奶牛A6型溶血性曼氏杆菌与牛支原体混合感染的实验室诊断

为探明某奶牛场呼吸系统疾病暴发的原因,本研究在排除了病毒感染的情况下,检测奶牛支原体和细菌感染情况。无菌采集5头病死奶牛的肺脏后进行牛支原体检测,细菌分离培养后染色镜检,随后对疑似致病菌进行随机引物PCR扩增、分子学鉴定、菌株荚膜血清型和基因型鉴定、动物致病性试验及药敏试验。结果显示,5头奶牛均感染了牛支原体及同一株β溶血革兰阴性杆菌,瑞氏染色可见两极浓染。经AJ11随机扩增多态性DNA(RAPD)、16S rRNA序列对比及血清型与基因型鉴定后,确认此致病菌为血清6型基因2型溶血性曼氏杆菌(Mh)。致病菌攻毒试验结果显示,该Mh菌株对小鼠的半数致死量(LD_(50))为1.94×10^(7)CFU。药敏试验结果显示该Mh菌株对多种抗菌药敏感。本研究为奶牛呼吸系统疾病的诊断及防控提供了参考。

副猪嗜血杆菌vacJ基因缺失菌株构建及其生物学特性分析

为了探究副猪嗜血杆菌外膜脂蛋白编码基因vacJ在其致病中的作用,以血清5型临诊分离株HS49为研究对象,构建了vacJ基因缺失菌株(ΔvacJ),进而比较了野生株与缺失株在生长特性、对细胞的黏附及入侵和毒力等方面的差异。结果显示,与野生株相比较,缺失vacJ后的菌株生长速率明显下降,对PK-15细胞的黏附和入侵能力则明显降低,形成生物被膜的能力也显著下降。缺失vacJ菌株对Balb/C小鼠感染模型的LD_(50)是野生株的14倍,表明vacJ基因敲除后,副猪嗜血杆菌毒力明显下降。表明vacJ基因与副猪嗜血杆菌生长、黏附入侵、生物被膜形成及毒力密切相关。

抗犬VEGF单克隆抗体及夹心ELISA试剂盒的制备及应用

本研究旨在制备犬血管内皮生长因子(VEGF)单克隆抗体和研制犬VEGF双抗夹心的ELISA检测试剂盒。研究利用原核表达的方法制备出具有良好反应原性的重组融合蛋白犬VEGF-His,并在此基础上进行了犬VEGF单克隆抗体的制备及鉴定,结果表明,所获得的犬VEGF单克隆抗体对犬VEGF蛋白具有良好的反应原性和较高的特异性。利用此单克隆抗体,与VEGF的兔多克隆抗体血清分别作为夹心ELISA检测试剂盒的上下层抗体使用,建立了以犬VEGF为抗原的夹心ELISA试剂盒的检测方法,并对正常健康犬及乳腺肿瘤患犬血清进行了检测,得出了此试剂盒的阳性和阴性临界值。实验结果表明,此试剂盒具有良好的敏感性、特异性和重复性,且利用本试剂盒对临床样本进行验证时,阳性符合率为87. 5%,阴性符合率为97. 56%,具有较高的临床应用价值。

SPF雏鸡感染REV后中枢免疫器官细胞凋亡及相关因子的变化

为探索禽网状内皮组织增生病病毒(REV)感染对雏鸡中枢免疫器官细胞凋亡及其相关酶活性和基因表达的影响,将70只1日龄SPF雏鸡随机分为REV感染组(I)和对照组(C),应用酶活性检测、荧光定量PCR、ELISA、TUNEL等方法对中枢免疫器官细胞的Caspase-3和Caspase-9活性、Bcl-2mRNA及其蛋白质表达和凋亡细胞的动态变化进行了检测。结果发现,SPF雏鸡感染REV后,其胸腺中Caspase-3和Caspase-9活性、Bcl-2mRNA及其蛋白质含量、凋亡细胞数量均于7~28d内不同程度(P<0.05或P<0.01)高于对照组雏鸡;法氏囊中上述被检指标均于7~35d内显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于对照组雏鸡。研究表明REV感染引起SPF雏鸡中枢免疫器官Caspase-3和Caspase-9活性增强、Bcl-2mRNA及其蛋白质表达上调所致的细胞凋亡与雏鸡免疫器官功能抑制密切相关。

禽网状内皮组织增生病病毒感染对SPF雏鸡血液和局部淋巴组织CD4^+/CD8^+细胞及相关细胞因子表达的影响

旨在探讨禽网状内皮组织增生病病毒(reticuloendotheliosis virus,REV)对SPF雏鸡血液和局部淋巴组织中T淋巴细胞数量以及相关细胞因子表达的影响。将96只1日龄SPF雏鸡随机分为REV感染组和对照组,应用流式细胞术、酸性α-醋酸萘酯酶染色(acidα-naphthyl acetate esterase,ANAE)、荧光定量PCR等方法对上述指标进行检测。试验数据表明,与对照组相比,感染组雏鸡血液CD4^+T淋巴细胞数量在第7-35天显著降低、CD8^+T淋巴细胞数量在第7-28天显著升高,CD4^+/CD8^+比值在第7-28天显著降低(均P<0.05或P<0.01);局部淋巴组织哈德尔腺(Hader’s gland,HG)、派伊尔结(Peyer’s patch,PP)和盲肠扁桃体(caecal tonsil,CT)中ANAE^+T淋巴细胞数量均显著降低(均P<0.05或P<0.01);GH、PP和CT中细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α转录量都有不同程度升高。本研究表明,REV感染引起雏鸡血液中CD4^+T淋巴细胞数量降低、CD4^+/CD8^+T淋巴细胞比例失衡、局部淋巴组织中T淋巴细胞数量相对减少及细胞因子TNF-α转录持续升高与REV造成感染雏鸡细胞免疫功能显著降低密切相关。

鸡骨髓源树突状细胞体外诱导

为了探讨鸡骨髓源树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cells,BMDCs)的体外诱导培养方法,并分析鸡树突状细胞(DCs)的主要生物学特性,将用淋巴细胞分离液分离的鸡骨髓细胞经差速贴壁纯化后获得单个核细胞,然后经粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)体外诱导分化,细胞培养后第7天再加入脂多糖(LPS)继续培养48 h刺激成熟,分别于倒置显微镜和电子显微镜下进行形态变化观察,同时应用流式细胞仪对鸡骨髓源树突状细胞表面标志进行分析、鉴定。结果显示鸡骨髓细胞培养7 d后,细胞体积增大,细胞表面长出树突状小突起,细胞表面高表达MHCⅡ和CD11c分子,经LPS刺激后,突起伸长变粗,扫描电镜观察呈典型的树突状细胞形态,细胞表面MHCⅡ表达显著升高,依据上述方法成功获得大量而高纯度的鸡骨髓源树突状细胞,为进一步研究禽类DCs的生物学功能及其在某些疾病发生中的作用奠定了基础。

禽网状内皮组织增生病病毒感染SPF雏鸡血液淋巴细胞增殖功能及其细胞周期相关因子变化

为探索禽网状内皮组织增生病病毒(REV)感染对SPF雏鸡外周血液的淋巴细胞增殖功能及其细胞周期素D1、p27表达的影响。将80只1日龄SPF雏鸡随机分为REV感染组和对照组,应用CCK-8、RT-qPCR、Western Blot等方法对雏鸡外周血液上述被检指标的动态变化进行检测。结果表明,REV感染SPF雏鸡后,其外周血液中T、B淋巴细胞增殖能力明显低于对照组雏鸡,且p27mRNA水平显著(P<0.05)高于对照组雏鸡;病毒感染后期Cyclin D1mRNA表达及其蛋白质含量均显著高于(P<0.05)对照组雏鸡,然而p27转录显著低于对照组雏鸡(P<0.05)。REV感染SPF雏鸡导致的血液T、B细胞增殖能力下降、Cyclin D1mRNA转录及其蛋白质含量的增加而p27mRNA转录下降与REV感染所致的雏鸡免疫机能下降密切相关。

马骨关节炎模型关节液中CTX-Ⅱ含量变化的研究

目前马骨关节炎(OA)的临床诊断尚缺少有效的生物标志物(BM)。为探讨马关节液Ⅱ型胶原羧基端端肽(CTX-Ⅱ)的浓度与OA发病程度的关系。试验选用13匹蒙古马,随机分为造模组(n=8)和对照组(n=5),在马左侧腕关节内注入2 mL两性霉素B(25 mg/mL)诱导OA,对照组马匹注入等量PBS作为对照,于造模后每周采集一次关节液,直至第9周。ELISA检测马关节液中的CTX-Ⅱ浓度。结果显示,与对照组相比,造模组从第1周开始,关节液中CTX-Ⅱ的浓度增加,从第2周开始显著增加(P<0.05),第4周开始极显著增加(P<0.01)并且保持增加的趋势到第9周。造模组马匹第3周开始出现不同程度跛行。试验结果表明,CTX-Ⅱ浓度的升高在跛行前就已经显著升高,推测CTX-Ⅱ可以作为马关节炎BM,为以后建立马OA的快速临床诊断技术提供理论依据。

禽网状内皮组织增生症病毒感染雏鸡血液T细胞数量和细胞因子含量变化

为探索禽网状内皮组织增生症病毒(REV)感染对雏鸡外周血液细胞免疫功能及其相关细胞因子的影响,将60只1日龄SPF雏鸡随机分为REV感染组和未感染REV的对照组,应用流式细胞术结合ELISA等免疫学方法,通过血液T淋巴细胞亚型数量与比值变化,以及其免疫相关因子含量等动态变化的检测,系统地研究REV感染对SPF雏鸡血液细胞免疫功能的影响。结果显示,REV感染SPF雏鸡外周血液CD4+T淋巴细胞在整个试验期间均明显低于对照雏鸡(P<0.05),而CD8+T淋巴细胞数量除病毒感染后第7天明显增加(P<0.01)外,其余被检时间点均显著低于对照雏鸡(P<0.05或P<0.01),CD4+与CD8+T淋巴细胞比值在病毒感染早期较对照雏鸡明显增加,而病毒感染后期显著低于对照雏鸡,与相应对照雏鸡比较,REV感染SPF雏鸡血液IL-2和IFN-γ含量明显降低(P<0.05),而IL-4和IL-10含量显著上升(P<0.05)。结果表明,REV感染所致的SPF雏鸡血液免疫功能抑制与其降低雏鸡外周血液免疫增强因子含量,增加免疫抑制因子含量及减少CD4+和CD8+T淋巴细胞数量密切相关。

饲粮中添加凹凸棒土对荷斯坦犊牛生长性能、腹泻率、血清生化指标和肠道菌群的影响

本试验旨在研究饲粮中添加凹凸棒土(PAL)对荷斯坦犊牛生长性能、腹泻率、血清生化指标和肠道菌群的影响。选取30头健康、体重相近的初生犊牛,随机分成2组,每组15个重复,每个重复1头牛。对照组饲喂基础饲粮,PAL组饲喂基础饲粮+2 000 mg/kg PAL。试验期63 d。结果显示:1)与对照组相比,PAL组犊牛1~21日龄平均日增重(ADG)和1~21日龄、57~63日龄平均日采食量(ADFI)显著增加(P<0.05)。2)与对照组相比,PAL组犊牛1~21日龄和57~63日龄粪便评分和腹泻率显著降低(P<0.05)。3) PAL组犊牛21日龄血清免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)以及56日龄血清免疫球蛋白G(IgG)和63日龄血清IgA浓度显著高于对照组(P<0.05)。4)与对照组相比,PAL组犊牛21日龄血清白细胞介素-4(IL-4)浓度与63日龄血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和总抗氧化能力(T-AOC)显著升高(P<0.05),而63日龄血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和丙二醛(MDA)浓度显著降低(P<0.05)。5)与对照组相比,PAL组犊牛21日龄肠道总菌和63日龄肠道双歧杆菌和芽孢杆菌的数量显著升高(P<0.05),而21和63日龄肠道大肠杆菌的数量显著降低(P <0.05)。以上结果表明,在本试验条件下,饲粮中添加PAL可提高荷斯坦犊牛的ADG(1~21日龄),改善犊牛免疫水平和抗氧化能力,调控肠道菌群,降低腹泻率。

REV感染对SPF雏鸡外周血液B淋巴细胞功能和免疫球蛋白含量的影响

为了探索禽网状内皮组织增生病病毒(reticuloendotheliosis virus,REV)感染对SPF雏鸡外周血液B淋巴细胞功能和免疫球蛋白含量变化的影响,试验将100只1日龄SPF雏鸡随机分为REV感染组和对照组,REV感染组(50只)雏鸡通过腹腔注射REV稀释液(0.5 mL/只),对照组(50只)雏鸡相同途径给予等量灭菌生理盐水,于REV感染后第1,7,14,21,28,42天,每组随机抽取5只,心脏无菌采血,应用细胞培养技术结合MTT和免疫学等检测方法,检测REV感染对SPF雏鸡外周血液B淋巴细胞增殖能力和IgG、IgA、IgM含量的影响。结果表明:SPF雏鸡感染REV后1~42 d,外周血液中无论是B淋巴细胞对脂多糖(LPS)的增殖能力还是血清IgG、IgA、IgM含量均不同程度低于对照组雏鸡,其中REV感染组B淋巴细胞对LPS的增殖能力在REV感染后第7,14天显著或极显著低于对照组雏鸡(P<0.05或P<0.01);IgG含量在REV感染后第14,28天显著低于对照组雏鸡(P<0.05);IgA含量在REV感染后第21,28,42天显著或极显著低于对照组(P<0.05或P<0.01);IgM含量在REV感染后第42天极显著低于对照组(P<0.01)。说明REV感染可导致SPF雏鸡外周血液的B淋巴细胞功能下降和免疫球蛋白IgG、IgA、IgM含量下降。

异氟醚麻醉下高气腹压对犬呼吸循环参数及动脉血气的影响

为了研究异氟醚麻醉条件下高气腹压(15 mmHg)对犬呼吸循环参数及动脉血气的影响,为腹腔镜技术在小动物临床推广提供一定的理论依据,将12只健康本地犬分为对照组和高气腹压组,在异氟醚麻醉下建立高气腹压并监测该过程中呼吸循环及动脉血气参数的变化。结果显示,与对照组相比,高气腹压组的心率、呼吸频率、平均动脉压、动脉血二氧化碳分压和动脉血总二氧化碳含量显著升高(P<0.05),动脉血pH值显著降低(P<0.05)。表明在异氟醚麻醉条件下,高气腹压会对犬的呼吸循环及动脉血气参数造成影响,在短时间内使用高气腹压是可行的,但必须加强监护以保证其安全性。

H5N1亚型禽流感病毒感染SPF雏鸡免疫器官变化

为了探讨 H5N1 禽流感病毒(AIV)感染对 SPF 雏鸡免疫器官细胞免疫功能的影响。以7日龄SPF雏鸡为研究对象,应用组织化学技术结合病理学方法,通过T细胞数量、增殖功能、CD4+和CD8+亚型数量及其比值变化的检测,对 H5N1亚型AIV感染 SPF 雏鸡后,免疫器官细胞免疫变化进行了较系统研究。结果发现,H5N1亚型AIV感染SPF雏鸡后3~7d,其胸腺、脾脏、腔上囊无论是T细胞数量还是胸腺和脾脏T细胞对Con A的增殖功能,以及CD4+和 CD8+T细胞数均显著低于对照雏鸡。病毒感染雏鸡后1 ~ 5d,CD4+/CD8+T 细胞比值也显著低于对照雏鸡;AIV感染雏鸡全部发病,呈现典型AIV感染症状,死亡率为40%。表明 AIV感染所致雏鸡免疫器官细胞免疫功能低下,是AIV免疫致病机制的重要环节。

鸡Skp2实时荧光定量RT-PCR方法的建立及应用

为了建立以及应用鸡细胞S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase-associated protein 2,Skp2)的实时荧光定量PCR方法,以鸡Skp2基因为研究对象,根据GenBank中已发表的鸡Skp2和β-actin序列的高度保守区域设计引物,构建重组质粒作为标准品,成功建立了检测鸡胚成纤维细胞(Chicken embryo fibroblast,CEF)中Skp2 mRNA表达的实时荧光定量RT-PCR方法,并对其Tm值和引物浓度等进行了优化。该方法最优反应体系为20.0μL,包含Real-time PCRMaster mix(2×)10.0μL,上、下游引物(10.0μmol/L)各1.0μL,cDNA 2.0μL,ddH2O 6.0μL;最佳反应条件为95℃预变性10 s,95℃变性5 s,60℃退火/延伸34 s,30个循环。应用该方法对CEF中Skp2 mRNA的表达量进行检测,发现在CEF感染禽网状内皮组织增生病病毒(REV)后,其细胞中Skp2 mRNA表达量均高于对照组,且在24、48、72 h显著增加。研究首次建立了检测鸡Skp2基因的检测方法,该方法稳定性良好,精确度高,特异性强,为进一步定量研究鸡Skp2 mRNA表达及其与细胞周期的关系奠定了基础。

静松灵对小型猪脑区NO-cGMP信号转导系统的影响

以巴马小型猪为研究对象,探究静松灵对小型猪主要脑区中NO-cGMP信号系统的影响。将20头小型猪随机分为2组,生理盐水对照组5头,其余为静松灵(T1=15 min、T2=45 min、T3=75 min)试验组各5头。收集不同脑区组织后测定NO含量、NOS活性与cGMP含量。结果显示,注射静松灵后会使小型猪不同脑区中NO含量、NOS活性与cGMP含量均下降。在大脑皮质、丘脑、海马和脑干4个脑区内NOS活性均下降,而在海马和丘脑内NO含量与大脑皮质和脑干内cGMP含量会出现显著降低。结果表明,静松灵的麻醉作用可以显著抑制NO-cGMP信号转导系统。

右美托咪定对氯胺酮致发育期大鼠神经损伤的影响

本研究旨在探讨右美托咪定干预氯胺酮致发育期大鼠神经损伤的影响及其可能的机制。7日龄SD大鼠随机分为对照组、氯胺酮组(氯胺酮20 mg·kg^(-1)腹腔注射,每1.5 h注射1次,共5次)、右美托咪定组(右美托咪定腹腔注射15μg·kg^(-1))和氯胺酮+右美托咪定组(氯胺酮注射前30 min,腹腔注射15μg·kg^(-1)右美托咪定)。最后1次给药90 min后,取大脑组织固定后进行尼氏染色;测定海马和皮质组织中CAT、GSH、MDA、IL^(-1)β和IL^(-1)8的含量。尼氏染色结果显示,与对照组相比右美托咪定预先用药可以缓解氯胺酮导致的海马CA1区、CA3区和皮质区的神经元丢失。右美托咪定预处理还可以显著降低(P<0.05)海马和皮质MDA、IL^(-1)β和IL^(-1)8水平,显著增加(P<0.05)CAT和GSH含量。综上表明,右美托咪定预处理能够有效降低海马和皮质MDA水平、增加CAT和GSH含量,并抑制炎症因子IL^(-1)β和IL^(-1)8的分泌,在氯胺酮致发育期大鼠神经损伤时发挥神经保护作用。

柠檬苦素通过激活AMPK减轻高脂饲料诱导的小鼠肾损伤

旨在研究柠檬苦素(Limonin,LM)对高脂饲料诱导的小鼠肾损伤的保护作用。选用体重21~23 g雄性C57BL/6小鼠25只,随机分为5组(n=5):对照组、LM组、高脂组、高脂+低剂量LM组(60 mg·(kg·d)^(-1))和高脂+高剂量LM组(120 mg·(kg·d)^(-1))。12周后称量各组小鼠体重;使用自动生化分析仪检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN);使用试剂盒检测肾组织TG、TC;通过苏木精-伊红(HE)、糖原(PAS)染色观察肾组织病理组织学变化;通过免疫组织化学检测肾中脂肪酸合成酶(FAS)、甾醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)、脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL)、激素敏感性脂肪酶(HSL)蛋白含量;通过蛋白免疫印迹检测AMP活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化的AMPK(P-AMPK)、FAS、SREBP1、ATGL、HSL及肾损伤分子1(KIM1)的表达;通过分子对接检验LM、阿卡地新(AICA Riboside,AICAR)以及多索吗啡(Dorsomorphin,Compound C)与AMPK蛋白结合能力。结果显示,与高脂组相比,LM干预显著降低了小鼠血清和肾中甘油三酯含量(P<0.05),改善了高脂饲喂引起的肾组织病理学损伤,促进AMPK磷酸化(P<0.05),显著上调ATGL、HSL蛋白的表达(P<0.05),抑制SREBP1、FAS蛋白的表达(P<0.05)。分子对接结果显示LM能与AMPK紧密结合且存在多个与AICAR结合AMPK的相同位点。结果提示,LM通过激活AMPK减轻肾脂肪异位沉积从而改善高脂饲料诱导的小鼠肾损伤。

右美托咪定复合强痛宁对犬的麻醉效果观察

为了探究右美托咪定复合强痛宁对犬的麻醉效果,试验选取健康杂种犬6只,体重10~15 kg,实施颈部肌肉注射右美托咪定(按体重80μg/kg)和强痛宁(按体重0.1 mg/kg)。6只试验犬作为麻醉组先进行单纯麻醉试验。14 d后再次对这6只犬麻醉并进行手术试验,作为手术组,剖腹探查术2只、节育术4只(其中公犬去势术和母犬绝育术各2只)。试验犬术前不断水,禁食6~8 h,手术部位提前进行剃毛消毒。在复合麻醉前和注射药物后5,10,20,30,40,50,60 min监测体温、心率、血氧饱和度、血压(收缩压、舒张压、平均动脉压)以及反射活动(角膜、肛门、眼睑反射),并比较单纯麻醉和麻醉后手术过程中具体的麻醉效果。结果表明:试验犬注射右美托咪定和强痛宁后,平均在4.1 min内进入麻醉期,麻醉持续时间比较适宜,麻醉组苏醒期为(45.00±6.11)min,手术组苏醒期为(43.25±3.14)min,手术组与麻醉组的体温变化基本相同,随着麻醉时间延长,呈现出逐渐下降的趋势,两组间体温在麻醉后5~15 min内差异显著(P<0.05),但之后均差异不显著(P>0.05)。相同时间点手术组和麻醉组犬的血氧饱和度无显著差异(P>0.05),呈先下降后逐渐升高趋势,两组的血氧饱和度最低在80%左右,氧合状态略差,而麻醉后10~35 min手术组血氧饱和度较麻醉组略低。麻醉后20~60 min手术组的心率显著高于麻醉组(P<0.05)。麻醉后5~55 min手术组与麻醉组的收缩压、舒张压、平均动脉压均差异不显著(P>0.05),手术组均为先下降后平稳回升,在麻醉组中出现平缓下降趋势;麻醉后60 min,手术组与麻醉组的收缩压、舒张压、平均动脉压均差异显著(P<0.05)。试验犬在手术期间角膜、肛门反射均未完全消失,麻醉组试验犬在注射麻醉剂的20~60 min内肛门、角膜反射表现出反应迟钝,而在15~60 min时间内,眼睑反射无反应。说明犬颈部肌肉注射右美托咪定和强痛宁,可顺利完成剖腹探查和绝育术等常见手术。

雏鸭感染H5N1亚型禽流感病毒后主要组织器官超微病理变化及病毒抗原分布的动态变化研究

应用电子显微镜技术和RT-PCR检测方法,对H5N1亚型禽流感病毒（AIV）感染雏鸭后的主要组织器官超微结构变化和病毒抗原分布的动态变化进行了研究,为进一步探讨H5N1亚型AIV的致病机制提供了十分重要的参考依据。21日龄雏鸭感染AIV后第3~7天,RT-PCR结果显示,雏鸭各个实质器官内均有AIV分布,但不同组织无论病毒出现时间,还是病毒的持续时间,均有较大差异,其中肝脏和胰脏,检出病毒时间最短,持续时间最长;组织显微病理学结果显示法氏囊、脾脏和胸腺等免疫器官内淋巴细胞数量减少,部分细胞核固缩、染色质边集或溶解;肺泡上皮细胞部分细胞核固缩变形等。上述研究结果表明,H5N1亚型AIV感染雏鸭后具有广泛的组织细胞嗜性,其中,肝脏和胰脏是该株AIV复制的主要靶器官,AIV诱导呼吸器官和免疫器官发生明显的细胞坏死或凋亡可能是H5N1亚型AIV致病性的重要表现形式。

REV感染对SPF雏鸡免疫器官细胞凋亡及c-Myc基因表达的影响

为探究禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)感染对雏鸡胸腺、脾和法氏囊细胞凋亡及相关基因c-Myc表达、核质比值的影响,并阐述其相互关系。以1日龄SPF雏鸡为研究对象,应用分子生物学和免疫学技术结合病理学检测方法,通过对上述免疫器官c-Myc基因m RNA及其蛋白含量、c-Myc阳性细胞数、细胞凋亡率及核质比值的检测,较全面系统地研究了REV感染SPF雏鸡后第1、7、14、21、28和42天上述被检指标的动态变化。结果显示,REV感染雏鸡后,无论中枢免疫器官(胸腺、法氏囊)还是外周免疫器官(脾),其c-Myc基因mRNA表达和蛋白含量及阳性细胞数量均不同程度的高于对照雏鸡,其中21~28 d差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01);免疫器官细胞凋亡率在病毒感染后14~28 d极显著(P<0.01)高于对照雏鸡;免疫器官细胞核质比值不同程度的小于对照雏鸡,特别是病毒感染后21~28 d差异显著(P<0.05),以法氏囊细胞凋亡和核质比变化尤为明显;细胞凋亡率和核质比值变化具有较好的相关性(R^2=0.812,P<0.01)。表明REV感染所致免疫器官细胞凋亡与c-Myc基因过表达密切相关,核质比值减小程度可间接反映细胞凋亡程度。