价

我们用标准菌对洗必泰-碘络合物进行了系统的评价,结果表明其最小抑菌浓度为0.125～5μg/ml,一分钟时在312～625μg/ml浓度下可以快速有效地杀灭细菌繁殖体(>99.99％)。真菌(>99.99％),芽孢(>99.99％),对HBsAg灭活率达到99.95％以上,其毒性小,LD_(50)为3548.1mg/kg。与其它四种消毒剂:洗必泰、酒精、碘酊、PVP碘比较结果,洗必泰-碘最好。经临床346例手术时皮肤消毒,无一例手术后切口感染。实验显示洗必泰-碘络合物具有快速、广谱的杀菌作用。

胃癌患者红细胞免疫功能变化规律的研究

目的 :研究胃癌患者及其手术前后红细胞免疫功能变化的规律。方法 :采用花环法检测胃癌患者与正常人的红细胞免疫功能 ,并对胃癌患者手术前后的变化进行动态观察。结果 :胃癌患者的红细胞免疫功能均比正常人显著降低 ,且与肿瘤病理分期有关 ;手术打击对红细胞免疫功能有重要影响 ,根治性手术有利于患者红细胞免疫功能的恢复 ,姑息性手术却促使患者的免疫功能进一步恶化。结论 :胃癌患者存在红细胞免疫功能低下与紊乱 ;胃癌根治性手术较姑息性手术能明显改善患者红细胞免疫功能 ,胃癌患者的红细胞免疫功能的测定 ,有助于判断肿瘤的分期。

鼻咽癌与非鼻咽癌高滴度VCA-IgA抗体阳性患者体液免疫与红细胞免疫变化比较

近年来应用免疫酶标法测定ＥＢ病毒ＶＣＡＩｇＡ抗体诊断鼻咽癌（Ｎａｓｏｐｈａｒｙｎｇｅｒｌｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＮＰＣ）已越来越被临床接受。因此法具有方法简便、重复性好的优点，尤其在某些患者病变早期，临床症状尚不明显时，高滴度（１∶４０以上）的ＶＣＡ?..

人脐血PSC3445多潜能干细胞体外分离培养与鉴定

目的 :培养、鉴定、描述及扩增人脐血PSC344 5多潜能干细胞 .方法 :使用Ficoll Hypaque分离新鲜人脐血单个核细胞 ,用PBS洗涤 2～ 3遍后在Potentculture完全培养液中37℃ ,5 0mL/LCO2 条件下培养 1 0～ 1 4d ,得到一群成纤维样细胞 ,该细胞与荧光素标记的mAb (CD1 4 PE ,CD1 1b PE ,CD4 5 FITC ,CD34 PE ,CD3 FITC ,CD1 0 5 PE ,CD1 6 6 PE ,CD2 9 PE ,CD90 FITC ,CD33 PE ,CD4 1 PE ,CD4 4 FITC ,CD7 FITC ,CD6 1 FITC ,HLA DR PE)反应后 ,经流式细胞仪检测其表面标志 .并对该细胞进行了糖原 (PAS) ,酸性磷酸酶 (AP) ,碱性磷酸酶(Alk .P) ,油红O(ORO) ,过氧化物酶 (POX)等化学染色 .结果 :PSC344 5表达 :HLA DR+ ,CD1 4 + ,CD4 5 + ,CD1 1b+ ,CD2 9+ ,CD34-,CD1 0 5 -,CD3-,CD90 -,CD1 6 6 -.细胞化学染色为PAS+ ,AP+ ,Alk .P-,ORO-,POX-.在适当诱导剂的诱导下可以定向分化 .结论