沙棘根瘤的解剖学研究

为了解沙棘根瘤的固氮能力 ,对其进行了形态结构和解剖结构的研究。结果表明 :沙棘 (Hippophaerhamnoides)的根系发达 ,具有很强的分蘖能力 ,而且能和放线菌中的弗兰克氏菌 (Frankia)共生 ,形成根瘤。对根瘤生长、发育及形成的泡囊进行了研究 ,明确了根瘤的寄生部位和泡囊的固氮情况 。

以植物作为生物反应器生产药用蛋白

利用植物生物反应器生产药用蛋白具有非常重要的商业价值,植物生物反应器主要包括稳定表达体系和瞬时表达体系,结合我们的研究结果,本文对这两种体系的侵染方法、主要优缺点等方面进行了论述。

转基因轮状病毒疫苗植物表达载体的构建及GUS基因表达

目的 选用植物细胞表达轮状病毒结构蛋白 ,拟构建有效植物细胞表达系统。方法 利用PT -PCR扩增A组轮状病毒外壳蛋白VP4基因片段 ,经双酶切后与植物表达载体连接 ,转化感受态细菌TG1。利用地高辛标记探针进行斑点杂交检测 ,筛选出阳性克隆 ,拟用该克隆转化马铃薯细胞 ,研制新型轮状病毒疫苗。本研究还利用 β -葡萄糖苷酸酶 (GUS)基因转化马铃薯细胞。结果 A组轮状病毒SA11株VP4基因产物大小与设计相同 ,为 96 0bp。在被检测的未知载体中 ,有四个显紫色斑 ,可判定其为带有VP4cDNA的转化载体。用肉眼或显微镜可观察到马铃薯组织细胞中的蓝色物质。结论在转基因植物组织器官中观察到GUS的活性 ,获得外源基因转化的条件。拟用本研究构建的表达载体转化马铃薯细胞 ,研制新型轮状病毒疫苗。

新型人肿瘤坏死因子基因在血管内皮细胞中的靶向表达

目的探索一条肿瘤特异性基因治疗的新途径。方法将新型人 TNF- α D11a基因和 KDR特异性启动子插入到 3’L TR缺失 2 99bp的逆转录病毒载体 p L XSN中 ,构建成 p L XSN- D2 99- KDRp- TNF- α D11a重组逆转录病毒载体 ,使目的基因转录受 KDR启动子驱动。通过脂质体介导将该重组载体转染 PA317包装细胞 ,并用病毒上清感染血管内皮细胞和NIH3T3细胞。分别经 EL ISA和 MTT法测定 TNF- α D11a在血管内皮细胞中的表达及其生物学活性。结果成功构建了携带 TNF- α D11a和 KDR启动子的逆转录病毒载体 ,TNF- α D11a在血管内皮细胞中的表达水平及细胞增殖抑制作用均高于NIH3T3细胞。结论 KDR启动子可使外源 TNF-

室内装修致空气污染的研究

目的 了解装修所致室内空气污染状况。方法 以装修 3个月的住宅为短时间组 ,以装修 1年的住宅为长时间组 ,以装修 10年以上的住宅为对照组。分别测定空气中的一氧化碳、二氧化碳、甲醛、COD含量。结果 4项指标中 ,一氧化碳、二氧化碳浓度在 3个组中无显著差异。装修 3个月的住宅 ,甲醛和COD的浓度超标率均为 10 0 % ;装修 1年的住宅 ,甲醛和COD浓度超标率分别为 72 %和 10 0 % ;装修 10年以上的住宅 ,甲醛和COD的浓度超标率分别为 8%和 0。短时间组的甲醛和COD浓度明显高于长时间组 ;长时间组甲醛和COD浓度明显高于对照组。通风前后甲醛浓度差异具有显著性。结论 在新装修住宅中甲醛和COD污染较严重 ,随着装修时间的延长 ,甲醛和COD浓度明显下降 ,通风后甲醛浓度低于通风前。

植物中RNA分子系统运输的研究进展

RNA分子主要以单链的形式存在于生物体内,既担负着贮存及转移遗传信息的作用,又能作为核酶直接在细胞内发挥代谢功能. 在植物中RNA也可作为活跃的信号分子调控基因表达和发育. 介绍了包括病毒RNA、RNA沉默信号、特异内源RNA等RNA分子,在植物体内的系统运输及其在植物基因表达调控中所起作用的研究进展.

Neogenin表达下调与神经胶质瘤发生、发展的关系

背景与目的:神经胶质瘤是中枢神经系统最常见肿瘤,其发病机制尚不明确。Neogenin表达异常与多种癌症进展及预后相关,是一个潜在的肿瘤抑制因子。本研究的目的在于阐明Neogenin在神经胶质瘤发生和进展过程中的作用。方法:通过对小鼠正常脑组织及人神经胶质瘤组织及肿瘤周边脑组织进行免疫组织化学方法染色,分析Neogenin在正常脑组织及肿瘤组织中的细胞内分布差异,以及其在胶质瘤中表达水平较其周边脑组织表达的差别;进一步分析其在不同级别胶质瘤中的表达水平差异;最后通过MSP法分析Neogenin在神经胶质瘤中的启动子甲基化水平。结果:我们发现Neogenin在小鼠脑中表达丰富,主要位于神经胶质细胞的胞膜上;Neogenin在肿瘤区域的平均表达水平较周边区域低,其在肿瘤区域主要胞浆内呈弥散分布。对69例原发胶质瘤患者的肿瘤组织进行免疫组织化学分析,进一步确认了Neogenin在神经胶质瘤中表达水平与肿瘤的恶性程度呈负相关(One-Way ANOVA,n=69,P<0.01)。通过甲基化特异性PCR法分析表明,Neogenin的启动子在37.5%(3/8)的人神经胶质瘤组织中存在甲基化,但是我们在3株人脑胶质瘤细胞系中未检测到Neogenin启动子甲基化现象。结论:Neogenin与神经胶质瘤的发生、发展有关,其启动子部分甲基化可能是导致Neogenin表达下调的原因之一,这种表达下调为神经胶质瘤的起源、发展提供了选择性优势。

黄瓜ERAF17基因的克隆及相关功能载体构建

目的:探讨黄瓜性别相关基因ERAF17在黄瓜性别调控过程中的作用。方法:通过RT-PCR法克隆黄瓜性别相关基因ERAF17,利用分子克隆技术将目的片段连入植物化学诱导表达载体pER8,选择部分ERAF17序列构建含有目的片段发卡结构的沉默载体。构建原核表达载体pET-28a-ERAF17在大肠杆菌中诱导表达ERAF17蛋白并进行纯化。结果:成功构建了植物化学诱导表达载体pER8-ERAF17和含有目的片段发卡结构的沉默载体pMBW330-ERAF17-hp,在含有pET-28a-ERAF17原核表达载体的大肠杆菌中加入IPTG诱导3h后ERAF17表达量最高,通过NT-agerose介质成功纯化出ERAF17的编码蛋白。结论:所构建载体可用于ERAF17基因的功能研究。