动物克隆技术研究的历史、现状与展望

动物克隆技术对于优良种畜的复制、减少实验用动物数目、动物遗传多样性保存及濒危动物挽救、转基因动物培育以及人类疾病的治疗都具有重要的意义。尽管早在1938年HansSpemann就已提出了胚胎细胞核移植的设想,但直到20世纪50和60年代才在两栖类和鱼类获得成功。而哺乳动物的胚胎细胞核移植起步更晚,直到20世纪80年代才开始有成功的报道。自1997年Wilmut等人培育出体细胞克隆绵羊Dolly以来,哺乳动物克隆技术有了迅速发展;先后获得了体细胞克隆小鼠、牛、山羊、猪、猫和兔,供核细胞的种类也在不断拓宽。然而,目前体细胞克隆的成功率还很低,一般只有1%～3%。一般认为,造成克隆成功率低的原因主要是供体核后成性基因程序再编不当。尽管最近的实验证明,端粒长度和X-染色体灭活等程序再编正常,但于配子发生期间形成的后成性信息(如配子基因印迹)在核移植之后并不能恢复。

德州驴发情周期中卵泡动力学和激素变化规律的研究

本研究旨在揭示德州母驴发情季节的卵巢卵泡波变化特点以了解其卵泡的募集、选择、优势化、闭锁或者排卵,为驴人工授精和超数排卵提供可靠依据。本研究在德州驴发情季节(5～8月份)用直肠超声探查法每日检测5头德州母驴的10个排卵间隔的卵泡发育动态。同时每日采血,用放免法(RIA)检测E2、FSH、LH和IGF-1浓度。研究结果发现:(1)驴的排卵间隔平均为(23.22±0.28)d,每个周期中存在2个卵泡波,其中有4个展示主-主卵泡波,有6个展示次-主卵泡波。(2)第1波和第2波开始出现募集的时间分别在排卵后的第1和第(10.2±1.4)天,募集的卵泡数分别为(5.2±1.2)和(4.0±0.3)个,选择的卵泡数分别是(2.3±0.5)和(2.5±0.4)个。第1和第2卵泡波开始优势化的时间分别在排卵后的第(5.8±0.6)和第(18.1±1.4)天。波峰平均出现时间分别为第(7.67±0.24)和第(23.22±0.28)天。波峰时优势卵泡平均最大直径分别为(26.44±2.37)和(40.7±2.45)mm。第1和第2波最大优势卵泡每日平均生长率分别为(2.01±0.5)和(3.15±0.6)mm.d-1。(3)黄体(CL)最大直径平均为(37.61±1.58)mm,CL平均持续时间为(17.30±1.62)d。(4)E2浓度从排卵前3d至排卵后2d的发情期内均很高,平均维持在(46.47±9.53)pg.mL-1,在排卵前2d达到峰值(62.84±4.89)pg.mL-1。(5)由于E2的负反馈作用,FSH浓度到优势卵泡最后阶段(即第7天闭锁或第23或24天排卵时)大幅度下降。(6)LH在排卵前几天迅速升高,在排卵后第2天达到峰值(4.69±0.43)mIU.mL-1。(7)IGF-1的升降状况与E2基本相同,在排卵前1d达到峰值(47.9±3.91)ng.mL-1。通过上述卵泡和激素动态学变化,本研究得出下述结论:驴的卵巢卵泡发育是以卵泡波形式进行的,每个发情周期中最常出现的是2个卵泡波;排卵发生于发情结束前2d;E2和IGF-1调节驴的发情活动;FSH调节小卵泡的募集;LH增高与排卵有关。

营养水平对崂山奶山羊羔羊生长性能的影响

选择12只健康的崂山奶山羊羔羊,公母各半,根据日粮营养水平和性别分为4组,即H1组、H2组、L1组和L2组,每组3只羊。结果表明:日粮净能为5.39 MJ/kg,粗蛋白为14.5%,可以提高羔羊的生长速度,有利于羔羊生长性能的发挥;在不同能量蛋白水平的条件下,崂山奶山羊公羔的生长速度要优于母羔。

鸡白细胞介素18成熟蛋白基因真核表达质粒的构建及其在鸡胚成纤维细胞中的表达

通过PCR方法自含鸡白细胞介素18(Chicken interleukin-18,ChIL-18)成熟蛋白(mature ChIL-18,mChIL-18)基因的克隆质粒中扩增mChIL-18基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1/V5-His-TOPO中。阳性克隆鉴定后,在脂质体作用下转染鸡胚成纤维细胞(CEF),通过间接免疫荧光试验(IFA)检测到了mChIL-18在CEF中的表达。

钴对肉兔生长性能、免疫及生化指标的研究

探讨日粮添加钴对断奶～2月龄生长肉兔生产性能、免疫性能、血液生化指标及屠宰性能的影响。选用80只断奶新西兰肉兔,随机分成4个处理组,在基础日粮中添加不同水平的钴(0、0.1、0.5和2.5mg/kg)。试验期23d。结果表明:日粮添加不同水平钴对平均日增质量(ADG)和料重比(F/G)有显著影响,0.1mg/kg钴添加组显著优于未添加组,各组间平均日采食量无显著差异;日粮添加不同水平的钴对胸腺指数有极显著影响,对脾指数、IgA、IgG和IgM无显著影响;日粮添加不同水平的钴对血清球蛋白、总蛋白含量和白球比有显著影响,对血清白蛋白和尿素氮含量无显著影响;日粮添加不同水平的钴对肌肉剪切力有显著影响,对全净膛屠宰率、半净膛屠宰率、失水率和滴水损失无显著影响。断奶～2月龄生长肉兔日粮中适宜的钴添加水平为0.1mg/kg,但改善肌肉嫩度需要添加0.5mg/kg钴。

全混合颗粒料和粉料对崂山奶山羊生产性能的影响

选用12只健康的经产崂山奶山羊,分为试验组和对照组,每组6只羊。试验组日粮采用全混合颗粒料,对照组日粮采用全混合粉料,比较全混合颗粒料和粉料对崂山奶山羊生产性能的影响。结果表明:试验组干物质采食量和产奶量显著高于对照组,试验组和对照组的始质量和末质量差异不显著。全混合颗粒料的适口性优于全混合粉料日粮,具有提高奶山羊采食量和产奶量的作用。

蛋氨酸对生长獭兔生产性能及生化指标的影响

探讨日粮中不同蛋氨酸水平对生长獭兔生长性能、皮毛质量及血液生化指标的影响。选用体质量和年龄基本一致的120只3月龄獭兔,按平均体质量一致的原则分成4组,每组30只兔,公母各半。试验日粮分为4个蛋氨酸添加水平,分别为0、0.2%、0.4%和0.6%。预试期7d,正试期30d。结果表明:随着日粮中蛋氨酸水平的提高,能极显著提高生长獭兔的平均日采食量和平均日增质量,极显著降低料重比。日粮中蛋氨酸水平能明显提高优质獭兔皮的比例,0.6%蛋氨酸组高于其他组,0.4%添加组高于0.2%组和未添加组。0.6%添加组的成活率最低,0.4%添加组的成活率最高。蛋氨酸水平对血清尿素氮有极显著影响,对总蛋白、白蛋白、球蛋白及胰岛素影响均不显著。试验结果表明:生长獭兔日粮适宜的蛋氨酸添加水平为0.4%。

微量元素锌的营养研究进展

锌是动物必需的微量元素之一,具有广泛的生理功能。文章从锌在动物体内的分布及代谢,锌对动物的生产性能、免疫和繁殖性能的影响等方面进行了阐述。

胚胎体外共培养:影响因素及作用机理

综述了近年来关于哺乳动物早期胚胎与体细胞共培养的研究进展。重点讨论了早期胚胎与不同类型体细胞共培养 ,血清、发情周期和体细胞传代次数对胚胎共培养效果的影响 ,以及胚胎体外共培养的作用机理。体细胞共培养体系可以改善早期胚胎体外培养的条件 ,促进胚胎发育 ,提高着床率和妊娠率 ,在发育生殖研究领域有着广泛的应用前景。然而 ,对其影响因素和作用机理尚欠系统深入研究 。

饲粮钙水平对泌乳奶牛钙代谢的影响

通过研究饲粮钙水平对泌乳早期奶牛干物质采食量、产奶量及血液、尿液指标的影响,旨在探讨泌乳早期奶牛饲粮的适宜钙水平。试验选用4头泌乳3个月的荷斯坦奶牛[产奶量(20.33±0.92)kg],采用4×4拉丁方设计,饲粮钙水平(干物质基础)为0.50%、0.68%、0.83%和0.96%。结果表明:1)0.50%、0.68%、0.83%3个处理干物质采食量显著高于0.96%处理(P<0.05),3个处理间差异不显著(P>0.05);0.68%处理产奶量显著高于其他3个处理(P<0.05)。2)随着饲粮钙水平的升高,泌乳奶牛钙表观消化率逐渐降低,粪钙、尿钙浓度上升,0.50%处理钙表观消化率显著高于其他处理(P<0.05),尿钙/尿肌酐显著低于其他处理(P<0.05),0.68%处理与0.83%处理差异不显著(P>0.05);0.96%处理粪钙浓度显著高于0.50%处理(P<0.05),0.50%、0.68%、0.83%3个处理间差异不显著(P>0.05)。3)随着饲粮钙水平的升高,血液pH和尿液pH逐渐升高,0.96%处理显著高于0.50%处理(P<0.05),0.50%、0.68%和0.83%3个处理之间差异不显著(P>0.05)。4)血浆碱性磷酸酶活性、降钙素、骨钙素浓度逐渐升高,0.96%处理显著高于0.50%处理(P<0.05),0.50%处理与0.68%处理差异不显著(P>0.05);血浆甲状旁腺素浓度逐渐降低,0.50%处理显著高于其他组(P<0.05)。综合各指标可知,泌乳早期荷斯坦奶牛饲粮的适宜钙水平为0.68%(干物质基础)。

断奶幼兔腹泻肠致病性大肠杆菌LEE毒力岛的分子检测

为了了解 L EE毒力岛在山东省兔场的流行情况 ,自 2 0 0 0年 2月到 2 0 0 3年 6月从潍坊、曲阜、恒台、烟台、莱芜、泰安等地兔场的断奶前后腹泻和健康兔肠内容物或粪便中分离的大肠埃希氏菌 ,用 PCR法检测 L EE毒力岛上的 eae A基因。结果发现 ,在 2 0～ 30日龄、30～ 5 5日龄、5 5～ 80日龄的腹泻幼兔中 ,携带 L EE毒力岛的大肠埃希氏菌检出率分别为 0 (0 / 5 )、72 .7%(2 4 / 33)、2 3.5 % (4 / 17) ,而在相同日龄的健康幼兔中检出率为 0 (0 / 2 4 )。从其他肠道致病菌的检出情况来看 ,沙门氏菌和魏氏梭菌检出率极低 ,沙门氏菌在腹泻兔为 9% ,健康兔为 4 .2 % ,魏氏梭菌在健康兔和腹泻兔均为 0。生化试验表明 eae A阳性的大肠杆菌为乳糖发酵试验弱阳性的菌株。结论 eae A阳性的肠致病性大肠杆菌 (EPEC)应是导致上述兔场断奶后幼兔发生腹泻症的主要细菌性病原 ;L EE毒力岛的检测能够作为兔肠致病性大肠杆菌 (REPEC)

维生素C对应激蛋鸡血液生化指标的影响

研究热应激和免疫接种应激下,添加不同剂量维生素C(VC)对蛋鸡肌酸磷酸激酶和血糖的影响。日粮中VC添加浓度为0、200、400和1200mg/kg,环境温度为32℃,接种疫苗为新城疫疫苗(NDV)或水(NNDV),试验期28d。试验结果表明,添加VC可降低热应激和免疫应激蛋鸡的肌酸磷酸激酶活性和血糖浓度。VC抗应激效果与其添加量密切相关,400mg/kgVC抗应激效果最好。建议在应激蛋鸡日粮中添加适量VC。

日粮锌对肉兔生产性能、机体抗氧化酶和金属硫蛋白-1表达的影响

探讨了日粮添中加不同水平和来源的锌对断奶～2月龄生长肉兔生产性能、血清肝抗氧化酶活性和金属硫蛋白-1(MT-1)基因表达的影响。选用140只35日龄断奶新西兰肉兔,随机分为7个处理,每处理20只兔,对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中分别以硫酸锌和蛋氨酸锌的形式添加40、80和120mg/kg锌,预试期7d,正试期18d。结果表明:日粮中添加不同蛋氨酸锌水平对生长肉兔平均日增质量(ADG)影响显著,以80mg/kg蛋氨酸锌组最高;日粮中锌源及添加水平对平均日采食量(ADI)和料重比(F/G)影响不显著;日粮锌源及添加水平对血清铜锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)活性影响极显著,对血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量影响显著;极显著影响肝GSH-Px活性,显著影响肝CuZn-SOD活性和MDA含量;日粮锌源及添加水平极显著影响肝和肾MT-1mRNA相对表达丰度,蛋氨酸锌组MT-1mRNA相对表达丰度在日粮锌添加水平为80mg/kg时达到最大值。这说明,日粮中添加不同水平和来源的锌对早期生长肉兔的增质量、血清肝抗氧化酶活性和MT-1基因表达有明显的影响,适宜的锌添加水平有利于肉兔生产性能的发挥。

日粮能量对妊娠母兔繁殖和生化指标的影响

日粮能量水平对妊娠期母兔繁殖性能和血液生化指标的影响,选择60只妊娠期新西兰经产母兔,随机分为3组,分别饲喂低、中和高(9.45、10.75和12.05MJ/kg)3种能量水平饲粮。结果表明:妊娠期饲粮能量水平可显著影响母兔初生窝质量、产活仔数和产活仔率,均在中能量水平组达到最大值;日粮能量水平显著影响血清总蛋白含量。妊娠期经产新西兰母兔适宜的日粮能量水平为10.75MJ/kg。

中药方剂对肉牛血清总超氧化物歧化酶活性的影响

选用54头190kg"利鲁"杂交一代肉牛,研究4种复方中草药添加剂对肉牛血清中总超氧化物歧化酶含量的影响。将试牛随机分成对照组和中草药组(2%或4%水平,占精料质量),共9组。试验结果显示,A方和B方的2%中草药添加组有较明显的抗氧化效果(P<0.05),4%试验组的抗氧化作用不明显。

姜粉作为畜禽饲料添加剂的潜在应用价值

1 姜的主要化学成分 姜主要化学成分的提取方法有水气蒸馏法、压榨法、溶剂浸提法和超临界二氧化碳萃取法等。姜的主要化学成分主要归属为3类：1）挥发油主要成分为单萜类物质,如：单萜类的α-派烯、

粗蛋白水平对长毛兔产毛性能及生化指标的影响

日粮不同粗蛋白水平对长毛兔产毛性能及血液生化指标的影响。选用体质量、年龄和产毛量基本一致的80只成年长毛兔,按平均体质量和产毛量一致的原则分成4组,每组20只兔,公母各半。试验日粮分为4个粗蛋白处理水平,分别为14%、16%、18%和20%,试验前所有长毛兔进行剪毛处理,正试期73d。结果表明:日粮粗蛋白水平对毛长影响极显著;对年产毛量和料毛比影响显著;对血清总蛋白和白蛋白影响显著;对血清尿素氮和谷草转氨酶有极显著影响。试验结果表明:成年长毛兔日粮适宜的粗蛋白水平为18%。

日粮锌对肉兔生产性能、机体抗氧化酶和金属硫蛋白-1表达的影响(续)

2结果与分析2．1锌源及水平对生产性能的影响从表3可见：日粮蛋氨酸锌水平对平均日增质量（ADG）影响显著，其中80mg／kgZn—Met组显著高于对照组、40mg／kgZnSO4组和Zn—Met组，其他各组间差异不显著。日粮锌源及水平对平均日采食量（ADI）和料肉比（F／G）影响均不显著。

日粮ADF水平对断奶肉兔肠道健康、营养物质消化及生产性能的影响

选用100只体重相近的35日龄断奶新西兰肉兔,随机分为5组,分别饲喂不同水平酸性洗涤纤维(ADF,13%、16%、19%、22%和25%)的日粮,探讨我国生长肉兔适宜的ADF需要量。结果表明:试兔肠道健康状况受日粮ADF水平影响较大,13%和16%ADF组肉兔腹泻发生率和健康风险指数明显高于其他各处理组;平均腹泻时间随ADF水平的提高逐渐下降,其中,25%组显著低于13%组(P<0.05)。13%、16%ADF组的空肠、盲肠和结肠pH均显著低于19%、22%和25%ADF组(P<0.05)。随日粮ADF水平升高,粗纤维消化率逐渐下降(P<0.05),粗蛋白质、粗脂肪和能量消化率先增加后降低(P<0.05),分别以19%和16%ADF组最高。随日粮ADF水平升高,平均日采食量逐渐增加;日增重先增加后降低,以19%ADF组最高,为31.43 g/d。综合分析,断奶至2月龄肉兔适宜的ADF水平为19%。