血管内皮抑素基因转染人脐带血CD34^+造血干细胞的实验研究

目的:探讨人血管内皮抑素(内抑素)基因转染人脐带血CD34+造血干细胞的方法及检测。 方法:用逆转 录病毒载体pLNCX,将人内抑素基因导入人脐带血CD34+造血干细胞。应用PCR及Westernbolt方法检测人内抑 素基因的转染和表达。 结果:PCR证实,转染内抑素基因的人脐带血CD34+造血干细胞基因组中有550bp人内 抑素特异性片段,Westernbolt分析示人内抑素基因在转染细胞中获得稳定表达和分泌。 结论:人内抑素基因可 转染到人脐带血造血干细胞中并稳定表达。

celecoxib抑制肝癌细胞株SMMC-7721增殖及诱导凋亡的研究

背景与目的:肝癌发病率高,治疗效果差,通过研究选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂celecoxib对人肝癌细胞株SMMC-7721增殖、凋亡的影响,为治疗肝癌提供依据。方法:采用四氮唑盐比色法(MTT法)观察细胞增殖活力改变,流式细胞仪检测细胞凋亡率,透射电镜观察细胞形态改变,DNA提取行琼脂糖凝胶电泳观察DNA的"梯状"条带,免疫组化观察bcl-2基因和bax基因表达情况。结果:MTT法显示celecoxib在25、50、75、100μmol/L浓度下,24h抑制率分别为(15±3)%、(34.6±2.4)%、(56.8±1.0)%、(86.2±0.4)%,48h抑制率分别为(33.4±0.7)%、(66.7±1.8)%、(76.1±2.4)%、(97.3±0.8)%,(P<0.05);透射电镜观察到细胞凋亡的特征形态改变,如细胞体积缩小,胞膜皱缩,表面微绒毛消失,核固缩、异染色质沿核膜分布,有凋亡小体;流式细胞仪测定celecoxib组出现凋亡峰:24h50μmol/L组凋亡率分别为(14.6±1.1)%,100μmol/L组24、48h凋亡率分别为(40.5±2.0)%、(56.2±1.4)%,(P<0.01);DNA提取行琼脂糖凝胶电泳可见DNA的"梯状"条带,免疫组化显示经celecoxib干预后,bax基因表达增加,由阳性到强阳性,而bcl-2基因表达减少,由强阳性到弱阳性,并随时间和药物浓度变化而变化。结论:celecoxib抑制SMMC-7721细胞增殖,并呈剂量、时间依赖性,诱导SMMC-7721细胞凋亡,其机制之一可能是通过减少bcl-2基因的表达,而增加bax基因的表达,从而启动细胞凋亡。

噻唑烷二酮类药物抗动脉粥样硬化的作用机制

噻唑烷二酮类药物是临床治疗2型糖尿病的口服降糖药之一,通过结合与过氧化酶增殖体活化受体γ发挥作用,除了对胰岛素敏感组织产生作用而改善胰岛素抵抗外,还通过改善脂质代谢紊乱、改善血管内皮功能、抑制炎症介质的释放和基质金属蛋白酶的合成、影响血管紧张素Ⅱ受体的表达和泡沫细胞的形成、增加脂联素的表达、抑制核因子κB的激活等机制发挥抗动脉粥样硬化的作用。