新技术在原料乳与乳制品中致病菌检测方面的应用

介绍了ATP生物发光技术、环介导等温扩增(LAMP)技术、基因芯片技术、生物传感器技术和微流体芯片技术等一系列迄今为止最为新兴的技术,在原料乳与乳制品检测方面的应用情况。

rep-PCR指纹图谱技术在乳酸菌鉴定中的应用

采用了rep-PCR指纹图谱技术,对分离自内蒙古通辽地区的传统发酵乳中的乳酸菌进行了鉴定和多样性分析。应用rep-PCR指纹图谱技术能够对实验菌株达到非常好的分辨能力。结果表明,该地区的乳酸菌呈现出非常高的多样性,其中Lactobacillus plantarum和Lactobacillus helveticus等6种菌种是这些传统发酵乳中常见的种,而植物乳杆菌Lactobacillus plantarum为优势种;而且还发现同一乳酸菌种群指纹图谱存在一些特征性的条带,这将为我们快速鉴定乳酸菌提供了理论依据。

乳中褪黑激素及褪黑激素乳品研究进展

介绍了褪黑激素的合成与分泌过程,乳中褪黑激素水平不同时间的变化以及引起这些变化的影响因素。并对国内外富含褪黑激素乳制品的研究进行了简要介绍。

甜嫩玉米化学脱皮技术的研究

通过化学的方法研究了甜嫩玉米的脱皮技术,此方法不仅保留了玉米颗粒的完整性,又降低了甜玉米在物理脱皮时的损失率。通过试验表明:甜玉米在70℃,1.5%的氢氧化钠中浸泡搅拌4 min,水洗,然后用0.5%的柠檬酸中和,中和温度40℃,时间45 min,脱皮完全,风味较佳。

黄桃果粒益智涂抹型再制干酪新品的开发

以自制天然干酪、脱脂粉、无水奶油、黄桃果粒、DHA粉末为主要原料,通过单因素、L9(33)正交实验,以感官评价作为分析指标,确定了最佳工艺流程及配方。结果表明,脱脂乳粉6%,黄油7%,黄桃果粒10%,白砂糖4%,乳化盐1.5%,复合稳定剂0.5%,DHA添加量0.3%,加热85℃,搅拌8 min,最后添加黄桃果粒及预溶好的DHA粉末,搅拌2 min产品不仅具有浓郁的黄桃风味,细腻爽滑的口感,良好的涂抹性,而且营养丰富有助于儿童智力发育。

不同乳酸菌抗氧化能力的比较与分析

比较了嗜酸乳杆菌NCFM、植物乳杆菌ATCC 14917和植物乳杆菌NDC 75017这三株乳酸菌的抗氧化能力,初步探究乳酸菌发挥抗氧化作用的机制。通过羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基清除实验,比较了三株乳酸菌菌体及发酵液自由基清除能力;将三株乳酸菌菌体及灭活菌体与受到H2O2诱导的氧化损伤Caco-2细胞共培养后,比较Caco-2细胞胞内两种抗氧化酶——超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)的变化情况。结果表明,三株乳酸菌均具有一定的自由基清除能力,其中植物乳杆菌NDC 75017菌体具有最强的羟自由基清除能力;植物乳杆菌NDC 75017的发酵液具有最强的DPPH自由基清除能力,植物乳杆菌ATCC 14917发酵液具有最强的超氧阴离子自由基清除能力。另一方面,与正常细胞相比,受到氧化损伤的Caco-2细胞胞内SOD活性显著降低(P<0.05)、GPx活性显著升高(P<0.05),三株乳酸菌的活菌均能不同程度缓解胞内SOD活性降低和GPx活性升高的情况,但灭活菌体的效果并不明显。

超高压液相色谱-串联质谱法同时测定婴幼儿配方乳粉中11种B族维生素

目的：建立一种能够同时测定婴幼儿配方乳粉中11种B族维生素的超高压液相色谱-串联质谱法。方法：样品用0.1%甲酸溶液溶解,乙酸锌沉淀蛋白,滤液经ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱分离,流动相为0.1%甲酸溶液和乙腈,梯度洗脱,采用电喷雾离子源正离子模式,多反应监测进行检测,分析时间12 min。结果：11种B族维生素在各自质量浓度范围内线性良好,R^2均大于0.99,加标回收率在85%-110%之间,相对标准偏差在1.03%-6.75%之间,VB1、VB2、烟酸、烟酰胺、泛酸（VB5）、吡哆醛、吡哆醇、吡哆胺、叶酸、游离生物素和VB12的定量下限分别为40.0、40.0、30.0、30.0、50.0、0.9、1.2、1.2、2.0、2.0、0.2μg/100 g,与国家标准比较,部分维生素定量限提高了7.7%-60%。结论：该法具有灵敏度高、前处理操作简单快速、分析时间短的特点,而且具有良好的精密度和准确性,可以应用于婴幼儿配方乳粉中11种B族维生素的同时测定。

超高效液相色谱-串联质谱法测定乳及乳制品中青霉素类药物残留量

建立了超高压液相色谱－串联质谱法（UPLC-MS／MS）测定乳及乳制品中青霉素类药物残留量的方法。利用UPLC—MS／MS外标法进行样品中青霉素类药物的测定。乳制品经乙腈、乙酸锌、盐酸溶液提取，样品再HLB固相萃取柱富集净化后，进行UPLC—MS／Ms检测。结果表明，10种青霉素在1～50ng／mL范围呈良好线性，线性相关系数大于0．9991。牛奶的平均回收率为88：8％-92．0％，测定结果的相对标准偏差为1％-7％；奶粉的平均回收率在88．7％-91．3％之间，相对标准偏差为5％～11％。研究表明，该方法操作简便、快速、灵敏度高。适用于牛奶和奶粉中10种青霉素类抗生素残留的同时测定。

棕榈酸在甘油三酯中的位置分布对婴儿营养吸收的影响

脂肪和脂肪酸的代谢及生理功能都与甘油三酯的结构有关,甘油三酯在消化过程中通常是1,3位的脂肪酸首先被胃酶和胰酯酶水解下来形成2-单甘油酯和游离脂肪酸,2-单甘油酯可以直接吸收、酯化成为甘油三酯。母乳中的棕榈酸大多结合在甘油三酯的2位上,而婴儿配方乳粉中的棕榈酸多结合在1,3位置上。植物油和婴儿配方奶粉中结合在1,3位置上的棕榈酸不易吸收,易形成不溶性的皂化钙随粪便排出体外,导致能量和钙的流失。

气相色谱法测定乳及乳制品中碘的影响因素

设计了双因素无重复实验和衍生因素的正交试验,得出在气相色谱法测定碘时,沉淀过程对结果影响不大,衍生过程中,对结果影响的次序依次是丁酮加入量、硫酸加入量和衍生时间,双氧水加入量对结果影响无统计学意义。提出碘测定时气相色谱条件优化的原则。

酶联免疫法与乳及乳制品中抗生素残留的检测

对酶联免疫检测技术(ELISA)做了介绍,并对该技术在乳及乳制品抗生素残留检测的应用进行了评述。阐述了该项技术在乳及乳制品抗生素残留检测中的应用前景。

王不留行促进奶牛乳腺泌乳的信号转导途径

应用Western blot检测王不留行水浸提液作用后,乳腺上皮细胞泌乳信号转导基因P-AKT1、cyclinD1、PRLR、P-STAT5a和AMPK、GULT1的变化,结果表明:中药王不留行对P-AKT1、cyclinD1、PRLR、P-STAT5a和AMPK、GULT1基因表达具有一定作用,可能通过mTOR信号转导途径促进乳腺上皮细胞的增殖;通过激活PRLR从而激活Stat5a泌乳信号转导途径激活其下游β-酪蛋白基因的表达;且可能通过激活AMPK而促进GLUT1表达的增强,从而增加细胞对葡萄糖的摄取能力促进乳糖的合成。

UPLC-MS/MS法与分光光度法测定乳及乳制品中左旋肉碱的比较

文中建立了超高效液相色谱-质谱联用仪（UPLC-MS/MS）和分光光度计测定乳及乳制品中L-肉碱的方法。超高压液相色谱-质谱联用法采用C8（3.5μm,50 mm×2.1 mm）色谱柱,0.1%七氟丁酸/水溶液和甲醇作为流动相分离样品,L-肉碱-（甲基-d3）内标物质用以消除信号抑制和基质干扰,质谱采用ESI＋电离模式、多离子反应监测（MRM）方式进行检测。分光光度法采用高氯酸沉淀蛋白质,碱皂化使溶液中结合态的左旋肉碱游离出来,通过酶促反应,使用分光光度计间接测定左旋肉碱。结果表明：分光光度法的检出限为2.0 mg/100 g,回收率在96.2%-104.7%,相对标准偏差RSD在1.34%-3.69%。UPLC-MS/MS法的检出限为2 ng/100 g,回收率在97.8%-109%,相对标准偏差RSD为1.77%-5.65%。以上2种方法均适用于乳及乳制品中L-肉碱的检测,且测定结果无显著性差异。UPLC-MS/MS法具有操作简便、快速、高效、可控性强等特点,更适用于大量样品的集中快速检测。

甜玉米米粉滚筒干燥加工工艺优化

为了解决酶解后的甜玉米滚筒干燥制成的米粉吸水膨胀及感官状态差的问题,该文对甜玉米酶解液经过滚筒干燥制成的甜玉米米粉的加工工艺进行了研究。依据产品吸水性指数和感官评分,确定了糯玉米淀粉作为交联剂,添加量为25%。根据糊化度,滚筒干燥效果,确定了糊化温度85℃、糊化时间30min。并且在单因素试验的基础上进行了三因素三水平的响应面试验设计,以甜玉米酶解液质量分数、蒸汽压力、滚筒转速为考察因素,以吸水指数和感官评分为考察指标,对试验数据拟合得到的回归方程进行统计检验和分析。较佳滚筒干燥条件为:甜玉米酶解液质量分数17%、蒸汽压力0.5MPa、滚筒转速2.5r/min。在此试验条件下,产品的感官评分为8.75分,吸水指数为5.3,并在此条件下进行多次验证试验,试验值在95%的置信区间内很好地符合预测值,为工业化生产婴儿甜玉米米粉提供指导。

超滤分级研究乳清蛋白肽美拉德反应产物的抗氧化活性的影响

以乳清蛋白肽（WPP）为研究对象,利用葡萄糖对其进行美拉德修饰,制备得到关拉德反应产物（Maillard reaction products,MRPs）,然后利用超滤技术将MRPs分成相对分子量不同的3个组分（组分Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ）,测定各组分的抗氧化活性.研究结果表明,组分Ⅱ（0.8～5 ku）具有最高的还原能力、自由基清除能力和金属离子螯合能力以及最强的抑制脂质氧化能力（p＜0.05）,且随着各组分浓度的增高,其抗氧化活性显著增强（p＜0.05）.总之,分子量会对MRPs的抗氧化活性产生影响.

马传染性贫血弱毒疫苗株致弱过程中表面蛋白gp90的进化分析

为进一步研究马传染性贫血病毒(EIAV)弱毒疫苗的减毒机制,本实验对EIAV弱毒疫苗的原始种毒EIAVLN40、亲本病毒株EIAVDV、驴白细胞弱毒疫苗EIAVDLV121和EIAVDV减毒过程中的3个中间代次病毒(EIAVDLV32、EIAVDLV62和EIAVDLV92)的gp90基因进行测序分析。结果显示,适应白细胞培养的病毒株的进化距离更接近,与亲本病毒株处于进化树的不同分支。与强毒株相比,适应白细胞培养的病毒株在9个位点发生优势氨基酸的转换和V3区糖基化位点191NSSN194的缺失。此外,伴随EIAV毒力减弱的过程,有8个位点出现优势氨基酸残基的转换,在各代次病毒株中V4区具有糖基化位点237NNTW240和246NETW249的克隆所占的比例逐渐降低,其中EIAVDLV121的糖基化位点237NNTW240完全缺失。

UPLC-MS/MS法测定乳及乳制品中氯霉素残留前处理方法的比较

通过比较3种不同的前处理方法，建立了超高压液相色谱一串联质谱法（UPLC-MS／MS）测定乳及乳制品中氯霉素的质量分数，以氯霉素一D5为同住素内标定量。测定氯霉素质量分数的方法。结果表明，对于液态乳制品，采用水：甲醇的溶液提取氯霉素．乙酸锌沉淀蛋白，HLB固相萃取柱富集净化。该方法前处理简单快速，对环境污染小，且检出限（以信噪比S／N=3计）为0．02μg／kg，添加回收率为86．7％90．7％，相对标准偏差（RSD）2．27％，适用于大量样品的集中测定。对于固态乳制品采用乙酸乙酯提取氯霉素．Silica固相萃取柱富集净化。该方法的检出限为0．1μg／kg，添加回收率为85．2％-90．2％，相对标准偏差（RsD）2．87％，稳定性高，适用于配方、工艺十分复杂的固态乳制品．

HPLC-PAD外标法及UPLC-MS/MS内标法测定乳及乳制品中三聚氰胺的含量

分别建立高效液相色谱-二极管阵列法(HPLC-PAD)、超高压液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定乳及乳制品中三聚氰胺含量的方法。利用HPLC-PAD外标法进行样品中三聚氰胺的初筛,利用UPLC-MS/MS法进行确证,以13C315N3-三聚氰胺为同位素内标定量。乳制品经乙腈、乙酸锌、盐酸溶液提取,质谱检测时,样品再经MCX固相萃取柱富集净化。HPLC-PAD法的定量限为4mg/kg,UPLC-MS/MS的定量限为0.05mg/kg;HPLC-PAD的添加回收率为95.7%～102.3%,UPLC-MS/MS的添加回收率为91.3%～95.7%(基质匹配曲线校正),两种方法的相对标准偏差(RSD)分别为1.98%～4.51%,1.60%～3.27%。

IFP微孔板试剂盒检测配方乳粉中维生素B12方法探讨

研究如何提高微生物方法测定维生素B12的准确性和稳定性。对微生物法测定维生素B12过程的关键控制点、主要影响因素进行探讨分析。本文采用IFP微孔板试剂盒检测配方乳粉中维生素B12与传统方法比较操作方法简便、重复性高、结果准确。

产γ-氨基丁酸乳酸菌及其应用

γ-氨基丁酸(GABA)是一种在自然界广泛存在的非蛋白质氨基酸,具有降血压、镇静安神、免疫调节等多种生理功能。许多乳酸菌能够利用其谷氨酸脱羧酶催化谷氨酸及其盐类产生GABA。产GABA的乳酸菌菌株种类较多且产量各异,主要来源于泡菜、发酵乳、干酪等酸性食品。谷氨酸脱羧酶直接决定乳酸菌合成GABA的能力,该酶的活性受到底物、辅酶、发酵pH值和发酵时间等多种因素的影响。以高产GABA的乳酸菌作为发酵剂研制富含GABA的发酵乳制品是对乳酸菌益生功能的进一步利用,具有较为广阔的市场价值。因此筛选高产GABA的乳酸菌不仅有利于相关产品的开发,也是研究产GABA乳酸菌相关性质的重要基础。