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表达藤黄微球菌过氧化氢酶基因的工程大肠杆菌发酵条件优化
被引量:
3
1
作者
张兴群
郑慧琳
+2 位作者
疏翠
陈婷
曹张军
《食品与药品》
CAS
2012年第5期153-158,共6页
目的优化表达重组藤黄微球菌(M.luteus)过氧化氢酶基因工程菌的发酵条件。方法以生物量和目标蛋白表达量为判断标准,利用单因子试验和正交试验在摇瓶水平优化初始pH、IPTG浓度、诱导时机、诱导时间等影响工程菌发酵制备藤黄微球菌过氧...
目的优化表达重组藤黄微球菌(M.luteus)过氧化氢酶基因工程菌的发酵条件。方法以生物量和目标蛋白表达量为判断标准,利用单因子试验和正交试验在摇瓶水平优化初始pH、IPTG浓度、诱导时机、诱导时间等影响工程菌发酵制备藤黄微球菌过氧化氢酶的发酵条件。结果最佳发酵工艺参数:培养基初始pH 6.5,摇床转速180 r/min,装液量75 mL,接种量6%,培养温度37℃,诱导表达时间5 h。蛋白表达量比优化前提高近30%,重组蛋白经Ni-NTA纯化和透析后,酶活性为166.0 U/(mg.protein),以实验条件相同野生菌酶活100.0 U/(mg.protein)为对照,重组酶的酶活性提高66%。结论工艺优化后,酶表达量及酶活性均显著提高。
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关键词
过氧化氢酶
融合表达
Ni-NTA亲合层析
发酵工艺
下载PDF
职称材料
藤黄微球菌过氧化氢酶基因在大肠杆菌中的重组与表达
被引量:
1
2
作者
尚柯
郑宪友
+3 位作者
陈婷
疏翠
曹张军
张兴群
《食品与药品》
CAS
2012年第2期81-84,共4页
目的应用基因重组技术在大肠杆菌中高效表达藤黄微球菌过氧化氢酶(catalase,CAT)。方法从藤黄微球菌DNA中获得CAT编码基因,并应用pProEx-HTa质粒构建融合表达载体并表达和检测活性。结果通过融合表达获得可溶性带6×His标签重组蛋白...
目的应用基因重组技术在大肠杆菌中高效表达藤黄微球菌过氧化氢酶(catalase,CAT)。方法从藤黄微球菌DNA中获得CAT编码基因,并应用pProEx-HTa质粒构建融合表达载体并表达和检测活性。结果通过融合表达获得可溶性带6×His标签重组蛋白,该蛋白经过Ni-NTA纯化后可获得活性物质。结论从大肠杆菌表达体系中表达了具有生物活性的CAT。
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关键词
过氧化氢酶基因:大肠杆菌
克隆
表达
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职称材料
题名
表达藤黄微球菌过氧化氢酶基因的工程大肠杆菌发酵条件优化
被引量:
3
1
作者
张兴群
郑慧琳
疏翠
陈婷
曹张军
机构
东华大学/江南大学生态纺织教育部重点实验室
东华大学
化学化工与生物工程学院
出处
《食品与药品》
CAS
2012年第5期153-158,共6页
基金
上海市科委纳米技术专项(1052nm05702)资助
文摘
目的优化表达重组藤黄微球菌(M.luteus)过氧化氢酶基因工程菌的发酵条件。方法以生物量和目标蛋白表达量为判断标准,利用单因子试验和正交试验在摇瓶水平优化初始pH、IPTG浓度、诱导时机、诱导时间等影响工程菌发酵制备藤黄微球菌过氧化氢酶的发酵条件。结果最佳发酵工艺参数:培养基初始pH 6.5,摇床转速180 r/min,装液量75 mL,接种量6%,培养温度37℃,诱导表达时间5 h。蛋白表达量比优化前提高近30%,重组蛋白经Ni-NTA纯化和透析后,酶活性为166.0 U/(mg.protein),以实验条件相同野生菌酶活100.0 U/(mg.protein)为对照,重组酶的酶活性提高66%。结论工艺优化后,酶表达量及酶活性均显著提高。
关键词
过氧化氢酶
融合表达
Ni-NTA亲合层析
发酵工艺
Keywords
catalase
fusion expression
Ni-NTA affinity chromatography
fermentation condition
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
藤黄微球菌过氧化氢酶基因在大肠杆菌中的重组与表达
被引量:
1
2
作者
尚柯
郑宪友
陈婷
疏翠
曹张军
张兴群
机构
东华大学/江南大学生态纺织教育部重点实验室
上海交通
大学
附属第六人民医院骨科
东华大学
化学化工与生物工程学院
出处
《食品与药品》
CAS
2012年第2期81-84,共4页
基金
上海市科委纳米技术专项(1052nm05702)
文摘
目的应用基因重组技术在大肠杆菌中高效表达藤黄微球菌过氧化氢酶(catalase,CAT)。方法从藤黄微球菌DNA中获得CAT编码基因,并应用pProEx-HTa质粒构建融合表达载体并表达和检测活性。结果通过融合表达获得可溶性带6×His标签重组蛋白,该蛋白经过Ni-NTA纯化后可获得活性物质。结论从大肠杆菌表达体系中表达了具有生物活性的CAT。
关键词
过氧化氢酶基因:大肠杆菌
克隆
表达
Keywords
catalase gene
E. coli
cloning
expression
分类号
Q554.6 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
表达藤黄微球菌过氧化氢酶基因的工程大肠杆菌发酵条件优化
张兴群
郑慧琳
疏翠
陈婷
曹张军
《食品与药品》
CAS
2012
3
下载PDF
职称材料
2
藤黄微球菌过氧化氢酶基因在大肠杆菌中的重组与表达
尚柯
郑宪友
陈婷
疏翠
曹张军
张兴群
《食品与药品》
CAS
2012
1
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职称材料
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