利用SSR方法鉴定大豆品种纯度

本研究以遗 75 - 14,中黄 14,中品 6 6 2和中品 6 6 1共 4个品种为试验材料 ,利用不同连锁群上的SSR引物对其随机选择个体进行分析 ,以确定分析品种纯度所需的引物数 ,为大豆品种资源的保存及品种指纹图谱的建立提供理论依据。通过 11对SSR引物对遗 75 - 14,中黄 14,中品 6 6 2各 10个单株的检测 ,发现中品 6 6 2纯度最高 ,遗 75 - 14次之 ,而中黄 14的纯度最低。用SSR引物对中品 6 6 1和中品6 6 2每 10个单株混合样品分析并经单株检测验证 ,其纯度分别为 99 0 %和 98 3%,研究结果表明 ,10个植株混合时 ,即使有一个单株为杂合位点也能被检测出来 ,并发现用 3- 5对位于不同连锁群的SSR引物可以对随机或混合样品进行快速、准确的纯度鉴定。

生活垃圾微生物强化堆肥对放线菌群落的影响

为了探讨微生物强化堆肥对生活垃圾好氧堆肥过程及堆肥过程中放线菌群落的影响,在堆肥过程中接种高效细菌复合菌剂和真菌复合菌剂,并以不接种的堆体为对照,对堆肥过程的温度变化和木质纤维素的降解效率进行了测定,并借助于PCR-DGGE方法对堆肥过程中放线菌群落的动态变化和种群多样性进行研究。结果表明:微生物强化堆肥能缩短堆体起爆时间,并能有效提高堆体降温期和二次发酵期的温度;和自然堆肥相比微生物强化堆肥使半纤维素、纤维素和木质素的降解率分别提高8.95%、12.72%和10.13%。DGGE图谱显示:2种堆肥方式的放线菌多样性指数表现出极显著差异,微生物强化堆肥能增加堆体中优势菌群的种类和数量,能有效提高腐熟期的放线菌群落多样性,有利于堆肥腐熟。优势条带测序结果表明:在接种堆肥过程中检测到了放线菌门的棒杆菌属、分支杆菌属、链霉菌属、热孢菌属、迪茨菌属、糖丝菌属和放线菌属。

分析中国栽培大豆遗传多样性所需SSR引物的数目

我国拥有极其丰富的大豆资源 ,传统的方法是根据农艺性状来分析其遗传变异 ,但农艺性状受自然环境和人为因素影响明显。随着大豆育成品种的增加 ,有限的表型变异已难以详细阐明我国 2万余份大豆品种的遗传变异情况 ,需要从DNA分子水平深入研究我国大豆资源遗传变异分布规律。本研究以 190份为大豆为初选核心种质的一个无偏样本 ,用 6 0对SSR引物扩增 ,获得 6 0 6个等位变异 ,平均每个位点有 10个等位变异 ,位点多态信息量范围从 0 5 5到 0 99,平均为 0 83。对 190份大豆相似系数矩阵的标准误分析表明 ,SSR引物数增加到 5 0左右时 ,再增加引物 ,标准误变化很小。共表型矩阵之间的相关性测验显示 ,当等位变异数达到 5 70以上 ,相互之间相关性极显著。从实验材料中选取东北春大豆类型作为一个小样本进行共表型矩阵相关性分析也有类似结果。用SSR方法分析中国栽培大豆 (G max)遗传变异关系时 ,只有等位变异数达到一定的范围时 ,才能真实地反映出品种之间的遗传变异关系。当群体的遗传变异范围变得相对较小时 ,分析个体之间的遗传变异关系所需的等位变异数目也相应降低。结合SSR位点在大豆基因组中的分布和基因多样性水平 ,能够找到分析栽培大豆遗传多样性的核心SSR引物。只有获得等位变异数在 5 70以上 ,

苏云金芽孢杆菌营养期杀虫蛋白基因vip3A的研究

根据已知vip3A基因序列设计一对特异性引物VIP3／VIP5，对218株Bt菌株进行PCR鉴定，有51株含有vip3A类基因，其中12株为不同亚种的标准菌株，有4株标准菌株不含有该基因。从Bt C9菌株中分离克隆了vip—C9基因，并插入表达载体pET—21b，转化大肠杆菌BL21，诱导表达出分子量88．6kDa的可溶性蛋白，表达产物对甜菜夜蛾和棉铃虫具有较高的杀虫活性，LC50分别为0．42ng／mg和25．95ng／mg，对小菜蛾活性较低。构建了缺失蛋白Vip—C9—N(N端去除39个氨基酸组成的信号肽序列)，杀虫活性测定结果表明其对甜菜夜蛾的活性显著降低，说明N端39个氨基酸对甜菜夜蛾的活性是必需的。

牛黑素皮质素受体1(MC1R)基因与毛色表型的研究

牛MC1R基因不仅与毛色有关,而且与牛乳中乳蛋白的含量有关。利用PCR-RFLP和DNA测序技术分析了中国荷斯坦黑白花牛,中国荷斯坦红白花牛,鲁西黄牛和渤海黑牛共4个品种的MC1R基因。共检测出3种等位基因(ED,E+,e)。中国荷斯坦黑白花牛主要是ED和E+等位基因(ED=0.12、E+=0.80);渤海黑牛也主要是ED和E+等位基因(ED=0.52、E+=0.47);中国荷斯坦红白花牛和鲁西黄牛大多为e等位基因(e=0.95)。中国荷斯坦红白花牛和鲁西黄牛还存在E+/e基因型。由此推测ED和E+等位基因导致黑色素合成。另外发现牛MC1R基因编码区725处存在一重要的SNP(单核苷酸多态性)。

复合菌剂解无机磷条件优化研究

研究采用单纯形重心设计方法对3株耐高温解无机磷菌株(P1、P2、P3)进行了复合功能菌剂的组合,并通过响应曲面法(RSM)建立了耐高温功能复合菌剂解磷条件的二次多项数学模型,对复合菌剂的解磷条件进行优化。对7组实验水平的分析结果表明:组合4(P1:P2:P3=0:50%:50%)各个菌株间能够相互促进,协同共生效果最佳,解磷量为241.70mg·L-1,显著高于各单株菌与其他组合。中心组合实验Box-Behnken对影响复合功能菌剂解磷量的5个关键因素[培养时间(x1)、培养温度(x2)、pH(x3)、磷矿粉添加量(x4)、接种量(x5)]的最佳水平范围及其交互作用进行设计。试验数据多元拟合结果表明:(1)培养时间一次项、pH一次项、培养时间和pH交互项、培养时间和磷矿粉添加量交互项、温度和磷矿粉添加量交互项、以及所有二次项均达到极显著水平(P<0.01)。(2)培养时间、pH对复合功能菌剂解磷量影响较强,其他因素的影响效果由大到小依次为接种量、磷矿粉添加量、温度。(3)优化得到耐高温复合功能解磷菌剂最佳解磷条件为培养时间7.18d,培养温度49.98℃,pH6.63,磷矿粉添加量6.21g·L-1,接种量6.07%。验证试验表明,响应曲面法可以科学有效构建复合菌剂解磷条件的数学模型,合理优化解磷条件的影响因素。

两种类型生物制氢反应器的运行及产氢特性

为探求反应器型式对发酵法生物制氢过程的影响，分别采用连续流搅拌槽式反应器（CSTR）和颗粒污泥膨胀床反应器（EGSB）接种厌氧活性污泥，从糖蜜废水中制取氢气.运行中控制温度为35℃，通过缩短水力停留时间（HRT）和增加进水COD质量浓度的方式逐渐提高容积负荷（OLR），分别对CSTR系统和EGSB系统的产氢速率、pH、液相末端产物及生物量进行研究.结果表明，两个系统中，产氢速率均随OLR提高而逐渐升高.CSTR的最佳产氢OLR为25-35 kg/（m^3·d），而EGSB的最佳产氢OLR为70-80 kg/（m^3·d）；此时，CSTR系统的最大产氢速率为6.21 L/（L·h），EGSB系统的最大产氢速率可达18.0 L/（L·h）.稳定运行期，EGSB系统的生物量为27.6 gVSS/L，而CSTR的生物量仅为7.8 gVSS/L，说明较高的生物量是生物制氢反应器稳定运行和高效产氢的关键.两个系统均可形成乙醇型发酵，说明发酵类型的形成不受反应器型式影响.与CSTR反应器相比，EGSB反应器具有更好的耐酸能力.

三阶段温度控制堆肥接种法对有机氮变化规律的影响

利用原生生活垃圾,通过三阶段温度控制技术进行堆肥试验,探讨在堆肥过程中有机态氮组分的动态变化规律.结果表明,全氮、酸水解有机态氮、氨基酸态氮均在堆肥的前期呈明显的下降趋势,呈较好的相关性.与CK(对照组)处理相比,在堆肥的后期,三阶段温度控制堆肥酸水解有机态氮、氨基酸态氮、氨基糖态氮及酸解未知态氮含量呈不同程度的上升趋势,增加幅度依次为:10.67%1、6.17%、7.17%、22.44%.表明三阶段温度控制技术能减少堆肥中氮素的损失,堆肥产品施入土壤后,可提高土壤的供氮潜力.

Bt抗性和敏感棉铃虫幼虫中肠主要蛋白酶活性的变化

采用酶特异性底物测定了3龄和5龄Bt抗性/敏感棉铃虫品系幼虫中肠蛋白酶活性的最适pH值.结果表明,3龄和5龄Bt抗性/敏感棉铃虫幼虫中肠总蛋白酶活性最适pH值均为10.5;强碱性类胰蛋白酶活性最适pH值除3龄Bt抗性幼虫为8.0外,其余均为10.5;弱碱性类胰蛋白酶活性的最适pH值为8.0;类胰凝乳蛋白酶的最适pH值除5龄Bt抗性幼虫的为8.0外,其余都为8.5.比较了最适pH值条件下,3龄和5龄Bt抗性/敏感棉铃虫幼虫中肠蛋白酶活性的差异.发现3龄和5龄Bt抗性/敏感棉铃虫幼虫中肠总蛋白酶活力差异不显著;两个品系3龄幼虫中肠强碱性类胰蛋白酶活性差异达到极显著水平,5龄幼虫中肠强碱性类胰蛋白酶活性差异不明显;两个品系3龄幼虫中肠弱碱性类胰蛋白酶活力差异没有达到显著水平,而5龄幼虫弱碱性类胰蛋白酶活力差异极显著;另外,3龄和5龄Bt抗性/敏感棉铃虫幼虫类胰凝乳蛋白酶活力差异极显著.棉铃虫幼虫中肠酸碱强度和某些蛋白酶活性的变化,可能是造成棉铃虫抗性演化的因素之一.

三阶段温度控制接种法对堆肥有机物质变化影响

为提高堆肥效率,利用生活垃圾,采用三阶段温度控制技术进行微生物接种堆肥试验,并对堆肥过程中有机物的动态变化进行分析.结果表明,在堆肥336 h,与普通接种法(CK)比较,三阶段温度控制接种法(TSCT)堆肥总有机碳(TOC)、水溶性有机碳(DOC)含量依次降低6.37%、6.57%;而腐殖质(HS)、胡敏酸(HA)、腐殖化指数(HI)分别增加了8.61%、16.75%、18.40%.通过对胡敏酸分子元素组成分析证实,堆肥后,普通接种法处理胡敏酸分子中C/H、O/C依次增加8.33%、6.25%;而三阶段温度控制法堆肥中胡敏酸C/H、O/C依次增加了18.33%、11.48%.以上结果表明,三阶段温度控制法可明显加快堆肥腐殖化进程,进而提高堆肥效率.

水稻侧根突变体RM109的农艺性状

用 Na N3 处理水稻品种大力 ,在 M2 世代中选育出了 2 ,4 - D耐性 ,且侧根缺失的突变体RM10 9。RM10 9及大力的土耕和水耕试验 ,评价侧根缺失对产量及其农艺性状的影响。试验结果表明 ,在生育后期 ,RM10 9的根长、根数和根干物重是大力的 6 9% ,16 %和 7% ,株粒重及株高约是大力的 10 %及 5 0 %

新型生物制氢反应器的运行及产氢特性

以厌氧活性污泥为产氢菌种,糖蜜废水为底物,研究了新型外循环颗粒污泥膨胀床(ECGSB)生物制氢反应器的运行及产氢特性。结果表明,ECGSB反应器可在较高的容积负荷(VLR)下实现高效稳定的产氢,稳定运行时,反应器内可观察到自絮凝产氢颗粒污泥的形成,污泥平均浓度高达24.1gVSS/d,系统最大产氢能力为7.43m^3/m^3·d,发酵气中氢气体积含量为50%～56%。系统形成自絮凝产氢颗粒污泥是ECGSB反应器高效运行和产氢的关键,自絮凝产氢颗粒污泥既增加了活性产氢细菌的生物持有量,又提高了系统抗冲击负荷的能力。连续流运行各项参数表明,ECGSB反应器具有良好的运行稳定性和产氢优势;提出乙醇型发酵快速启动的调控对策,在发酵法生物制氢领域具有广泛的应用前景。

我国实验动物垫料的质量评价研究概述

垫料是实验动物饲养繁殖的重要条件之一,是保证实验动物质量和动物实验结果的重要环节。文章对我国常用实验动物垫料的种类和性能、垫料的质量控制与评价等研究进行了综述,为实验动物垫料的研究和开发提供理论和实践基础。

耐大豆疫霉根腐病QTL定位的研究

利用1200个RAPD随机引物和341对SSR引物对Conrad×OX760的重组自交系(RIL)F2:6群体的耐大豆疫霉根腐病基因进行QTL定位。试验设两个地点、两个年限,在MLG D1b+W和MLG M连锁群上检测到3个QTL,即QP-1(OPL18-800bp)、QP-2(OPN03-600bp)和QP-3(Satt536和Satt463)。每个QTL对病害损失率的贡献率从13.34%到22.31%不等。QP-1和QP-2经多重QTL分析(Mapmaker/QTL1.1)对两年(2000年和2001年)两点(Wood-slee和Werver)平均病害损失率的贡献率合计达44.5%,QP-3对2001年Woodslee试验点的病害损失率的贡献率为15.2%,QP-1对2000年Woodslee试验点的病害损失率的贡献率为21.55%,对2000年Wever试验点的病害损失率的贡献率16.71%,及对两年两点平均病害损失率的贡献率为22.31%。在大多数生态环境下能稳定的、再次被检测出的QTL,可以作为育种工作中的重点选择指标,用以指导耐大豆疫霉根腐病品种的分子辅助选育。

犬瘟热病毒XJ株的分离鉴定

应用犬肺原代巨噬细胞,从新疆阿克苏送检的一只病死犬肺脏中分离出1株犬瘟热病毒,并对其进行了形态学、理化学、血清学、动物感染试验、分子生物学鉴定。结果证明所分离的XJ株为1株CDV的强毒株。

犬瘟热的诊断及其预防免疫的研究进展

本文对犬瘟热 ( CD)的诊断、预防免疫和免疫失败的影响因素及犬瘟热病毒( CDV)的宿主范围进行了综述。 CDV不仅感染陆生食肉动物 ,而且也感染水生食肉动物 ,并且其宿主范围还在不断扩大。CDV感染主要采用病毒分离、特异性病毒抗原或特异性核酸检测等方法确诊。疫苗包括灭活的 CDV疫苗、麻疹病毒 ( MV)异源苗及 CDV弱毒活苗。疫苗接种犬的免疫反应主要取决于毒株特性及犬的应答能力 ,只有弱毒活苗能诱导产生持久而坚强的保护力。尽管多年来 CDV弱毒活苗的使用控制了 CD的发生 ,但最近免疫过的犬发生 CD的病例并不少见。分析免疫失败的原因 ,主要是母源抗体干扰、疫苗质量差、其它病毒的免疫抑制以及

鲤鱼(Crprinus carpio)体细胞系的建立及其生物学特性分析(简报)

动物细胞的培养技术是1907年哈里逊[1]在淋巴块中对蛙的神经板培养成功开始的,其后近一个世纪以来,陆续成功地培养了哺乳动物、昆虫等各种动物细胞,并广泛用于生物科学的各个分支.鱼类的细胞培养的系统研究和建系实践大约起始于60年代,被公认的真骨鱼类的第一个永久性的细胞系--虹鳟性腺细胞系(RTG-2)是由Wolf[2]建立的.

妊娠中的子宫收缩调控

无论是自然妊娠还是辅助妊娠,在早期妊娠阶段,适当的子宫收缩有利于受精、胚胎着床和妊娠的维持。早期妊娠阶段的子宫收缩主要由类固醇激素(雌激素和孕酮)控制,此外还有大量因子(前列腺素、松弛素、降钙素基因相关肽)调节子宫收缩。此期子宫异常收缩则可能引起异位妊娠、流产、伴随痛经的逆行出血及子宫内膜异位症等。本文主要介绍子宫肌层在早期妊娠中的收缩、调节及其与临床疾病的关系。

发酵条件对发酵产氢细菌B49产氢的影响

采用间歇发酵实验,研究了葡萄糖浓度、接种量、温度、氮源、不同有机底物对发酵产氢产酸细菌新菌种B49(AF48ll48 in EMBL)生物产氢的影响。结果表明,接种量影响B49的产氢;B49生长和产氢适宜温度均为35℃;B49不能利用无机氮源,而有机氮是B49生长、产氢的适宜氮源;葡萄糖是B49发酵产氢的最适宜底物,当浓度为10g/L时,B49的葡萄糖利用率为100%,氢气得率为1.69mol H_2/mol glucose;此外,B49可利用小麦、大豆、玉米、土豆及糖蜜废水和啤酒废水产氢,其中利用糖蜜废水、啤酒废水产氢分别为137.9ml H_2/ g COD和49.9ml H_2/g COD。

大熊猫犬瘟热病毒附着或血凝蛋白基因的序列分析

首次对犬瘟热病毒 (CDV)大熊猫 (GP)毒株附着或血凝蛋白 (H)基因进行了序列测定并与疫苗株Onderstepoort进行了比较。我们设计合成了 4对引物 ,对GP株进行了RT PCR扩增与测序。H蛋白基因全长为 194 6bp ,开放阅读框架 (ORF)始于 2 1 2 3位的ATG ,终止于 184 2 - 184 4位的TGA ,编码 6 0 7个氨基酸 ,该基因序列已被GenBank收录。将GP毒株与GenBank中疫苗弱毒株Onderstepoort进行比较 ,二者核苷酸序列的同源性为 91.4 % ,推导的氨基酸序列的同源性为 90 .2 % ,GP和Onderstepoort株H蛋白的半胱氨酸残基数目均为 12个且相对位置不变 ;疏水性有一定的变化 ,但推测的穿膜区位置 (约 35 55位氨基酸 )是一致的 ;Onderstepoort株的H蛋白潜在的N 联糖基化位点为 4个 ,GP株H蛋白为 9个 ,糖基化位点的不同可能对GP株H蛋白的抗原性产生影响。