哈尔滨市部分鲜奶中致泻性大肠埃希氏菌的分离与鉴定

为了解哈尔滨市鲜奶中致泻性大肠埃希氏菌(E.coli)的病原学特征,分别在10家奶站和牛场采集鲜奶共550份,通过菌落形态、生化特性、血清型及动物实验等一系列的鉴定,确认为致泻性大肠埃希氏菌的为5株。其中3株为肠致病性E.coli(EPEC),2株为肠侵袭性E.coli(EIEC)。

外科动物试验中猪的麻醉方法

作者介绍了临床上猪麻醉的过程,从麻醉前准备到术后处理整个过程的用药及麻醉技术。麻醉前,使用一些镇静药物,可使麻醉诱导更加平稳;临床上多采用静脉麻醉、吸入麻醉进行全身麻醉,可采用多种给药方式进行麻醉如腹腔注射、静脉注射和气管内给药等;同时在吸入麻醉过程中可应用肌肉松驰药来缓解肌肉紧张,在麻醉苏醒前要进行必要的术后处理,以防止意外发生。

20种燕麦及青贮饲草农艺性状及营养成分分析

为了鉴选出优质的饲用燕麦品种,本试验测定了白城市农科院种植的20个燕麦品种乳熟期的株高、叶长、叶宽、叶片数、茎粗、粗蛋白(CP)、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)、粗脂肪、粗灰分、碳水化合物、木质素,并采用灰色关联度分析评价方法进行综合评价。结果表明,(1)‘白燕8号’‘Rus25’‘1425’的农艺性状最优,产量最高。(2)营养成分与饲草品质上,供能方面最适宜选育的品种为‘3695’‘3916’‘1279(2014Rus-14)’,适口性方面‘3916’‘3695’‘Ca89’三个品种最佳,‘白燕8号’‘太8-1’‘Rus25’这三种燕麦综合性评价最优,更适合制作饲草。(3)青贮品质上‘Rus25’和‘3916’灰色关联系数最大,与理想指标最接近,且各项指标排名靠前,品质最优秀。(4)结合20个品种在生产性能、营养成分与饲用品质以及青贮营养成分的表现,‘Rus25’综合表现及单项指标表现均处于前列,品质最好。

关于禽类实验动物感染实验中的安乐术的分析与思考

实验动物病原学感染实验在兽医科学和生物制品研究等方面发挥越来越大的作用。我们对从2009年1月1日至2014年4月正式发表在美国国家生物技术信息中心(NCBI)的以禽类进行感染试验的科研报告进行了文献汇总,重点关注动物福利,尤其是安乐死方面。通过对247项研究报告的调查,虽然几乎所有报告都声称通过其所在单位的动物实验和管理福利委员会的审核,但同类感染实验中采用的临终终点的判定和安乐术不尽相同,麻醉途径和剂量也缺乏标准。文章对目前国际上报道的安乐术的特点也做了比较。

浅析我国农业信息化现状及对策

总结了我国农业信息化发展现状,分析了我国农业信息化存在的问题,并提出了积极推进农业信息服务体系建设、加强农业信息化网络建设、加强农业数据库建设、加强农业信息队伍建设、加强信息化应用的引导、带动农民应用信息服务的对策。

动物常用喹诺酮类抗菌药物分析进展

喹诺酮类药物抗菌作用与疗效可与第三代头孢菌素媲美,已成为兽用抗菌药物中最活跃的研究领域之一,随之而来的这类药物的分析亦趋重要。为减少或避免共用同一品种喹诺酮类药物而产生的耐药性以及交叉耐药性,兽用和人用的喹诺酮类药物逐渐分离,所以本文仅对兽医常用的九种喹诺酮类药物分析进展综述,以期指导兽药质量标准的建立及指导生产。

动物生理学情境化教学设计浅探

动物生理学是研究动物体生命活动现象及其规律的科学,是畜牧兽医学科各专业的骨干课程之一,其内容繁多、深奥抽象,难记忆。情境化教学在中国教育领域已经得到越来越广泛的应用,根据教学内容采用历史性情境、问题性情境、实事性情境、生活化情境,可以激发学生学习兴趣,提高教学效果。对情境化教学的优势、基本方法及其在动物生理学教学中的应用设计进行了介绍。

熟地黄多糖对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠的免疫调节作用研究

【目的】研究熟地黄多糖对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠的免疫调节作用,为熟地黄多糖用于临床治疗免疫低下疾病或开发相关保健食品提供科学依据。【方法】选用36只昆明系小鼠,随机分为6组:空白对照组、免疫抑制模型组、黄芪多糖组及熟地黄多糖低、中、高(分别灌胃熟地黄多糖50、100、200 mg/kg)剂量组(PRRPL、PRRPM、PRRPH),每组6只。除空白对照组外,其余各组小鼠均腹腔注射80 mg/kg环磷酰胺,建立免疫抑制模型。造模后各组小鼠分别灌胃相应药物,1次/d,连续15 d,测定小鼠体重、腹腔巨噬细胞吞噬能力、免疫器官系数、脾淋巴细胞增殖及细胞周期、血清细胞因子含量,观察脾脏和胸腺组织形态学、肠道派氏节数目等免疫指标。【结果】与空白对照组相比,模型组脾脏指数极显著升高(P<0.01),脾脏红髓、白髓界限不清,脾淋巴细胞数量减少;胸腺指数降低,皮质、髓质不清,结构破坏;脾淋巴细胞增殖能力、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力及血清白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、γ-干扰素(INF-γ)水平均显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01);脾淋巴细胞滞留在G0/G1期。与模型组相比,熟地黄多糖能极显著降低小鼠的脾脏指数(P<0.01),缓解环磷酰胺造成的脾脏组织损坏,熟地黄多糖各剂量组对脂多糖(LPS)诱导的脾淋巴细胞增殖具有极显著的促进作用(P<0.01),熟地黄多糖各剂量组能显著或极显著提高免疫抑制小鼠血清IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、INF-γ水平(P<0.05;P<0.01),缓解淋巴细胞周期滞留,且高剂量组熟地黄多糖能显著提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能(P<0.05)。造模前后及熟地黄多糖对肠道派氏结数量均无显著影响(P>0.05)。【结论】熟地黄多糖能提高免疫抑制小鼠的免疫功能,可用于治疗免疫低下类疾病药物和保健品的开发。

邻苯二甲酸二-2-乙基己酯通过ROS/PTEN/PI3K/AKT轴诱导HD11细胞凋亡和程序性坏死

旨在探究邻苯二甲酸二-2-乙基己酯[di(2-ethylhexyl)phthalate,(DEHP)]暴露通过ROS/PTEN/PI3K/AKT通路诱导细胞凋亡和程序性坏死的作用机制。本试验以HD11细胞为研究对象,设置对照组(C组)、30μmol·L^(-1)DEHP组(L组)、60μmol·L^(-1)DEHP组(M组)和90μmol·L^(-1)DEHP组(H组)。用不同浓度的DEHP处理HD11细胞24 h后,采用CCK-8检测细胞存活情况,生化试剂盒检测氧化应激指标,包括活性氧(ROS)水平,丙二醛(MDA)含量与总抗氧化能力(T-AOC)水平,以及总超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性。采用AO/EB染色和流式细胞术检测凋亡率和坏死率,荧光定量RT-PCR和Western blot法检测PTEN/PI3K/AKT通路基因及凋亡与坏死相关基因的mRNA和蛋白表达,结果表明,与对照组相比,DEHP暴露可显著抑制HD11细胞的活力,且半数抑制浓度(IC_(50))为180.644μmol·L^(-1)。与对照组相比,L、M、H DEHP组AO/EB染色和流式细胞术结果显示DEHP暴露导致HD11细胞具有典型的凋亡和坏死特征。与对照组相比,L、M、H DEHP组ROS水平呈现上升趋势(P<0.01),L、M、H DEHP组MDA含量显著升高(P<0.01),而T-AOC水平显著降低(P<0.01),T-SOD和GSH-PX活性显著降低(P<0.01),提示DEHP暴露诱导HD11细胞发生氧化应激损伤。此外,与对照组相比,DEHP暴露上调了PTEN/Bax/Caspase-3/Caspase-9/RIPK1/RIPK3/MLKL的mRNA和蛋白表达(P<0.01),而PI3K/AKT/BCL-2的mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01),提示DEHP暴露通过PTEN/PI3K/AKT信号通路诱导HD11细胞凋亡和程序性坏死。综上所述,DEHP可以通过调控ROS/PTEN/PI3K/AKT轴诱导HD11细胞凋亡和程序性坏死,并存在明显的剂量-效应关系。

辅酶Q10改善LPS诱导小鼠急性肺损伤的效应分析

本研究旨在探究辅酶Q10(coenzyme Q10,CoQ10)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)致小鼠急性肺损伤的保护作用及机制。选取8周龄的健康雄性C57BL/6小鼠72只,随机均分为6组:空白对照组(CON组,100μL玉米油)、CoQ10干预组(CHQ组,50 mg·kg^(-1) CoQ10)、模型组(LPS组,100μL玉米油+LPS)、低剂量CoQ10处理组(LDQ组,2 mg·kg^(-1) CoQ10+LPS)、中剂量CoQ10处理组(LMQ组,10 mg·kg^(-1) CoQ10+LPS)和高剂量CoQ10处理组(LHQ组,50 mg·kg^(-1) CoQ10+LPS)。通过灌胃的方式连续给予小鼠不同剂量的CoQ10或玉米油14 d,然后鼻内滴入50μL 1 mg·mL^(-1) LPS溶液建立小鼠急性肺损伤模型。24 h后,处死小鼠,摘取左肺称重并烘干,计算肺组织湿干质量比(W/D);检测肺泡灌洗液(BALF)蛋白浓度、肺组织丙二醛(MDA)含量、活性氧(ROS)浓度、总超氧化物歧化酶(SOD)活性和还原型谷胱甘肽(GSH)水平;苏木素伊红(HE)染色观察肺组织病理变化;TUNEL染色法检测肺组织细胞凋亡率;RT-PCR技术检测线粒体细胞凋亡途径相关基因表达;Western blot法检测肺组织MKP-1/Nrf2通路相关蛋白表达。结果表明,与CON组相比,LPS组小鼠肺组织W/D和BALF蛋白浓度极显著升高(P<0.01);肺组织出血、肺泡壁增厚、炎性细胞浸润;MDA和ROS含量极显著升高(P<0.01),SOD活性和GSH含量极显著降低(P<0.01);TUNEL凋亡率和线粒体凋亡途径相关基因表达均极显著升高(P<0.01);MKP-1和Nrf2蛋白表达极显著降低(P<0.01)。低剂量、中剂量和高剂量CoQ10均显著或极显著地逆转了LPS诱导的上述指标的变化(P<0.05,P<0.01),且高剂量CoQ10效果更显著(P<0.01)。此外,CHQ组与CON组相比,所有指标均无显著性差异(P>0.05)。结果提示,CoQ10可通过激活MKP-1/Nrf2信号通路,增强小鼠抗氧化应激能力,减少ROS产生,抑制线粒体细胞凋亡,从而改善LPS诱导的小鼠急性肺损伤。

miR-502调控犬乳腺肿瘤细胞增殖、迁移和EMT的作用机制

旨在探讨微小RNA-502(microRNA-502/miR-502)靶向RNA结合基序单链相互作用蛋白1(RNA-binding motif,single-stranded-interacting protein 1,RBMS1)对犬乳腺肿瘤细胞增殖、迁移、上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响及其作用机制。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测犬乳腺肿瘤细胞(CHMp和CHMm)和正常乳腺组织中miR-502和RBMS1的转录水平;利用脂质体转染法将miR-502模拟物(mimic)、抑制剂(inhibitor)、阴性对照(negative control,NC)分别转染至犬乳腺肿瘤CHMm和CHMp细胞,用qRT-PCR方法检测细胞中miR-502的表达水平,以MTT法和Transwell试验分别检测细胞的增殖和迁移能力;通过qRT-PCR和Western blot方法检测转染miR-502后对上皮细胞标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、间质细胞标志物波形蛋白(vimentin)、细胞迁移标志物基质金属蛋白酶(MMP2)、增殖标志物增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA和蛋白表达水平;利用qRT-PCR和双荧光素酶报告试验验证miR-502与RBMS1基因的靶向关系。结果显示:与正常乳腺组织组相比,miR-502在犬乳腺肿瘤细胞中表达显著上调,RBMS1在犬乳腺肿瘤细胞中转录下调;转染miR-502 mimic后miR-502的转录水平显著高于miR-NC组,反之转染miR-502 inhibitor后miR-502的转录水平显著下调;与miR-NC组相比,转染miR-502 mimic显著促进犬乳腺肿瘤细胞的增殖和迁移,抑制E-cadherin mRNA和蛋白的表达,促进vimentin、MMP2、PCNA mRNA和蛋白表达水平升高;反之,转染miR-502 inhibitor可显著抑制犬乳腺肿瘤细胞的增殖和迁移,促进E-cadherin mRNA和蛋白表达升高,降低vimentin、MMP2、PCNA mRNA和蛋白表达水平;qRT-PCR和荧光素酶报告试验显示,miR-502通过靶向RBMS13′-UTR抑制RBMS1 mRNA的表达。上述结果提示,miR-502在犬乳腺肿瘤细胞中高表达,干扰miR-502的表达可以影响犬乳腺肿瘤CHMm细胞的增殖、迁移及EMT,且miR-502靶向调控RBMS1 mRNA的表达。

不同家禽产ESBLs沙门菌的流行分布与耐药分析

了解胶东地区不同家禽携带沙门菌的流行分布及其耐药现状,为有效防控家禽沙门菌的流行传播及遏制其耐药提供依据。采用细菌的常规分离培养、质谱法、PCR法和微量肉汤稀释法等,对2021年8—10月在胶东5个地区3种家禽养殖场采集的3150份泄殖腔拭子进行沙门菌分离鉴定、血清型鉴定、药敏试验及β-内酰胺酶主要耐药基因的检测,利用统计学方法进行差异显著性分析。结果发现:(1)共分离获得194株沙门菌(6.16%)。水禽源沙门菌的携带率(14.36%)比肉鸡(5.04%)、蛋鸡(1.15%)高。(2)较多的血清型为S.Enteritidis(38.14%)、S.Kentucky(21.65%)、S.Senftenberg(14.95%)、S.Indiana(12.37%)、S.Typhimurium(8.76%)为主。肉鸡和水禽(均为7种)的沙门菌血清型较蛋鸡(3种)多,但均以S.Enteritidis为主。(3)110株禽源沙门菌对氨苄西林、异磺胺异噁唑、四环素3种药物耐药相对严重(58.18%~77.27%),未检测到美罗培南的耐药菌株。水禽和肉鸡源菌株较蛋鸡耐药严重,尤其对阿莫西林/克拉维酸(P=0.031)和四环素(P=0.007)的耐药差异显著。(4)81株(73.64%)禽源沙门菌为多重耐药,共有43种耐药谱型,肉鸡(25种)和水禽(22种)源菌株的耐药谱型远多于蛋鸡(8种)。(5)110株沙门菌中检测到3种耐药基因:blaCTX-M(70.00%)、blaTEM(51.82%)和blaOXA(26.36%),常见的耐药基因组合类型为blaCTX-M+blaTEM,且耐药基因与耐药表型间存在一定的相关性(P≤0.001)。由此可见,胶东地区的家禽均携带一定比例的沙门菌,但不同品种家禽的流行分布存在差异。不同家禽之间携带血清型的种类也有一定的差异,但携带最多的血清型均为S.Enteritidis。分离菌株耐药情况较为严重,耐药谱复杂多样。禽源沙门菌对β-内酰胺类药物耐药主要是blaCTX-M+blaTEM基因的表达所致。

高致病性禽流感发生风险评估框架的建立

【目的】为实现对高致病性禽流感发生的风险评估,以在该病的控制中为制定科学有效的控制策略提供理论依据。【方法】通过对已发生的高致病性禽流感相关数据的统计分析,结合头脑风暴法,确定了高致病性禽流感发生的风险因素;利用层次分析法确定各风险因素的权重;应用多指标综合评价法计算评估结果。【结果】建立了由评估指标体系、风险因素量化评价标准、指标权重、综合评分方法组成的高致病性禽流感发生风险评估框架。【结论】利用该风险评估框架可进行风险因素的综合分析,实现对中国高致病性禽流感疫情发生风险的定量评估。

雏鸡服用益生素后免疫器官指数及局部体液免疫球蛋白相对含量的动态变化

用商品益生素和自制益生素分别灌服1日龄雏鸡,灌服益生素后1、4、7、10、18d测定胸腺、脾脏、法氏囊的器官指数动态变化,用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定泪液、气管液、胆汁和肠液的IgA、IgM、IgG相对含量的动态变化,结果发现服用商品益生素的雏鸡免疫器官指数在第7天高于未服用益生素的对照雏鸡,上述4种体液的IgA、IgM、IgG相对含量在服用益生素后7～10d高于未服用益生素的对照雏鸡,服用自制益生素的雏鸡上述4种体液的IgA、IgM、IgG相对含量在服用益生素后4～7d高于未服用益生素的对照雏鸡。表明益生素对雏鸡的免疫系统有一定的影响,能够促进免疫器官的生长发育,提高雏鸡呼吸道和消化道局部体液的免疫球蛋白相对含量。

表达猪传染性胃肠炎病毒S基因的重组乳酸乳球菌的构建及免疫原性分析

根据猪传染性胃肠炎病毒纤突(S)蛋白的全基因序列及表达载体质粒的基因融合特点,设计一对引物,进行PCR扩增,获得含有TGEVS基因4个主要抗原位点的约2000bp的目的片段,将其与分泌表达的载体质粒pNZ8112进行连接,通过电击转化进入宿主菌乳酸乳球菌NZ9000细胞内,在乳链菌肽(Nisin)的诱导下进行表达,通过SDS-PAGE和Western blot分析,表明TGEVS蛋白在乳酸乳球菌中获得表达,所表达的TGEVS蛋白具有与TGE病毒一样的抗原特异性。间接免疫荧光试验表明重组菌表达蛋白定位于菌体表面。将表达TGEVS蛋白的重组乳酸乳球菌及空质粒菌株分别口服免疫BALB/c小鼠,收集粪便样品进行抗体检测,结果表明分泌型的重组菌pNZ8112-Sa/NZ9000免疫小鼠能够产生明显的抗TGEVsIgA抗体。

中草药抗仔猪大肠杆菌性腹泻作用机理的研究

从中草药对大肠杆菌的体外抑菌活性、对热敏肠毒素LT所致结扎肠袢液体蓄积的拮抗作用、对抗药物性腹泻作用、减少炎性渗出及抑制肠蠕动加快等方面,初步探讨了大青叶、板蓝根、连翘、败酱草4 味中草药及其复方配伍抗仔猪大肠杆菌性腹泻的作用机理。结果表明板蓝根、连翘、败酱草等及其复方制剂对大肠杆菌O149K88均显示出不同程度的体外抗菌活性;将上述中药提取液加入到细菌培养液中与大肠杆菌一起培养,用所得培养物LT进行兔回肠结扎试验,均可显著或极显著地减少培养物上清液所致肠袢液体蓄积量(P<0 05,P<0 01);将败酱草提取液同LT一起注入结扎肠袢,可显著地减少肠袢液体蓄积量(P<0 05);复方组显著或极显著地降低了蓖麻油引起的腹泻发生率和腹泻频率(P<0 05,P<0 01);板蓝根极显著地抑制了小鼠小肠推进率(P<0 01);败酱草、板蓝根和复方组还可显著或极显著地抑制醋酸所致小鼠腹腔染料渗出(P<0 05,P<0 01)。上述试验结果表明:抑制病原菌的繁殖、拮抗热敏肠毒素的致泻作用、对抗药物性腹泻作用、减少炎性渗出及抑制小肠推进运动是治疗仔猪大肠杆菌性腹泻的重要机理,研究结果为临床应用中草药治疗仔猪大肠杆菌性腹泻提供了重要理论依据。

黄芪多糖和香菇多糖对雏鸡IL-2活性和淋巴细胞增殖反应的影响

以 Ａ Ａ 肉用雏鸡为试验动物，对雏鸡注射黄芪多糖和香菇多糖，检测脾脏 Ｔ 淋巴细胞 Ｉ Ｌ２ 诱生活性和淋巴细胞增殖反应。结果表明：黄芪多糖和香菇多糖注射组雏鸡， Ｉ Ｌ２ 诱生活性和淋巴细胞增殖反应均高于或显著高于（ Ｐ＜ ０ ．０５） 对照组雏鸡。