神经重症监护病房卒中相关性肺炎的预测因素与临床特点

目的探讨神经重症监护病房中急性脑卒中患者卒中相关性肺炎(SAP)的发生率、发病时间、危险因素及病原学特点。方法回顾分析医院2005年7月-2006年10月神经重症监护病房中的急性脑卒中患者,探讨SAP的危险因素,并分析其病原学特点及死亡率。结果神经重症监护病房中SAP发生率为40.8%,其中的55.4%为早发性肺炎;有卒中病史、呛咳症状、APACHEⅡ评分≥20分及脑干/小脑卒中的患者,早发性肺炎的发生率较高;有心影增大、肺部疾病、昏迷及呛咳症状的患者,晚发性肺炎的发生率较高;病程中不同时间点痰培养检出的菌株中以真菌最多,占42.5%,主要是白色假丝酵母菌;革兰阴性杆菌占34.2%,主要是大肠埃希菌;革兰阳性球菌23.3%,主要是金黄色葡萄球菌;发生SAP的患者死亡率高达32.1%。结论神经重症监护病房中SAP发生率高,真菌感染率高,死亡率高;多发生在住院后的72 h内;早发性与晚发性肺炎的危险因素不同。

区域性危重新生儿转运系统建立的意义

目的 探讨建立区域性危重新生儿转运系统的意义。方法3年来危重新生儿转运系统共转运新生儿1462例，其中早产儿533例，足月儿929例；出生体质量850～1500g164例，1500-2500g276例，2500-4000g948例，4000-4500g74例；病种以新生儿窒息和新生儿肺炎为主。结果转诊人数逐年增多，2002年7月-2003年6月转诊271例，2003年7月-2004年6月转诊460例，2004年7月-2005年6月转诊731例，无1例在转运途中死亡，治愈1352例（治愈率92．5％），放弃治疗75例（占7．1％），死亡35例（占2．4％）。结论建立区域性危重新生儿转运系统是降低新生儿死亡率、减少伤残及改善患儿预后的重要措施。

去甲基化在白血病上的研究进展

DNA甲基化是白血病表观遗传学改变中较常见的改变。在白血病的发展中,甲基化对基因表达的调控和基因结构的稳定起着重要的作用。造血干细胞移植和化疗是目前治疗白血病的常用方法。遗憾的是,合适的移植供者难以找到,而且白血病的复发和耐药是化疗中的大问题。由于甲基化的可逆性,降低甲基化水平的药物就成了治疗白血病的新手段。地西他滨是用于降低甲基化的常用药物。本文对甲基化与肿瘤、甲基化与血液病,甲基化的检测方法和去甲基化治疗等问题进行了综述。

动脉粥样硬化炎症靶向的MR分子影像学

动脉粥样硬化是慢性炎性血管疾病,许多炎性细胞和分子参与斑块的形成及发展。斑块的组成成分决定斑块的易损或不稳定型,MRI能在分子和细胞水平评价斑块的成分,进而区分易损斑块与不稳定型斑块,并可体内检测抗动脉粥样硬化的治疗效果。现就易损斑块特异性的炎症靶向分子成像进展作一综述。

乳腺癌中NDRG-1基因甲基化状态研究

目的研究NDRG1基因启动子区甲基化状态,探讨NDRG-1基因甲基化在乳腺癌发生中的作用。方法采用双色荧光杂交微阵列基因芯片技术对33对乳腺癌标本和癌旁组织标本NDRG-1基因启动子区甲基化状态进行研究。结果肿瘤标本和癌旁组织标本中NDRG-1基因启动子区CpG位点均有不同程度的甲基化,肿瘤组织中NDRG-1基因启动子区CpG位点甲基化率明显高于相应的癌旁组织(t=14.12,P<0.05)。结论NDRG-1基因启动子区过甲基化可能在乳腺癌的发生过程中起重要作用。

异硫氰酸苯己酯降低U266细胞株p16基因甲基化的研究

本研究探讨异硫氰酸苯己酯对p16基因高甲基化的多发性骨髓瘤U266细胞株是否有去甲基化的作用。用异硫氰酸苯己酯0、5、10μmol/L孵育U266细胞株,提取DNA备用。用亚硫酸氢盐处理正常人基因组DNA,并以此为模板进行PCR扩增。设计1组特殊荧光标记探针以构建1种检测p16基因启动子区3个CpG位点甲基化改变的芯片,特殊荧光标记探针包括1对非甲基化探针和甲基化探针,检测相邻的3个CpG位点甲基化的程度。采用基因芯片的方法,将完全未甲基化的DNA和完全甲基化的DNA混合后制成标准曲线,将U266细胞株样本处理后点在芯片上与标准曲线进行比较后得出定量检测的结果。结果表明:芯片上探针的可重复性和精确性很好,0、5、10μmol/L异硫氰酸苯己酯处理后的U266细胞株p16基因的甲基化程度分别为78.2%、61.7%、54.8%。结论:异硫氰酸苯己酯可以降低U266细胞株p16基因甲基化的程度。

蛋白芯片技术及其在血液病中的应用

蛋白质微阵列是既基因芯片技术之后又一重大的技术突破。它在蛋白质组学的研究中将起重要作用,可以用于疾病基础研究、诊断、疗效监测等方面。它具有高通量、自动化、灵敏度高和可用于多元分析等优点。本文就蛋白芯片原理、相关的制备方法与检测技术及其在血液病中的应用等方面进行了综述,并对现阶段该技术存在的不足和发展前景进行了讨论。

微乳液多重PCR基因芯片法在早孕期无创性胎儿性别诊断中的应用

目的 探讨微乳液多重PCR基因芯片法在早孕期无创性胎儿性别诊断中的应用价值。方法 收集138例4—12孕周孕妇的外周血液样品，提取血浆DNA。选取胎儿DNAY染色体上的6个特异性序列SRY1、SRY2、SRY3、DYS1、DYS14和DYZ3基因作为男性胎儿标志物，采用微乳液PCR进行扩增，同时标记荧光，以β-globin基因作为阳性内对照。扩增产物与固定在基因芯片上的探针分子杂交，采用ScanArray 5000扫描仪扫描芯片。检测结果与胎儿出生性别进行比较。结果 最早的检出样品来自孕31d的孕妇，在78份男性胎儿孕育者血样中，有76份样本6个Y染色体特异序列均为阳性；60份女性胎儿孕育者血样中没有一个Y染色体特异序列阳性。微乳液多重PCR基因芯片法对男性胎儿早孕期检测的灵敏度达到97．4％，特异度达到100％。结论 微乳液多重PCR基因芯片法检测孕妇外周血中男性胎儿DNA的方法具有较高的灵敏度和特异度，能够早期鉴定胎儿性别，对性连锁遗传病的筛选具有潜在的应用价值。

谷氨酰胺对脂多糖诱导鼠心肌细胞损伤的保护作用

目的观察谷氨酰胺(Gln)对脂多糖(LPS)诱导鼠心肌细胞损伤的保护作用及可能机制。方法乳鼠心肌细胞原代培养分成四组:G组,给予5mMGln;GL组,给予5mMGln+4μg/mlLPS;L组,给予4μg/mlLPS;C组(对照组)给予等量双蒸水。细胞干预处理6h后,测定各组心肌细胞生存率、心肌细胞培养液乳酸脱氢酶(LDH)活力、心肌细胞热休克蛋白(HSP)70及胞核热休克因子(HSF)-1蛋白水平和心肌细胞核HSF-1转录活性。结果四组心肌细胞生存率差异无统计学意义。GL组、L组细胞培养液LDH活力明显高于C组(P<0.05),L组高于GL组。G、GL、L组细胞HSP70蛋白表达水平、细胞核HSF-1蛋白表达水平及转录活性明显高于C组(P<0.05),GL组明显高于G组和L组(P<0.05)。结论Gln减少LPS诱导鼠心肌细胞的损伤,可能与Gln增加心肌细胞核内HSF-1水平及转录活性,进而促进HSP70蛋白表达有关。

甲基化特异性微阵列法定量检测恶性血液病患者p16基因甲基化

DNA甲基化是细胞的一种表观遗传现象，也是一种重要的影响基因表达的机制。当DNA异常甲基化时会导致癌基因的激活和抑癌基因的沉默，促使肿瘤的发生^[1]。研究表明，CpG二核苷酸是肿瘤中癌基因和抑癌基因突变的热点^[2]。目前研究DNA甲基化的技术包括Southern blot法、限制性内切酶-PCR法、DNA测序法、甲基化特异性PCR（MSP）、单链核苷酸引物延伸法、变性高压液相色谱法等。

O-GlcNAc修饰在谷氨酰胺诱导LPS干预的大鼠心肌细胞HSP70表达中的作用

目的 探讨O位-N-乙酰葡萄糖胺（O-GlcNAc）修饰在谷氨酰胺（Gln）诱导LPS干预的大鼠心肌细胞热休克蛋白70（HSP70）表达中的作用.方法 出生48 h的SD大鼠,原代培养心肌细胞,随机分为6组,每组11瓶（1×106个,瓶）：对照组（C组）加入双蒸水25 μl;Gln组加入Gln,终浓度5 mmol/L;LPS组加入LPS,终浓度4 μg/ml;Gin＋LPS组依次加入Gln和LPS,Gin终浓度5 mmol/L,LPS 终浓度4 μg/ml;Gln＋LPS＋Alloxan组依次加入Gln、LPS和O位-N-乙酰氨基葡萄糖转移酶抑制剂Alloxan,Gln和LPS终浓度与Gln＋LPS组相同,Alloxan终浓度1 mmol/L;Gln＋LPS＋PUGNAc组依次加入Gln、LPS和O位-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶抑制剂PUGNAc,Gln和LPS终浓度与Gln＋LPS组相同,PUGNAc终浓度100 μmol/L.各组孵育6 h后测定心肌细胞存活率、O-GlcNAc和HSP70的表达水平.结果 各组大鼠心肌细胞存活率比较差异无统计学意义（P〉0.05）;与C组比较,其余组心肌细胞0.GlcNAc和HSP70的表达上调（P〈0.05）;与LPS组比较,Gln＋LPS组和Gln＋LPS＋PUGNAc组心肌细胞O-GlcNAc和HSP70的表达上调（P〈0.05）;与Gln＋LPS组比较,Gin＋LPS＋Alloxan组心肌细胞0-GlcNAc和HSP70的表达下调,Gln＋LPS＋PUGNAc组心肌细胞O-GlcNAc和HSP70的表达上调（P〈0.05）.结论 Gln诱导LPS干预大鼠心肌细胞HSPT0表达上调的机制可能与O-GlcNAc修饰有关.

P2X受体在大鼠海马氧糖缺失时IL-1β合成和释放中的作用

目的 探讨P2X受体在大鼠海马氧糖缺失时IL-1β合成和释放中的作用.方法 成年雄性SD大鼠,体重150～200 g,制备海马脑片,取160张,随机分为4组（n=40）,C组：用95%O2-5%CO2饱和aCSF孵育;OGD组：脑片移至经95%N2-5%CO2饱和的无糖aCSF中,并置于持续通入95%N2-5%CO2的容器内进行氧糖缺失处理;BBG组：脑片移至含P2X7受体特异性拮抗剂亮蓝G（BBG,终浓度1μmol/L）的经95%O2-5%CO2饱和的aCSF中,孵育20 min,随后进行氧糖缺失处理,无糖aCSF中加入终浓度1 μmol/L的BBG;OP组：脑片移至加入P2X4受体单克隆抗体（终浓度1.5μg/ml）的经95%O2-5%CO2饱和的aCSF中孵育60 min,随后进行氧糖缺失处理,无糖aCSF中加入终浓度1.5 μg/ml的P2X4受体单克隆抗体.于氧糖缺失前及氧糖缺失20、40和60 min时测定LDH和IL-1β的释放量,并观察病理学结果.于氧糖缺失60 min时测定细胞内IL-1β前体蛋白（pro-IL-1β）的表达水平.结果 与C组比较,其余各组LDH和IL-1β释放量升高,细胞内pro-IL-1β表达上调（P＜0.05）;与OGD组比较,BBG组LDH和IL-1β释放量降低,细胞内pro-IL-1β表达上调（P＜0.05）,OP组上述指标差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 P2X7受体介导了大鼠海马氧糖缺失时IL-1β的合成和释放,而P2X4受体没有介导IL-1β的合成和释放.

急性缺血性卒中患者的血压管理

急性缺血性卒中患者在发病最初24h内一般会出现血压增高，且血压水平与患者预后相关。在缺血性卒中急性期的血压管理中，无论是试图升压或是降压治疗都存在争议。文章综述了缺血性卒中急性期血压变化以及血压管理与卒中预后的关系。