胃铋镁中药组分对胃癌细胞周期的调节和裸鼠体内肿瘤抑制的实验研究

目的研究胃铋镁中药组分(弗朗鼠李皮、茴香、石菖蒲、甘草和芦荟)对胃癌细胞周期的调节作用和对胃癌移植瘤的生长抑制作用。方法将胃铋镁和胃铋镁中药总组分及其组分中弗朗鼠李皮、茴香、石菖蒲、甘草、芦荟分别作用于胃癌细胞SGC-7901,MTT法检测各处理组细胞的增殖状态;流式细胞仪检测细胞周期;Western blot检测细胞周期相关蛋白的表达。构建裸鼠SGC-7901胃癌移植瘤模型,研究胃铋镁及其中药总组分及其组分对胃癌移植瘤的生长抑制作用;免疫组化检测STAT3信号通路相关蛋白STAT3、p-STAT3、Bcl-2、Cyclin D1和Survivin的表达情况。结果胃铋镁中药总组分及其组分中的弗朗鼠李皮、茴香和石菖蒲对SGC-7901细胞的抑制率显著高于对照组(P<0.05);流式检测和Western blot结果显示,胃铋镁、胃铋镁中药总组分及其组分中弗朗鼠李皮、茴香和石菖蒲均可以使胃癌细胞阻滞于G1期(P<0.05),并能够有效下调细胞周期蛋白Cyclin A、B、D、E的表达;但甘草和芦荟对胃癌细胞的增殖抑制和细胞周期阻滞作用不显著。荷瘤裸鼠实验结果显示,胃铋镁中药总组分组、弗朗鼠李皮组、茴香组和石菖蒲组对胃癌细胞的生长抑制作用显著强于对照组和三联药(三种市售胃炎胃溃疡类药物联合用药)组(P<0.05),并可以抑制STAT3的磷酸化,下调STAT3信号通路靶基因Bcl-2、Cyclin D1和Survivin的表达。结论胃铋镁及其中药组分中的弗朗鼠李皮、茴香和石菖蒲可以显著抑制胃癌细胞SGC-7901增殖,阻滞细胞周期于G1期,并可以在体内抑制荷瘤裸鼠肿瘤的生长。

香雪兰花色花香物质合成和调控研究进展

花香和花色是花卉作物重要的观赏性状,是决定花卉品质、影响花卉经济价值的关键因素,因此,培育花色丰富、花香怡人的花卉新品种长期以来都是园艺工作者的主要育种目标。香雪兰作为球根切花品种的代表,其花朵颜色鲜艳、香气怡人,是研究植物花色花香的良好材料。本文综述了香雪兰花色花香合成代谢通路以及转录调控的研究进展,重点介绍了控制香雪兰花色苷合成的关键结构基因FhCHS1、FhDFR、Fh3GT、Fh5GT和萜类物质合成的关键结构基因FhTPS1~FhTPS14,此外还介绍了野生种TPS基因的天然等位基因变体序列之间的微小氨基酸差异驱动的酶的催化活性和产物特异性,为阐明花香种间遗传差异奠定了基础。花色苷的合成除了受到结构基因的调控,也受到MYB-bHLH-WD40的调控,花香的合成则受到FhMYB21L2和FhMYC2的调控,此外FhMYB21L2协同调控了黄酮醇合酶基因FhFLS2的表达,最后展望了花色苷和萜类物质合成的潜在应用前景。

乌兰坝紫萼藓(紫萼藓科)成熟孢子体的发现

最近在中国内蒙古发现了乌兰坝紫萼藓(Grimmia ulaandamana J.Muñoz,C.Feng,X.L.Bai&J.Kou)的可育植株,介绍了乌兰坝紫萼藓成熟孢子体、雌株和雄株的特征。孢子体的孢蒴长于蒴柄,蒴柄弯曲,蒴壶表面具纵褶,蒴壁中部表皮细胞厚壁,环带细胞方形或短长方形,蒴盖有喙;蒴齿具疣并在上部分叉,蒴齿在基部分开,蒴齿基部低于蒴壶口,蒴壁表皮细胞和蒴齿之间存在一层小型细胞,蒴齿骨小梁在基部1/3处强烈凸出;蒴帽基部完整。最内侧雌苞叶较茎叶大。乌兰坝紫萼藓具有重要的形态特征变异,可育植株与相似种直叶紫萼藓(G.elatior)易于区分。对乌兰坝紫萼藓进行了全面的描述并配显微图,探讨了孢子体对确定其系统发育位置的重要性。

胃铋镁对胃癌细胞凋亡的诱导作用及机制研究

目的研究胃铋镁对胃癌细胞株SGC-7901增殖和凋亡的作用及可能机制。方法以三联药(三种市售胃炎胃溃疡类药物联合用药)、胃铋镁、胃铋镁中药总组分、胃铋镁化药总组分为实验组,分别作用于胃癌细胞SGC-7901,MTT法检测细胞的增殖状态;Hoechst33342染色法检测细胞的凋亡;流式细胞仪检测细胞周期;Western blot法检测STAT3信号通路相关蛋白的表达。结果 4种药物分别处理细胞后,相比于对照组和三联药组,胃铋镁组和胃铋镁中药总组分组能够显著抑制细胞增殖且具有剂量依赖性;凋亡百分数显著增高(P<0.05);能将细胞周期阻滞于G1期(P<0.05);Western blot结果显示SGC-7901细胞中STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)、CyclinD1、Bcl-2蛋白表达量显著降低。结论胃铋镁及其中药总组分可以显著抑制胃癌细胞SGC-7901增殖,促进细胞凋亡,阻滞细胞周期,其作用机制可能与抑制STAT3信号通路相关蛋白p-STAT3、CyclinD1、Bcl-2表达有关。

DNA氧化损伤8-羟鸟嘌呤与肿瘤的发生发展

有氧代谢有机体细胞无法避免活性氧(reactive oxygen species,ROS)的伤害。ROS会造成多种形式的DNA损伤,其中鸟嘌呤G的氧化产物8-羟鸟嘌呤(8-oxoG)是频度最高的一种DNA氧化损伤,由特异性的糖苷酶OGG1识别并开启碱基切除修复通路完成修复。8-oxoG如果没有及时修复,可能会在复制的过程中引入G:C配对到T:A配对的碱基颠换突变。因此8-oxoG的积累或OGG1修复功能异常被认为会影响基因功能,进而导致肿瘤或衰老相关疾病的发生,然而直接实验证据却极为有限。近年来一系列研究表明,8-oxoG倾向于产生在基因的调控区,在这种情形下,8-oxoG可视为一种表观遗传学修饰,而OGG1则是这一信息的特异性读取者,OGG1对底物的识别、结合或切除会引发DNA构象或组蛋白修饰的改变,进而引起基因表达的上调或下调。因此,除了潜在的遗传毒性,鸟嘌呤氧化损伤与肿瘤的关联与其通过表观遗传学机制引发基因表达的异常密切相关。本文对8-oxoG及修复酶OGG1与肿瘤发生发展的关联机制进行了分析与总结,旨在提示研究人员从新的视角解读DNA氧化损伤与肿瘤的关系,并为肿瘤的治疗提供新的思路和靶点。

一种新的混合斑精子分离方法

制备了精子表面膜抗原受精素β蛋白（Fertilinβ）的特异性抗体,通过抗原-抗体反应和抗体固相偶联技术,将抗体连接到琼脂糖球珠上,建立了混合斑精子分离纯化的新方法.首先,通过聚合酶链式反应（PCR）扩增编码人受精素β蛋白第341~373位氨基酸的基因序列,构建PGEX-4T-1/Fertilinβ原核表达质粒;其次,诱导表达GST-Fertilinβ融合蛋白,制备受精素β蛋白多克隆抗体,免疫荧光检测结果表明,受精素β蛋白定位于精子的头后部,并且阴道上皮细胞没有受精素β蛋白的表达;最后,将受精素β抗体与ProteinA琼脂糖球珠连接构建固相抗体系统,将精子吸附于表面,可从混合斑（精子与阴道上皮细胞混合液）中分离纯化精子.本文为性犯罪案件侦破提供了新的方法.

植物三维染色质构型研究进展

染色质在细胞核内的缠绕、折叠及其在细胞核内的空间排布是真核生物染色质构型的主要特征。在经典DNA探针荧光原位杂交显微观察的基础上,基于新一代测序技术的Hi-C及ChIA-PET染色质构型捕获技术已经被广泛应用于动物及植物细胞核染色质构型的研究中,并以新的角度定义了包括:染色体(质)域(chromosome territory)、A/B染色质区室(compartment A/B)、拓扑偶联结构域(topological associated domains,TADs)、染色质环(chromatin loops)等在内的多个更为精细的染色质构型。利用以上两种主流技术,越来越多的植物物种染色质构型特征被鉴定、分析和比较。本文系统分析和总结了近年来以植物细胞为模型的细胞核染色构型领域取得的重要成果,包括各级染色质构型特征的组成、建立机制和主要影响因素等。在此基础上,分析了目前研究植物染色质构型技术的瓶颈和突破性的技术进展,并对后续研究主要关注的问题和研究内容进行了展望,以期为相关领域的研究提供更多的理论参考和依据。

植物长链非编码RNA与DNA甲基化

DNA胞嘧啶甲基化(简称DNA甲基化)是植物重要的表观遗传修饰之一,在调控植物逆境下的基因表达和维持基因组稳态方面发挥重要作用。与DNA甲基化类似,长链非编码RNA (long non-coding RNA, lnc RNA)作为另一类参与表观遗传修饰的重要分子,也可参与到植物生长发育以及抗逆的响应中。随着植物中RNA介导的DNA甲基化(RNA-directed DNA methylation, RdDM)过程的逐步解析,大量研究发现lnc RNA在Rd DM途径中起到关键的作用。DNA甲基化与lnc RNA之间的互作逐渐受到广泛关注。本文主要就近年来国内外以植物为模型探究甲基化与lnc RNA之间相互作用的研究成果进行了归纳;对植物lnc RNA鉴定和分析中存在的问题进行了总结,并提出了改进建议;最后,对植物lnc RNA的功能研究进行了后续展望。

植物多倍化与多倍体基因组进化研究进展

多倍化(polyploidization)是指细胞核中的染色体组发生加倍并以可遗传的方式传递至后代的现象.虽然已有研究揭示多倍化事件普遍出现于被子植物各类群的进化过程中,但其对物种多样化与基因组进化的作用始终都处于争论之中.近年来随着基因组测序的革命性进步与多种组学和分子生物学技术的应用,植物多倍化与多倍体基因组进化领域的研究已取得多方面的重要进展.本文首先系统地介绍了植物多倍化的研究历史、多倍体分类系统以及该领域目前存在的主要学术争论.在此基础上,侧重从染色体数目与结构、DNA和组蛋白表观遗传修饰以及RNA和蛋白质表达等多个层次,对在多倍体小麦、油菜与棉花等模式作物中所取得的研究成果进行了较详细的概括.期望本文通过对最新研究成果的总结与未来研究展望,进一步增进对多倍化在植物物种多样性形成与基因组进化过程中重要作用的理解,促进我国植物多倍化研究领域的发展.