免疫单扩散法检测牛初乳IgG含量方法改良及牛初乳样品的检测

采用改良后的琼脂免疫单扩散法检测本地荷斯坦奶牛产后7d的初乳样品中IgG含量。结果表明,母牛产犊后7d内,乳汁中IgG含量变化很大,变动范围为118.59～0.86mg/mL。每次挤乳IgG含量下降都很快,特别是前三次挤乳,每次IgG浓度下降率近50%;到第8次,已经降到10mg/mL以下。所以生产乳制品应以前7次挤出的初乳为原料最佳,若笼统地以3d、5d或7d内初乳为原料,产品中IgG含量不仅低,而且每批次差异很大。

弓形虫胚层发育相关蛋白基因的克隆和序列分析

目的对15个弓形虫虫株的弓形虫胚层发育相关蛋白（TgERP）基因进行克隆和序列分析，了解其变异和进化情况，为评价该蛋白在血清学诊断和疫苗防疫应用上的价值提供理论基础。方法设计TgERP基因的PCR引物，对15个弓形虫虫株进行PCR扩增和序列测定，测序结果利用Puzzle 5．2、Paup 4．0和DNAStar5．0软件进行分析。结果TgERP基因包含的完整开放阅读框（ORF）长度均为315bp，A＋T含量在46．67％～46．98％之间，仅有1个碱基发生变异，变异率为0％～0．32％。编码104个氨基酸，变异率在0％～0．96％之间。系统进化分析显示，TgERP基因序列虽然能够将弓形虫Ⅰ型虫株与Ⅱ／Ⅲ型虫株区分开，但却不能区分所有基因型的虫株。结论TgERP基因在各基因型虫株中十分保守，不适合作为遗传标记分子来区分不同基因型的弓形虫虫株。

鹅细小病毒vp1基因的原核表达及抗原性分析

将鹅细小病毒(GPV)H1株vp1基因从pMD18T-vp1亚克隆至原核表达载体pGEX-6P-1的多克隆位点,构建了原核表达载体pGEX-6P-vp1,将其转化感受态细胞BL21(DE3)pLysS中,经IPTG诱导,SDS-PAGE分析,结果获得了108ku的融合蛋白,该融合蛋白经亲和层析纯化并经Western-blot检测。结果表明,纯化的融合蛋白可与GPV阳性血清发生特异性反应,具有良好的抗原性。