抑郁症中医证候之实验动物模型制备方法的研究进展

本文总结了啮齿类动物、非人灵长类动物、树鼩、斑马鱼、果蝇等5种目前抑郁症模型常用实验动物的优势及适用研究条件,并综述了上述实验动物抑郁症模型的制备方法,以便了解现代抑郁症模型制备方法的发展现状。同时对肾阳虚型、肾阴虚型、肝肾阳虚型、肝郁气滞与肝郁脾虚型抑郁症模型等5种现存的抑郁症中医证候模型制备方法进行了综述,并分析总结了现有抑郁症中医证候模型存在的问题及发展方向,为选择符合中医药理论的实验动物动物模型提供文献参考,也为进一步改良与建立更加符合中医证候的抑郁症模型以及建立更加成熟的评价指标做铺垫。

山药总蛋白对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞氧化应激的保护作用及机制研究

探究山药总蛋白对高浓度D-葡萄糖(High concentrations of D-glucose,HG)诱导的人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)氧化应激损伤的保护作用及其机制。利用50 mmol/L HG建立HUVECs损伤模型。将HUVECs随机分为对照组、模型组、山药总蛋白低剂量组(0.5 mg/mL)以及山药总蛋白高剂量组(1 mg/mL),评估山药总蛋白对HG处理的HUVECs的细胞活力、细胞形态及血管生成能力的影响;检测细胞中活性氧(Reactive oxygen species,ROS)的水平和超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)的活力;以及培养基上清液中一氧化氮(Nitric oxide,NO)、8-羟基脱氧鸟苷(8-Hydroxy deoxyguanosine,8-OHdG)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)的水平;测定B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、硫氧还蛋白相互作用蛋白(Txnip)、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶剪切体-1(Cleaved caspase-1)和IL-1β蛋白的表达水平。结果显示,山药总蛋白能显著提高HG处理后的HUVECs的细胞活力(P<0.01),改善细胞凋亡形态,并显著升高SOD和CAT的活力(P<0.05或P<0.01)以及凋亡相关蛋白(Bcl-2/Bax)的比值、血管形成能力、NO分泌量。此外,山药总蛋白还显著降低了HUVECs的ROS、MDA、8-OHdG、IL-1β和IL-6的水平(P<0.05或P<0.01)及炎症相关蛋白(Txnip、NLRP3、cleaved Caspase-1、IL-1β)的表达水平(P<0.05或P<0.01),并且上述指标的变化均呈现明显的浓度依赖性。本研究结果表明,山药总蛋白可能通过抑制Txnip/NLRP3信号通路从而保护HUVECs拮抗HG诱导的氧化应激,恢复HUVECs内的氧化平衡,进一步减轻细胞的炎症反应。

解肌宣肺颗粒薄层鉴别研究

目的为了完善和提高解肌宣肺颗粒在医疗机构制剂中的质量标准,确保方法具有可操作、专属性强、准确可靠等特点,建立解肌宣肺颗粒的定性鉴别方法,开展了实验研究。方法鉴别解肌宣肺颗粒中北柴胡、葛根、麻黄、黄芩、甘草,并采用薄层色谱法定性鉴别。结果成功建立了解肌宣肺颗粒的薄层鉴别方法,颗粒剂中所含上述5味中药。在供试品色谱中并无阴性干扰现象,其斑点颜色与对照药材或对照品色谱对应位置相比,颜色一致。结论有效提高解肌宣肺颗粒质量标准的方法是本研究所确定的鉴别方法,该方法简便、重复性较好。

高校推进党建与科研工作深度融合的路径研究

为深入学习贯彻习近平总书记在中央政治局第五次集体学习时重要讲话精神,切实解决党建工作与中心业务工作“两张皮”问题,高等院校的工作人员需要进一步增强自身的思想自觉、政治自觉以及行动自觉,以身作则推动党建和科研业务工作进行深层次融合。高等院校科研平台是新时代科技创新的主力军,要时刻以新时代中国特色社会主义思想为指导,深入贯彻新时代党的建设总要求,不断推进党建与科研深度融合、相互补充、相互促进,以高质量党建促进高水平科技创新,以科研工作为基础,以校企合作为成果产出,努力将党建、科研、校企合作深度融合。

人参提取物延缓果蝇衰老的作用及机制研究

目的:基于果蝇模式生物,探讨人参提取物对果蝇衰老的延缓作用及其机制。方法:通过高效液相色谱法分析人参提取物中人参皂苷成分组成;将野生型Canton-S果蝇随机分成对照组及人参提取物组,通过寿命实验及检测摄食量、甘油三酯水平、繁殖能力、运动能力,以及在饥饿、热应激以及氧化应激条件下果蝇的存活时间来分析人参提取物的抗衰老能力;通过聚合酶链式反应测定腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)通路及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)通路相关基因转录水平。结果:人参提取物中含13种人参皂苷成分。与对照组相比,7.5 mg/mL人参提取物对果蝇的延寿率达9.72%,且不显著影响其摄食量、甘油三酯水平以及产卵量(P>0.05),能够显著提高果蝇的攀爬能力(P<0.05或P<0.01),可显著增加果蝇抵抗压力应激能力(P<0.05或P<0.01)。与对照组相比,人参提取物的摄入显著提高了AMPKα、FoxO、Sirt1、LKB1和CaMKII的转录水平(P<0.05或P<0.01),显著降低HDAC4和SREBP的转录水平(P<0.05)、提高ATP含量和ATP/ADP比值(P<0.05或P<0.01);显著降低mTOR通路相关基因PI3K、TORC、4E-BP和S6K的转录水平(P<0.05或P<0.01),极显著提高Atg1、Atg5、Atg8a和Atg8b的转录水平(P<0.01)。结论:人参提取物可通过激活AMPK通路并抑制mTOR通路延缓果蝇衰老。

人参活性成分在防治神经退行性疾病中应用的研究进展

神经退行性疾病是一类由神经系统内特定神经细胞的进程性病变或丢失而导致的神经功能障碍疾病,随着全球人口的老龄化,其发病率呈明显上升趋势。目前,此类疾病的发病机制尚不明确,临床上缺乏有效的治疗措施。人参含有多种活性成分,具有十分广泛的药理功效,在治疗神经退行性疾病中表现出巨大应用潜力。本文总结归纳了人参在神经退行性疾病防治中的活性成分及检测方法;然后,概述了人参在防治神经退行性疾病中的具体药理作用;最后,对其相关机制和通路进行了总结和评述。目前已经发现的具有神经退行性疾病的预防治疗活性的化学成分种类多,但其更多的活性成分及临床应用研究仍有待进一步深入研究。

针灸防治炎症性肠病的研究进展

炎症性肠病是一种全球性疾病,其机制尚未完全清楚,当前的治疗也存在一些不足。针灸作为一种绿色、安全、有效的治疗方式,对于炎症性肠病的防治具有一定的积极作用。本文通过对相关文献进行分析总结,发现目前针灸作为一种单独的治疗方式或同药物一起对炎症性肠病均具有一定的疗效,主要通过调节基因表达及表观遗传、提高机体免疫功能及调节炎症因子、改善肠道菌群、调节机体代谢物水平等途径延缓炎症性肠病的发展。现总结目前针灸防治炎症性肠病的研究进展,为进一步的研究及临床工作提供参考和依据。

基于传统功效的野生与栽培细辛药效学对比研究

目的基于细辛的传统功效,从抗炎、镇痛、解热等方面开展野生与栽培细辛药效学对比研究。方法采用小鼠耳肿胀和足肿胀方法考察野生与栽培细辛的抗炎作用;以醋酸致小鼠扭体和热板法考察其镇痛作用;以脂多糖及干酵母致热法考察其解热作用。结果与模型对照组比较,野生与栽培细辛12.0g·kg^(-1)(生药量)可显著抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀度(P<0.01)和角叉菜胶所致小鼠足肿胀度(P<0.01)。与等剂量野生细辛组比较,栽培细辛12.0g·kg^(-1)(生药量)抑制小鼠耳肿胀度和足肿胀度显著升高(P<0.01)。与模型对照组相比,野生细辛6.0g·kg^(-1)(生药量)、野生与栽培细辛12.0g·kg^(-1)(生药量)可显著抑制醋酸所致小鼠疼痛和热板所致小鼠疼痛(P<0.05或P<0.01)。与等剂量野生细辛组比较,栽培细辛12.0g·kg^(-1)(生药量)抑制小鼠痛阈值显著降低(P<0.05或P<0.01)。与模型对照组相比,野生细辛6.0g·kg^(-1)(生药量)、野生与栽培细辛12.0g·kg^(-1)(生药量)可显著降低脂多糖和干酵母混悬液所致小鼠发热程度(P<0.05或P<0.01)。与等剂量野生细辛组比较,栽培细辛12.0g·kg^(-1)(生药量)小鼠体温显著升高(P<0.05)。结论野生与栽培细辛均有不同程度的抗炎、镇痛及解热作用,在相同剂量下野生细辛作用效果优于栽培细辛。这一结果为临床上使用栽培和野生细辛提供了参考,同时为栽培细辛的质量标准控制提供数据支撑。

miRNA在心血管疾病中的研究进展

微小RNA(miRNA)是短的非编码RNA,能够结合靶信使RNA(mRNA)上的特定序列,从而转录后调节基因表达。Mi RNA在所有脊椎动物细胞中表达,在细胞增殖、分化和凋亡的一系列生物学过程中起到关键作用。心血管危险因素是许多心血管疾病发展的直接原因,包括血脂异常(尤其是高胆固醇血症)、高血压和糖尿病以及血管内皮细胞功能紊乱,诸多研究表明了miRNA在这些疾病背后的复杂生物学过程中起到的影响和作用。

SIRT1/FOXO1通路与骨质疏松关系的研究进展

骨质疏松症是一种以机体内骨量降低,骨结构被破坏,发生骨头易脆,甚至骨折的疾病。近年来随着对骨质疏松疾病研究地不断深入,发现多种蛋白以及通路发挥重要的作用。本文总结近年来SIRT1/FOXO1通路对骨质疏松症的影响,从氧化应激的角度阐述其通路发挥作用的机制,深层次揭示骨质疏松症的发病机制,为临床骨质疏松症的治疗及防治提供更多的思路。

人参的组织培养研究进展

人参是中国传统名贵中药材,被广泛应用于食品、药品及化妆品领域。本文从人参愈伤组织诱导、细胞悬浮培养、毛状根培养及不定根培养四个方面综述了人参组织培养的研究进展,以期为快速获得人参优质苗、提高人参次生代谢产物的含量提供参考,促进人参资源的开发和可持续利用。

参红补血颗粒含药血清对脂多糖诱导人脐静脉内皮细胞损伤的作用研究

目的 探讨参红补血颗粒(SBG)含药血清对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护作用,阐明其相关作用机制。方法 采用脂多糖(LPS)诱导HUVECs建立炎症损伤模型,分为正常对照组、脂多糖(LPS)组、5%SBG含药血清高、中、低剂量组。采用MTT法检测HUVECs的细胞活力,ELISA法检测HUVECs上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平,Western blot法检测HUVECs中TLR4、MyD88、ICAM-1蛋白表达水平。体内实验利用环磷酰胺和乙酰苯肼联合造模法建立血虚型血管内皮功能障碍(VED)模型小鼠,采用ELISA法检测各组小鼠血清中内皮素(ET-1)、血栓素B2(TXB2)、6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)、血管性血友病因子(vWF)。结果与正常对照组比较,5%含药血清孵育的SBG高、中、低剂量组细胞存活率均无明显变化(P>0.05),10%和20%含药血清孵育的SBG高、中剂量组细胞存活率均显著降低(P<0.05);与LPS组比较,5%SBG含药血清高剂量组TNF-α、IL-6水平明显下降(P<0.05),TLR4、MyD88、ICAM-1蛋白表达水平明显降低(P<0.01,P<0.05);与VED组小鼠比较,阳性对照组、SBG高剂量组小鼠NO和6-keto-PGF1a水平显著升高,ET-1、TXB2和vWF水平明显降低(P<0.01,P<0.05)。结论 参红补血颗粒含药血清通过调控TLR4信号通路,抑制炎症反应,减轻HUVECs炎症损伤,起到保护内皮细胞的作用。

参红补血颗粒对血虚型血管内皮功能障碍小鼠的作用研究

目的探讨参红补血颗粒(SBG)对血虚型血管内皮功能障碍(VED)小鼠模型的血管内皮保护作用,阐明其相关作用机制。方法通过腹腔注射环磷酰胺联合乙酰苯肼法建立血虚型VED小鼠模型,随机分为VED组、阳性对照组、SBG高剂量组、SBG中剂量组和SBG低剂量组,以腹腔注射等量生理盐水小鼠作为对照组。观察小鼠脏器指数,外周血象指标,HE染色法观察小鼠胸主动脉组织病理形态学,试剂盒检测血清中一氧化氮(NO)含量和胸主动脉组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性,Western blotting法检测胸主动脉组织中TLR4、MyD88、NF-κBp65、ICAM-1蛋白表达量。结果与VED组比较,阳性对照组及SBG高、中、低剂量组小鼠胸腺指数显著升高,脾脏指数明显降低(P<0.01,P<0.05),RBC、HGB、HCT、WBC、PLT水平显著升高(P<0.01,P<0.05),GSH-Px和SOD水平显著升高(P<0.01,P<0.05),TLR4、MyD88、NF-κBp65、ICAM-1明显降低(P<0.01,P<0.05)。结论SBG可以通过抑制TLR4信号通路,降低炎症因子水平,减轻氧化应激损伤,达到保护气滞血瘀型VED小鼠血管内皮的作用。

2型糖尿病气阴两虚证大鼠模型证候表现与血清代谢组学的相关性

目的探讨2型糖尿病气阴两虚证大鼠模型证候表现与血清代谢组学的关系。方法将SD大鼠随机分为对照组、模型组、消渴灵组,对照组用普通饲料喂养,模型组和消渴灵组用高糖高脂饲料喂养;第4周末,模型组和消渴灵组腹腔注射链脲佐菌素35 mg/kg,1 w后选取空腹血糖>11.1 mmol/L的大鼠用作后续研究,消渴灵组于第6周开始给予消渴灵2.2 g/(kg·d)。实验期间监测大鼠运动、精神状态、体质量、进食量、饮水量、抓力及空腹血糖等体征与生理状态。实验持续至第21周,末次给药后,禁食12 h,麻醉大鼠,采血,采用试剂盒测定大鼠血清中CD4^(+)、CD8^(+)、环腺苷酸(cAMP)、环鸟苷酸(cGMP)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量。通过高效液相色谱串联质谱联用(LC-MS/MS)的代谢组学技术对大鼠血清样本检测,并结合主成分分析(PCA)等多元统计分析方法筛选潜在的生物标志物及代谢通路。结果与对照组比较,模型组体征表现符合2型糖尿病气阴两虚证中医临床表现,CD4^(+)、cGMP、SOD、GSH-Px含量降低,CD4^(+)/CD8^(+)降低,cAMP、MDA含量升高,cAMP/cGMP升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与模型组比较,消渴灵组精神运动状态、抓力明显改善,CD4^(+)、cGMP含量升高,CD4^(+)/CD8^(+)升高,cAMP/cGMP降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。对照组、模型组和消渴灵组共有27个显著性差异代谢物,包括L-谷氨酸、花生四烯酸等,主要涉及的代谢通路为D-谷氨酰胺与D-谷氨酸代谢,花生四烯酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸代谢,精氨酸生物合成。结论2型糖尿病气阴两虚证病证结合大鼠模型证候表现可能与D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢,花生四烯酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸代谢,精氨酸生物合成相关。

白屈菜红碱对人卵巢癌SKOV3细胞迁移、侵袭和上皮-间质转化的影响

目的:探讨白屈菜红碱(CHE)对人卵巢癌SKOV3细胞迁移、侵袭和上皮-间质转化(EMT)的抑制作用,阐明其相关作用机制。方法:体外培养SKOV3细胞,分为对照组和2.5、5.0、10.0、20.0及40.0μmol·L^(-1)CHE组,采用噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖抑制率。体外培养SKOV3细胞,分为对照组、转移生长因子β1(TGF-β1)组、TGF-β1+5μmol·L^(-1)CHE组和TGF-β1+10μmol·L^(-1)CHE组,采用细胞划痕实验检测各组细胞迁移率,Transwell小室实验检测各组细胞中迁移细胞数和侵袭细胞数,Westren blotting法检测各组细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)蛋白表达水平,免疫荧光染色法检测各组细胞中E-cadherin和N-cadherin荧光强度。结果:MTT法,与对照组比较,5.0、10.0、20.0和40.0μmol·L^(-1)CHE组细胞增殖抑制率明显升高(P<0.05或P<0.01)。细胞划痕实验,与对照组比较,TGF-β1组细胞迁移率明显升高(P<0.01);与TGF-β1组比较,TGF-β1+5μmol·L^(-1)CHE组和TGF-β1+10μmol·L^(-1)CHE组细胞迁移率明显降低(P<0.01)。Transwell小室实验,与对照组比较,TGF-β1组细胞中迁移细胞数和侵袭细胞数明显增加(P<0.05);与TGF-β1组比较,TGF-β1+5μmol·L^(-1)CHE组和TGF-β1+10μmol·L^(-1)CHE组细胞中迁移细胞数和侵袭细胞数明显减少(P<0.01)。Westren blotting法,与对照组比较,TGF-β1组细胞中E-cadherin蛋白表达水平明显降低(P<0.01),N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01);与TGF-β1组比较,TGF-β1+5μmol·L^(-1)CHE组和TGF-β1+10μmol·L^(-1)CHE组细胞中E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.01),N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。免疫荧光染色,与对照组比较,TGF-β1组细胞中E-cadherin荧光强度明显降低,N-cadherin荧光强度明显升高;与TGF-β1组比较,TGF-β1+5μmol·L^(-1)CHE组和TGF-β1+10μmol·L^(-1)CHE组细胞中E-cadherin荧光强度明显升高,N-cadherin荧光强度明显降低。结论:CHE能够抑制人卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移、侵袭和EMT。

鹿茸多肽对骨质疏松模型大鼠的改善作用及对SIRT1/FOXO1信号通路的影响

目的:探讨鹿茸多肽(VAP)对骨质疏松(OP)模型大鼠的保护作用,并阐明其可能的作用机制。方法:60只12周龄SD大鼠随机分为对照组、模型组、阳性药组(1 mg·kg^(-1)·d^(-1)阿仑膦酸钠灌胃)、低剂量(100 mg·kg^(-1)·d^(-1))VAP组、中剂量(200 mg·kg^(-1)·d^(-1))VAP组和高剂量(300 mg·kg^(-1)·d^(-1))VAP组,每组10只。除对照组外,其余各组大鼠肌肉注射地塞米松(2 mg·kg^(-1))复制OP大鼠模型,对照组大鼠肌肉注射等体积生理盐水,每周2次,连续11周。双能X射线骨密度仪检测各组大鼠股骨骨密度(BMD),酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组大鼠血清中血钙(Ca^(2+))、血磷(P)、骨保护素(OPG)、碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(OCN)水平,生化法检测各组大鼠血清中丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性,HE染色观察各组大鼠骨组织病理形态表现,Western blotting法检测各组大鼠骨组织中沉默信息调节因子1(SIRT1)、过氧化氢酶(CAT)、Runt相关转录因子2(RUNX2)和叉头框蛋白O1(FOXO1)蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组大鼠股骨BMD明显降低(P<0.05);与模型组比较,阳性药组、中剂量VAP组和高剂量VAP组大鼠股骨BMD明显升高(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,模型组大鼠血清中Ca^(2+)、P和OPG水平及SOD活性明显降低(P<0.05),ALP、OCN和MDA水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,低剂量VAP大鼠血清中OPG水平明显升高(P<0.05),阳性药组、中剂量VAP组和高剂量VAP组大鼠血清中Ca^(2+)、P和OPG水平及SOD活性明显升高(P<0.05或P<0.01),阳性药组和各剂量VAP组大鼠血清中ALP、OCN和MDA水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。HE染色,与对照组比较,模型组大鼠骨组织中骨细胞数量减少且排列混乱,骨小梁纤细,出现大片断裂,髓腔扩大;与模型组比较,阳性药组、中剂量VAP组和高剂量VAP组大鼠骨组织中骨小梁粗壮,排列紧密。Western blotting法,与对照组比较,模型组大鼠骨组织中SIRT1、CAT、RUNX2和FOXO1蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与模型组比较,阳性药组、中剂量VAP组和高剂量VAP组大鼠骨组织中SIRT1、CAT、RUNX2和FOXO1蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01)。结论:VAP对OP模型大鼠具有保护作用,其作用机制可能与介导SIRT1/FOXO1信号通路抗氧化应激作用有关。

人参醇溶蛋白提取工艺优化、结构表征及体外抗氧化活性分析

为探讨人参中醇溶蛋白提取工艺,结构表征及体外抗氧化活性,本文以人参为研究对象,采用单因素实验和响应面试验探索人参醇溶蛋白的最佳提取工艺,以紫外吸收光谱法、红外分光光度分析法、氨基酸组成、微观结构观察等方法对人参醇溶蛋白进行结构表征,并对其在不同pH条件下的体外抗氧化活性开展一系列研究。通过测定DPPH自由基清除能力、羟基自由基清除能力、铁离子还原能力,评价人参醇溶蛋白的体外抗氧化活性。结果表明,人参中醇溶蛋白最佳提取工艺为:提取时间2 h、提取料液比1:10 g/mL、提取pH为7,此时人参醇溶蛋白得率为0.319%,蛋白含量为75%。通过紫外吸收光谱法、红外分光光度分析法、氨基酸组成成分分析试验结果表明,人参醇溶蛋白氨基酸总量为82.3 g/100 g,其中人体必需氨基酸含量为26.46 g/100 g,药用氨基酸含量为30.51 g/100 g,验证了该人参醇提物主要成分确为蛋白质,分子量约为3.3 kDa,SEM扫描电镜结果显示,该人参醇溶蛋白结构完整,表面稀疏且有不规则的脊形凸起以及少量孔隙,蛋白质颗粒呈现蜂窝聚集状态,具有稳定有序的网状结构。体外抗氧化试验结果表明,该蛋白在强酸性条件下具有较强的体外抗氧化活性,当pH=1时,人参醇溶蛋白对DPPH自由基的清除率为96%,对羟基自由基的清除率为79%,对铁离子的还原能力为0.86。

鹿茸多肽对肾阳虚证心肌损伤大鼠心肾功能的保护作用

目的分析鹿茸多肽(VAP)对肾阳虚证心肌损伤大鼠心肾功能的保护作用。方法48只SD大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组〔盐酸贝那普利片0.5 mg/(kg·d)〕、低、中、高剂量VAP组〔100、200、300 mg/(kg·d)VAP〕,每组8只。除空白组外,各组连续21 d肌肉注射氢化可的松〔25 mg/(kg·d)〕并同时腹腔注射阿霉素〔2.2 mg/(kg·d)〕造模,造模成功后进行灌胃给药28 d。观察各组体征及状态,检测各组心电图ST段变化,苏木素-伊红(HE)染色法观察各组心肌和肾脏组织纤维化和微血管损伤情况,生化法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组血清环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)和磷酸肌酸同工酶(CK-MB)水平,Western印迹检测各组肾脏组织中血管内皮生长因子(VEGF)、低氧诱导结合蛋白(HIF)-1和转化生长因子(TGF)-β1蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组两眼无神,精神萎靡,行动迟缓,活动耐力下降,皮毛干枯易脱落,相互扎堆,足背水肿,体质量下降,食欲不振,尿量减少等明显变化;与模型组比较,阳性药组、中、高剂量VAP组眼睛有神,动作敏捷,毛发光泽浓密,紧贴躯体,食量和排泄均接近于空白组。与空白组比较,模型组ST段显著抬高;与模型组比较,阳性药组和低、中、高剂量VAP组ST段抬高的水平显著降低。与空白组比较,模型组心肌纤维排列混乱,纤维化明显,有大量炎症细胞浸润,间隔变大;与模型组比较,阳性药组、中、高剂量VAP组心脏组织的侵袭及纤维化程度均明显降低;与空白组比较,模型组肾小球萎缩、基膜增厚及管腔狭窄或闭塞,小管萎缩及纤维化,可见上皮细胞肿胀、增殖,可见瘢痕形成;与模型组比较,阳性药组、中、高剂量VAP组肾小球萎缩及纤维化均有所减轻。与空白组比较,模型组LDH、MDA和cGMP水平、TGF-β1、HIF-1蛋白表达明显升高,SOD活性、cAMP和CK-MB水平、VEGF蛋白表达明显降低(P<0.01);与模型组比较,阳性药组、中、高剂量VAP组LDH、MDA和cGMP水平、TGF-β1、HIF-1蛋白表达明显降低,SOD活性、cAMP和CK-MB水平、VEGF蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论VAP对肾阳虚证心肌损伤模型大鼠心肾功能有明显保护作用,该作用机制可能是通过抑制氧自由基产生,改善心肌过氧化损伤,调节心肌细胞内外离子浓度,延长动作电位来达到抗心肌损伤的效果,并通过下调TGF-β1蛋白表达水平延缓肾间质纤维化,介导HIF-1/VEGF信号通路减轻肾阳虚证心肌损伤模型大鼠心脏及肾脏的微血管损伤。

南、北五味子蛋白抗氧化活性和对HepG2细胞氧化应激损伤的修复作用

采用碱提酸沉法提取南五味子蛋白(Schisandra sphenanthera protein,SSP)和北五味子蛋白(Schisandra chinensis protein,SCP),并测定其体外清除自由基能力、还原能力和对H_(2)O_(2)诱导的HepG2细胞氧化损伤的修复作用。采用CCK-8法检测细胞增殖率,荧光检测胞内活性氧水平,酶联免疫吸附法检测细胞氧化应激产物和抗氧化物酶系活性。结果表明,SSP清除自由基和还原能力均优于SCP,SSP与SCP都能对H_(2)O_(2)诱导HepG2造成的细胞生长抑制起到修复作用(P<0.05),显著降低胞内活性氧、丙二醛水平(P<0.05),显著提高超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶和谷胱甘肽的水平(P<0.05),且SSP对H_(2)O_(2)诱导的HepG2氧化应激损伤修复能力优于SCP。综上,2种五味子蛋白中SSP更适合应用于抗氧化功能性食品或保健食品工业中。

基于高光谱成像的主成分分析和波谱角分类技术的天麻粉质量标志物及相关成分可视化快速检测

目的利用高光谱成像(hyperspectral imaging,HSI)技术,通过一种原位质量标志物评估方法,与高效液相色谱含量测定相结合,建立预测模型对不同来源的天麻粉进行可视化评价。方法采用高效液相色谱法测定不同产地、不同晾干方式天麻粉中6种质量标志物含量并作为金标准;苯酚-硫酸法测定天麻多糖含量、水分测定仪测定含水量,两者作为辅助评价指标。HSI选用可见近红外(visible near-infrared,VNIR)和短波红外(short wave infrared,SWIR)双波段光谱进行分析比较。结果以鲜品切块晾干方式制备的天麻粉的质量标志物对羟基苯甲醇、多糖和水分含量均增加,同时天麻素和巴利森苷含量显著减少甚至消失。根据高光谱图像主成分分析(principal component analysis,PCA)预处理特征,基于波谱角(spectral angle mapper,SAM)的监督分类算法对不同产地和加工方式制备的天麻粉进行了原位、无损分类,其建立的线性回归模型实现了质量标志物含量的反演预测。结论通过高效液相色谱含量测定的准确性和高光谱原位预测的无损性相结合的方式进行现场可视化评价和预测,可以为不同产地、不同加工方式的天麻粉质量标志物快速检测提供技术参考。